| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第13-34页 |
| 1.1 引言 | 第13-31页 |
| 1.1.1 研究背景 | 第13-14页 |
| 1.1.2 国内外研究进展 | 第14-31页 |
| 1.2 研究目标与主要研究内容 | 第31-32页 |
| 1.2.1 关键的科学问题与研究目标 | 第31页 |
| 1.2.2 主要研究内容 | 第31-32页 |
| 1.3 研究技术路线 | 第32-33页 |
| 1.4 项目来源和经费支持 | 第33-34页 |
| 第二章 白蜡虫ws基因c DNA全长克隆及序列分析 | 第34-51页 |
| 2.1 实验试剂与仪器 | 第35-36页 |
| 2.1.1 试剂 | 第35页 |
| 2.1.2 仪器 | 第35-36页 |
| 2.2 试验方法 | 第36-40页 |
| 2.2.1 RNA提取 | 第36页 |
| 2.2.2 RACE模板制备 | 第36-37页 |
| 2.2.3 RACE引物设计 | 第37页 |
| 2.2.4 RACE PCR扩增体系 | 第37-38页 |
| 2.2.5 PCR产物琼脂糖凝胶电泳检测及回收 | 第38页 |
| 2.2.6 载体连接 | 第38页 |
| 2.2.7 感受态细胞转化 | 第38-39页 |
| 2.2.8 筛选阳性重组克隆及菌液PCR检测 | 第39-40页 |
| 2.2.9 序列比对及系统发育分析 | 第40页 |
| 2.3 结果 | 第40-48页 |
| 2.3.1 白蜡虫ws基因 3’RACE | 第40-41页 |
| 2.3.2 白蜡虫ws基因 5’RACE结果 | 第41-42页 |
| 2.3.3 白蜡虫WS序列分析 | 第42-46页 |
| 2.3.4 系统发育分析 | 第46-48页 |
| 2.4 讨论 | 第48-50页 |
| 2.4.1 与已有研究的比较 | 第48页 |
| 2.4.2 对研究结果的展望 | 第48-50页 |
| 2.5 小结 | 第50-51页 |
| 第三章 白蜡虫WS的原核表达 | 第51-66页 |
| 3.1 实验试剂与仪器 | 第52页 |
| 3.1.1 实验试剂 | 第52页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第52页 |
| 3.2 试验方法 | 第52-58页 |
| 3.2.1 大肠杆菌BL21感受态制备 | 第52-53页 |
| 3.2.2 引物设计 | 第53页 |
| 3.2.3 扩增目的片段 | 第53-54页 |
| 3.2.4 双酶切目的片段和表达载体 | 第54-55页 |
| 3.2.5 表达载体连接及转化 | 第55页 |
| 3.2.6 抗性筛选阳性重组克隆及菌液PCR检测 | 第55-56页 |
| 3.2.7 IPTG诱导原核表达 | 第56页 |
| 3.2.8 蛋白提取及SDS-PAGE | 第56-57页 |
| 3.2.9 Western Blot检测 | 第57-58页 |
| 3.3 结果 | 第58-61页 |
| 3.3.1 p ET-22b/Ep WS载体构建 | 第58-59页 |
| 3.3.2 原核表达及Western Blot检测 | 第59-60页 |
| 3.3.3 Western Blot检测IPTG浓度对大肠杆菌表达的影响 | 第60-61页 |
| 3.3.4 Western Blot检测菌液上清中白蜡虫WS的分布情况 | 第61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-65页 |
| 3.4.1 与已有研究方法的比较 | 第61-63页 |
| 3.4.2 实验中的不足与改进 | 第63-65页 |
| 3.5 小结 | 第65-66页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第66-70页 |
| 4.1 结论 | 第66页 |
| 4.2 讨论 | 第66-70页 |
| 4.2.1 研究工作意义 | 第66-67页 |
| 4.2.2 研究中的不足与改进 | 第67-68页 |
| 4.2.3 应用与展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-75页 |
| 在读期间学术研究 | 第75-76页 |
| 附录A TBE缓冲液的配方 | 第76-77页 |
| 附录B 1％琼脂糖凝胶电泳 | 第77-78页 |
| 附录C 10％SDS-PAGE凝胶配方 | 第78-79页 |
| 附录D 细胞裂解缓冲液配方 | 第79-80页 |
| 附录E 转膜缓冲液配方 | 第80-81页 |
| 附录F PBS缓冲液配方 | 第81-82页 |
| 附录G 考马斯亮蓝染色剂及脱色剂配方 | 第82-83页 |
| 附录H 引物表 | 第83-84页 |
| 致谢 | 第84页 |
