关于CD133作为成纤维细胞转分化为神经干细胞筛选标记的研究
| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语索引 | 第14-15页 |
| 第一章 绪论 | 第15-33页 |
| 1.1 研究目的与理论意义 | 第15-16页 |
| 1.2 研究背景 | 第16-22页 |
| 1.2.1 神经干细胞的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.2 神经干细胞与疾病 | 第17-18页 |
| 1.2.3 神经干细胞的获取 | 第18-19页 |
| 1.2.4 转分化的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.2.5 CD133的研究进展 | 第21-22页 |
| 1.3 理论分析 | 第22-33页 |
| 1.3.1 原代成纤维细胞 | 第22-23页 |
| 1.3.2 病毒包装方法 | 第23-24页 |
| 1.3.3 293T细胞的培养 | 第24页 |
| 1.3.4 钙转法包装病毒 | 第24-26页 |
| 1.3.5 细胞传代方法和时间 | 第26页 |
| 1.3.6 诱导培养液中的关键成分 | 第26-28页 |
| 1.3.7 神经干细胞的维持培养 | 第28页 |
| 1.3.8 神经干细胞的鉴定分析 | 第28-29页 |
| 1.3.9 成纤维细胞鉴定方法 | 第29-30页 |
| 1.3.10 神经干细胞的分化 | 第30页 |
| 1.3.11 免疫荧光染色技术 | 第30-31页 |
| 1.3.12 流式细胞术 | 第31-32页 |
| 1.3.13 其他 | 第32-33页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第33-55页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-40页 |
| 2.1.1 实验细胞 | 第33页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第33-34页 |
| 2.1.3 实验试剂与药品 | 第34-36页 |
| 2.1.4 实验抗体 | 第36页 |
| 2.1.5 试剂液体配方 | 第36-40页 |
| 2.2 实验方法 | 第40-54页 |
| 2.2.1 质粒准备及鉴定 | 第40-46页 |
| 2.2.2 原代成纤维细胞的获取 | 第46页 |
| 2.2.3 原代成纤维细胞的传代 | 第46-47页 |
| 2.2.4 原代成纤维细胞的冻存 | 第47页 |
| 2.2.5 原代成纤维细胞的复苏 | 第47-48页 |
| 2.2.6 病毒的包装与浓缩 | 第48-50页 |
| 2.2.7 病毒滴度测定 | 第50页 |
| 2.2.8 细胞感染及转分化诱导 | 第50-51页 |
| 2.2.9 三种病毒的感染效率 | 第51-52页 |
| 2.2.10 转分化过程中CD133的表达情况 | 第52页 |
| 2.2.11 细胞流式分析 | 第52页 |
| 2.2.12 转分化细胞鉴定 | 第52-53页 |
| 2.2.13 细胞计数方法 | 第53页 |
| 2.2.14 支原体检测方法 | 第53-54页 |
| 2.3 数据统计学处理 | 第54-55页 |
| 第三章 结果与分析 | 第55-67页 |
| 3.1 原代猕猴新生猴成纤维细胞株的获得 | 第55-56页 |
| 3.1.1 原代成纤维细胞获得情况 | 第55-56页 |
| 3.2 病毒包装过程 | 第56-61页 |
| 3.2.1 病毒载体质粒鉴定 | 第56-57页 |
| 3.2.2 293T细胞培养及细胞转染 | 第57-58页 |
| 3.2.3 转染效率评估 | 第58-59页 |
| 3.2.4 病毒感染成纤维细胞及感染效率统计 | 第59-61页 |
| 3.3 转分化诱导过程 | 第61-63页 |
| 3.3.1 新生猴成纤维细胞转分化诱导 | 第61-62页 |
| 3.3.2 CD133表达动态 | 第62-63页 |
| 3.4 流式分析 | 第63-64页 |
| 3.5 神经鉴定 | 第64-67页 |
| 3.5.1 神经标志物免疫荧光染色 | 第64-65页 |
| 3.5.2 神经分化鉴定 | 第65-67页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第67-69页 |
| 4.1 结论 | 第67页 |
| 4.2 讨论 | 第67-69页 |
| 第五章 总结与展望 | 第69-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 附录Ⅰ 期刊论文 | 第83-84页 |
| 附录Ⅱ 引物序列 | 第84页 |
