| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 麦芽糖淀粉酶的概述 | 第9-13页 |
| 1.1.1 麦芽糖淀粉酶的细菌来源 | 第9页 |
| 1.1.2 麦芽糖淀粉酶的结构与催化机制 | 第9-11页 |
| 1.1.3 麦芽糖淀粉酶的应用 | 第11-12页 |
| 1.1.4 麦芽糖淀粉酶的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.2 麦芽糖浆的概述 | 第13-15页 |
| 1.2.1 麦芽糖浆的性质及应用 | 第13-14页 |
| 1.2.2 麦芽糖浆的分类 | 第14页 |
| 1.2.3 麦芽糖浆的制备 | 第14页 |
| 1.2.4 麦芽糖的分离纯化 | 第14-15页 |
| 1.3 立题依据及研究意义 | 第15-16页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-25页 |
| 2.1 材料 | 第17-18页 |
| 2.1.1 菌种与质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 工具酶和主要试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第17-18页 |
| 2.1.4 培养基 | 第18页 |
| 2.2 基因工程操作方法 | 第18-21页 |
| 2.2.1 重组菌E.coli工程菌的构建 | 第18-20页 |
| 2.2.2 突变体的构建 | 第20页 |
| 2.2.3 重组菌B. choshinensis工程菌的构建 | 第20-21页 |
| 2.3 发酵方法 | 第21-22页 |
| 2.3.1 重组E. coli BL21(DE3)的摇瓶发酵 | 第21页 |
| 2.3.2 重组B. choshinensis的摇瓶发酵 | 第21页 |
| 2.3.3 重组B. choshinensis的 3-L罐发酵 | 第21-22页 |
| 2.4 分析方法 | 第22-24页 |
| 2.4.1 菌体干重(DCW)的测定 | 第22页 |
| 2.4.2 蛋白质浓度的测定 | 第22页 |
| 2.4.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析 | 第22页 |
| 2.4.4 重组酶的纯化 | 第22页 |
| 2.4.5 重组酶的水解活力测定 | 第22-23页 |
| 2.4.6 重组酶的转苷活力测定 | 第23页 |
| 2.4.7 葡萄糖浓度的测定 | 第23-24页 |
| 2.4.8 DE值的测定 | 第24页 |
| 2.5 酶转化及产物检测方法 | 第24-25页 |
| 2.5.1 麦芽糖浆的制备流程 | 第24页 |
| 2.5.2 麦芽糖浆制备条件优化 | 第24页 |
| 2.5.3 麦芽糖浆制备产物检测 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-53页 |
| 3.1 麦芽糖淀粉酶在E. coli中的重组表达及酶学性质研究 | 第25-30页 |
| 3.1.1 重组麦芽糖淀粉酶基因工程菌的构建 | 第25-26页 |
| 3.1.2 重组麦芽糖淀粉酶在E. coli BL21(DE3)中的表达 | 第26-27页 |
| 3.1.3 重组麦芽糖淀粉酶的纯化 | 第27-28页 |
| 3.1.4 重组麦芽糖淀粉酶的酶学性质鉴定 | 第28-30页 |
| 3.2 麦芽糖淀粉酶的分子改造 | 第30-38页 |
| 3.2.1 突变位点的选择 | 第30-32页 |
| 3.2.2 突变体的构建、表达和纯化 | 第32页 |
| 3.2.3 突变体的酶学性质分析 | 第32-34页 |
| 3.2.4 突变体在麦芽糖浆制备中的应用性能考察 | 第34-36页 |
| 3.2.5 麦芽糖淀粉酶应用性能提升的机制分析 | 第36-38页 |
| 3.3 突变体W177S制备麦芽糖浆的条件优化 | 第38-42页 |
| 3.3.1 液化DE值对麦芽糖浆制备的影响 | 第38-39页 |
| 3.3.2 温度对麦芽糖浆制备的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.3 初始pH对麦芽糖浆制备的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.4 加酶量对麦芽糖浆制备的影响 | 第41-42页 |
| 3.4 突变体W177S在B. choshinensis中的重组表达和发酵优化 | 第42-53页 |
| 3.4.1 重组菌B. choshinensis/w177s/pNCMO2的构建 | 第42-44页 |
| 3.4.2 重组菌在TM培养基中的发酵 | 第44页 |
| 3.4.3 重组菌B. choshinensis/w177s/pNCMO2的摇瓶发酵优化 | 第44-50页 |
| 3.4.4 重组菌B. choshinensis/w177s/pNCMO2的 3-L罐发酵优化 | 第50-53页 |
| 主要结论与展望 | 第53-55页 |
| 主要结论 | 第53页 |
| 展望 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第61页 |
