摘要 | 第16-18页 |
ABSTRACT | 第18-19页 |
第一章 前言 | 第20-32页 |
1.1 石油污染概述 | 第20-22页 |
1.1.1 石油污染的现状 | 第20-21页 |
1.1.2 石油污染的危害 | 第21页 |
1.1.3 石油污染的控制技术 | 第21-22页 |
1.2 微生物对石油烃的降解 | 第22-27页 |
1.2.1 降解石油烃的微生物 | 第22-23页 |
1.2.2 石油烃降解中的关键酶 | 第23-27页 |
1.3 藻类水华概述 | 第27-29页 |
1.3.1 藻类水华的现状及危害 | 第27-28页 |
1.3.2 藻类水华的控制技术 | 第28-29页 |
1.4 细菌溶藻 | 第29-30页 |
1.4.1 溶藻细菌的种类 | 第29-30页 |
1.4.2 细菌的溶藻方式 | 第30页 |
1.4.3 细菌的胞外溶藻物质 | 第30页 |
1.5 研究内容及意义 | 第30-32页 |
第二章 红球菌菌株p52对脂肪烃和芳香烃混合物的降解 | 第32-39页 |
2.1 材料与设备 | 第32-33页 |
2.1.1 实验试剂 | 第32页 |
2.1.2 菌株及培养基 | 第32-33页 |
2.1.3 实验仪器 | 第33页 |
2.2 实验方法 | 第33-34页 |
2.2.1 菌株复苏 | 第33页 |
2.2.2 脂肪烃和芳香烃的降解 | 第33-34页 |
2.3 结果与讨论 | 第34-38页 |
2.3.1 菲与十六烷混合物的降解 | 第34-36页 |
2.3.2 蒽与十六烷混合物的降解 | 第36页 |
2.3.3 十四烷与菲混合物的降解 | 第36-37页 |
2.3.4 十六烷与蒽混合物的降解 | 第37-38页 |
2.4 小结 | 第38-39页 |
第三章 红球菌菌株p52烃降解特性及其对柴油的降解 | 第39-45页 |
3.1 材料与设备 | 第39页 |
3.1.1 实验试剂 | 第39页 |
3.1.2 菌株及培养基 | 第39页 |
3.1.3 实验仪器 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-40页 |
3.2.1 菲的降解 | 第39页 |
3.2.2 柴油的降解 | 第39-40页 |
3.2.3 产表面活性剂特性 | 第40页 |
3.3 结果与讨论 | 第40-43页 |
3.3.1 不同的直链烷烃对菲降解的影响 | 第40-41页 |
3.3.2 不同浓度的十六烷对菲降解的影响 | 第41-42页 |
3.3.3 红球菌菌株p52对柴油的降解 | 第42-43页 |
3.3.4 红球菌菌株p52产表面活性剂性能初步研究 | 第43页 |
3.4 小结 | 第43-45页 |
第四章 红球菌菌株p52烃羟化酶基因cyp185的克隆和表达 | 第45-61页 |
4.1 材料与设备 | 第45-48页 |
4.1.1 实验菌种 | 第45页 |
4.1.2 载体质粒 | 第45-46页 |
4.1.3 实验试剂 | 第46-47页 |
4.1.4 培养基 | 第47-48页 |
4.1.5 实验仪器 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-55页 |
4.2.1 菌株DNA提取 | 第48页 |
4.2.2 引物设计及合成 | 第48页 |
4.2.3 目的基因的扩增 | 第48-49页 |
4.2.4 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第49页 |
4.2.5 PCR产物纯化 | 第49-50页 |
4.2.6 载体质粒的提取 | 第50-51页 |
4.2.7 酶切反应 | 第51页 |
4.2.8 连接反应 | 第51-52页 |
4.2.9 感受态细胞的制备 | 第52页 |
4.2.10 转化 | 第52-53页 |
4.2.11 转化子筛选 | 第53页 |
4.2.12 重组质粒酶切 | 第53-54页 |
4.2.13 重组质粒测序 | 第54页 |
4.2.14 目的基因的诱导表达 | 第54页 |
4.2.15 SDS-PAGE蛋白质电泳检测 | 第54-55页 |
4.3 结果与讨论 | 第55-59页 |
4.3.1 目的基因的扩增 | 第55-56页 |
4.3.2 阳性克隆子的筛选 | 第56-57页 |
4.3.3 重组质粒的酶切验证 | 第57页 |
4.3.4 重组质粒的测序验证 | 第57-58页 |
4.3.5 重组质粒的表达 | 第58-59页 |
4.4 小结 | 第59-61页 |
第五章 红球菌菌株p52烃羟化酶基因alkB1的克隆和表达 | 第61-69页 |
5.1 材料与设备 | 第61页 |
5.1.1 菌种及载体质粒 | 第61页 |
5.1.2 试剂及培养基 | 第61页 |
5.2 实验方法 | 第61-64页 |
5.2.1 菌株DNA提取 | 第61页 |
5.2.2 引物设计及合成 | 第61页 |
5.2.3 目的基因的扩增 | 第61-62页 |
5.2.4 酶切反应 | 第62页 |
5.2.5 连接反应 | 第62-63页 |
5.2.6 转化 | 第63页 |
5.2.7 转化子筛选 | 第63-64页 |
5.2.8 重组质粒酶切及测序 | 第64页 |
5.2.9 重组质粒蛋白质电泳 | 第64页 |
5.3 结果与讨论 | 第64-68页 |
5.3.1 目的基因的扩增 | 第64-65页 |
5.3.2 阳性克隆子的筛选 | 第65页 |
5.3.3 重组质粒的酶切验证 | 第65-66页 |
5.3.4 重组质粒的测序验证 | 第66-67页 |
5.3.5 重组质粒的表达 | 第67-68页 |
5.4 小结 | 第68-69页 |
第六章 红球菌菌株p52烃羟化酶基因alkB2的克隆和表达 | 第69-77页 |
6.1 材料与设备 | 第69页 |
6.1.1 菌种及载体质粒 | 第69页 |
6.1.2 试剂及培养基 | 第69页 |
6.2 实验方法 | 第69-72页 |
6.2.1 菌株DNA提取 | 第69页 |
6.2.2 引物设计及合成 | 第69页 |
6.2.3 目的基因的扩增 | 第69-70页 |
6.2.4 酶切反应 | 第70页 |
6.2.5 连接反应 | 第70-71页 |
6.2.6 转化 | 第71页 |
6.2.7 转化子筛选 | 第71-72页 |
6.2.8 重组质粒酶切及测序 | 第72页 |
6.2.9 重组质粒蛋白质电泳 | 第72页 |
6.3 结果与讨论 | 第72-76页 |
6.3.1 目的基因的扩增 | 第72-73页 |
6.3.2 阳性克隆子的筛选 | 第73页 |
6.3.3 重组质粒的酶切验证 | 第73-74页 |
6.3.4 重组质粒的测序验证 | 第74-75页 |
6.3.5 重组质粒的表达 | 第75-76页 |
6.4 小结 | 第76-77页 |
第七章 红球菌菌株p52的溶藻效果 | 第77-85页 |
7.1 材料与设备 | 第77-78页 |
7.1.1 实验试剂 | 第77页 |
7.1.2 菌株及培养基 | 第77页 |
7.1.3 实验仪器 | 第77-78页 |
7.2 实验方法 | 第78-79页 |
7.2.1 溶藻效果的分析 | 第78页 |
7.2.2 溶藻方式的分析 | 第78页 |
7.2.3 溶藻物质的亲/疏水性分析 | 第78-79页 |
7.2.4 溶藻物质的鉴定 | 第79页 |
7.3 结果与讨论 | 第79-84页 |
7.3.1 细菌密度对溶藻效果的影响 | 第79-80页 |
7.3.2 红球菌菌株p52的溶藻范围 | 第80-81页 |
7.3.3 溶藻方式的鉴定 | 第81-82页 |
7.3.4 溶藻物质的鉴定 | 第82-84页 |
7.4 小结 | 第84-85页 |
第八章 结论与建议 | 第85-86页 |
参考文献 | 第86-96页 |
附录 | 第96-97页 |
致谢 | 第97-98页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第98-99页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第99页 |