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菊花CmPCNT115基因的克隆及功能鉴定

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略词表第12-13页
引言第13-14页
第一章 文献综述第14-26页
    1 生长素的作用机制第14-21页
        1.1 植物生长素的合成与代谢第14-17页
            1.1.1 生长素的合成第14-16页
            1.1.2 生长素的代谢第16-17页
        1.2 植物生长素的运输第17-18页
        1.3 植物生长素的响应基因第18页
        1.4 生长素与其它植物激素的关系第18-20页
            1.4.1 生长素与乙烯的关系第18-19页
            1.4.2 生长素与脱落酸的关系第19页
            1.4.3 生长素与细胞分裂素的关系第19-20页
            1.4.4 生长素与赤霉素的关系第20页
        1.5 生长素对植物生长发育的影响第20-21页
            1.5.1 生长素对植物根的影响第20页
            1.5.2 生长素对植物叶片的影响第20-21页
            1.5.3 生长素对植物花器官的影响第21页
            1.5.4 生长素对果实发育的影响第21页
    2 植物生根机理的研究进展第21-25页
        2.1 生根相关基因的研究进展第21-23页
        2.2 其它植物激素与植物生根的关系第23-24页
        2.3 酶活性与植物生根的关系第24-25页
    3 本研究的目的与意义与主要内容第25-26页
第二章 菊花CmPCNT115基因的克隆与序列分析第26-40页
    1 材料与方法第26-34页
        1.1 植物材料第26页
        1.2 试剂与仪器第26-27页
            1.2.1 试剂及菌株第26-27页
            1.2.2 仪器设备第27页
        1.3 实验方法第27-34页
            1.3.1 植物总RNA的提取第27-28页
                1.3.1.1 材料处理第27页
                1.3.1.2 试剂及用具准备第27页
                1.3.1.3 总RNA提取第27-28页
            1.3.2 去基因组DNA及第一链cDNA的合成与检测第28-29页
            1.3.3 引物设计、PCR扩增及电泳第29-30页
            1.3.4 目的片段纯化回收第30页
            1.3.5 目的片段的连接与转化第30页
            1.3.6 重组子筛选与测序第30-31页
            1.3.7 3'RACE-PCR扩增第31-32页
            1.3.8 5'RACE-PCR扩增第32-34页
            1.3.9 cDNA全长序列的获得第34页
            1.3.10 基因序列的分析第34页
    2 结果与分析第34-39页
        2.1 RNA提取与反转录质量检测第34-35页
        2.2 CmPCNT115基因的克隆第35-36页
            2.2.1 CmPCNT115基因间保守片段的获得第35页
            2.2.2 CmPCNT115基因3'RACE的结果第35-36页
            2.2.3 CmPCNT115基因5'RACE的结果第36页
            2.2.4 CmPCNT115基因序列全长的获得与分析第36页
        2.3 CmPCNT115氨基酸序列分析与同源性比对第36-38页
        2.4 CmPCNT115系统进化树分析第38-39页
    3 讨论第39-40页
第三章 菊花CmPCNT115基因的表达特性与功能鉴定第40-56页
    1 材料与方法第40-46页
        1.1 试验材料第40页
        1.2 试剂与仪器第40-41页
            1.2.1 试剂第40-41页
            1.2.2 仪器设备第41页
        1.3 实验方法第41-46页
            1.3.1 CmPCNT115基因的组织表达特性分析第41页
            1.3.2 CmPCNT115基因响应IAA、TIBA处理的表达特性分析第41页
            1.3.3 CmPCNT115基因响应胁迫处理的表达特性分析第41-42页
            1.3.4 CmPCNT115基因的实时定量(Real time-PCR)分析第42页
            1.3.5 CmPCNT115基因正义植物表达载体的构建第42-44页
            1.3.6 农杆菌感受态的制备第44-45页
            1.3.7 冻融法转化农杆菌第45页
            1.3.8 花序浸染法转化拟南芥及转基因株系分子鉴定第45-46页
            1.3.9 转CmPCNT115基因拟南芥株系表达水平检测第46页
            1.3.10 转CmPCNT115基因拟南芥表型观察第46页
    2 结果与分析第46-53页
        2.1 CmPCNT115基因组织器官表达特异性第46-47页
        2.2 CmPCNT115基因响应IAA、TIBA的表达特性第47-48页
        2.3 IAA、TIBA处理下'神马'插穗生根情况第48-50页
        2.4 CmPCNT115基因响应胁迫处理的表达特性第50页
        2.5 CmPCNT115植物表达载体的获得第50-51页
        2.6 CmPCNT115转基因拟南芥植株的获得第51页
        2.7 转基因株系中CmPCNT115表达水平检测第51-52页
        2.8 转CmPCNT115基因拟南芥表型观察与分析第52-53页
    3 讨论第53-56页
全文结论第56-58页
创新之处第58-60页
参考文献第60-68页
附录第68-78页
    附录一 DNA片段凝胶纯化回收第68-69页
    附录二 AXYPREP质粒DNA提取试剂盒操作步骤第69-70页
    附录三 农杆菌感受态的制备第70-71页
    附录四 DNA提取方法(CTAB法)第71-72页
    附录五 大肠杆菌感受态的制备第72-73页
    附录六 常用培养基配制方法第73-75页
    附录七 MS培养基配制方法及注意事项第75-78页
发表论文及所获奖励第78-80页
致谢第80页

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