摘要 | 第3-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
第一章 前言 | 第15-31页 |
1.1 乳腺癌 | 第15-25页 |
1.1.1 乳腺癌流行病学 | 第15-17页 |
1.1.2 乳腺癌遗传及易感因素 | 第17页 |
1.1.3 乳腺癌分型 | 第17-19页 |
1.1.4 乳腺癌治疗 | 第19-21页 |
1.1.5 三阴性乳腺癌 | 第21-25页 |
1.2 ILAMYCIN | 第25-31页 |
1.2.1 从海洋生物到抗肿瘤治疗 | 第25-27页 |
1.2.2 Ilamycin家族 | 第27-29页 |
1.2.3 Ilamycin E抗肿瘤活性 | 第29-31页 |
第二章 ILAMYCIN敏感乳腺癌细胞株的筛选 | 第31-43页 |
2.1 实验材料 | 第31-34页 |
2.1.1 细胞 | 第31-32页 |
2.1.2 细胞培养所用试剂 | 第32-33页 |
2.1.3 实验化合物 | 第33页 |
2.1.4 实验试剂 | 第33页 |
2.1.5 实验器材 | 第33-34页 |
2.2 实验技术 | 第34-38页 |
2.2.1 细胞培养、传代 | 第34-35页 |
2.2.2 细胞冻存 | 第35页 |
2.2.3 细胞复苏 | 第35-36页 |
2.2.4 细胞计数 | 第36页 |
2.2.5 细胞支原体检测及去除 | 第36-37页 |
2.2.6 磺酰罗丹明B染色法细胞存活检测(SRB法) | 第37-38页 |
2.2.7 数据处理分析 | 第38页 |
2.3 实验结果 | 第38-40页 |
2.3.1 化合物Ilamycin E抑制乳腺癌细胞存活 | 第38-40页 |
2.4 本章小结及讨论 | 第40-43页 |
2.4.1 本章小结 | 第40-41页 |
2.4.2 讨论 | 第41-43页 |
第三章 ILAMYCIN E在三阴性乳腺癌中的作用 | 第43-66页 |
3.1 实验材料 | 第43-46页 |
3.1.1 实验细胞 | 第43页 |
3.1.2 实验主要试剂及抗体 | 第43-45页 |
3.1.3 实验仪器 | 第45-46页 |
3.2 实验技术 | 第46-51页 |
3.2.1 磺酰罗丹明B(SRB)染色法细胞存活率检测 | 第46页 |
3.2.2 Edu检测化合物Ilamycin E对细胞DNA合成的影响 | 第46-47页 |
3.2.3 流式细胞检测化合物Ilamycin E对细胞周期的影响 | 第47页 |
3.2.4 流式细胞检测化合物Ilamycin E对细胞凋亡的影响 | 第47-48页 |
3.2.5 Western blot检测化合物Ilamycin E对细胞蛋白水平的影响 | 第48-51页 |
3.3 实验结果 | 第51-62页 |
3.3.1 Ilamycin E抑制三阴性乳腺癌细胞存活 | 第51-53页 |
3.3.2 Ilamycin E抑制三阴性乳腺癌细胞DNA合成 | 第53-54页 |
3.3.3 Ilamycin E导致三阴性乳腺癌细胞G1/S期阻滞 | 第54-57页 |
3.3.4 Ilamycin E诱导TNBC细胞凋亡 | 第57-58页 |
3.3.5 Ilamycin E调控TNBC细胞周期、凋亡相关蛋白表达 | 第58-62页 |
3.4 本章小结与讨论 | 第62-66页 |
3.4.1 本章小结 | 第62页 |
3.4.2 讨论 | 第62-66页 |
第四章 ILAMYCIN E抗三阴性乳腺癌作用机制探讨 | 第66-84页 |
4.1 实验材料 | 第66-68页 |
4.1.1 细胞 | 第66页 |
4.1.2 试剂 | 第66页 |
4.1.3 siRNA及Real-time PCR引物序列 | 第66-67页 |
4.1.4 器材 | 第67-68页 |
4.2 实验技术 | 第68-70页 |
4.2.1 细胞转染 | 第68页 |
4.2.2 细胞RNA提取 | 第68-69页 |
4.2.3 逆转录PCR | 第69页 |
4.2.4 实时荧光定量Real-time PCR | 第69-70页 |
4.2.5 SRB及Western blot | 第70页 |
4.3 实验结果 | 第70-80页 |
4.3.1 化合物Ilamycin E下调KLF5、诱导EGR1 | 第70-73页 |
4.3.2 乳腺癌中EGR1的表达不影响KLF5的表达 | 第73-75页 |
4.3.3 化合物Ilamycin E抑制细胞存活不依赖于EGR1的上调 | 第75-76页 |
4.3.4 敲低KLF5不影响化合物Ilamycin E导致的细胞存活抑制 | 第76-79页 |
4.3.5 化合物Ilamycin E诱导内质网应激(Endoplasmic reticulum stress, ERStress) | 第79-80页 |
4.4 本章小结与讨论 | 第80-84页 |
4.4.1 本章小结 | 第80-81页 |
4.4.2 讨论 | 第81-84页 |
第五章 总结、计划与展望 | 第84-87页 |
5.1 总结 | 第84-85页 |
5.2 计划与展望 | 第85-87页 |
参考文献 | 第87-102页 |
个人简历及学术成果 | 第102-103页 |
致谢 | 第103-105页 |