| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 第1章 前言 | 第13-33页 |
| 1.1 核受体概述 | 第13-15页 |
| 1.2 雌激素相关受体ERR研究概述 | 第15-19页 |
| 1.2.1 ERR的三种亚型及结构 | 第15-16页 |
| 1.2.2 ERR的组织分布与作用 | 第16-18页 |
| 1.2.3 ERR的作用机制及信号通路 | 第18-19页 |
| 1.3 昆虫蜕皮激素研究概述 | 第19-20页 |
| 1.4 昆虫蜕皮激素受体EcR研究概述 | 第20-21页 |
| 1.5 昆虫蜕皮激素20E与其受体EcR/USP的转录调控机制 | 第21-23页 |
| 1.6 黄脸油葫芦研究概述 | 第23-26页 |
| 1.6.1 黄脸油葫芦简介 | 第23页 |
| 1.6.2 黄脸油葫芦的饲养 | 第23-24页 |
| 1.6.3 黄脸油葫芦的龄期划分 | 第24-25页 |
| 1.6.4 黄脸油葫芦的脑部结构 | 第25-26页 |
| 1.7 RNAi技术研究概述 | 第26-30页 |
| 1.7.1 RNAi的分子机制 | 第26-28页 |
| 1.7.2 昆虫RNAi的方法 | 第28页 |
| 1.7.3 影响昆虫RNAi效率的因素 | 第28-29页 |
| 1.7.4 RNAi的应用 | 第29-30页 |
| 1.8 本研究的目的与意义 | 第30-31页 |
| 1.9 研究内容与技术路线 | 第31-33页 |
| 1.9.1 研究内容 | 第31-32页 |
| 1.9.2 技术路线 | 第32-33页 |
| 第2章 实验材料与步骤 | 第33-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第33-37页 |
| 2.1.1 实验动物的饲养 | 第33页 |
| 2.1.2 实验主要仪器设备 | 第33-34页 |
| 2.1.3 实验主要试剂及溶液的配制 | 第34-37页 |
| 2.2 实验步骤 | 第37-53页 |
| 2.2.1 Total RNA的提取 | 第37-39页 |
| 2.2.2 cDNA第一链的合成 | 第39页 |
| 2.2.3 引物设计及特异性检测 | 第39-41页 |
| 2.2.4 dsRNA的体外合成 | 第41-44页 |
| 2.2.5 dsRNA导入虫体 | 第44-45页 |
| 2.2.6 荧光实时定量PCR检测干扰效率 | 第45-46页 |
| 2.2.7 Western-blot技术 | 第46-50页 |
| 2.2.8 免疫组织化学技术 | 第50-53页 |
| 第3章 实验结果 | 第53-79页 |
| 3.1 TeERR mRNA水平表达的定量研究 | 第53-57页 |
| 3.1.1 Total RNA的提取 | 第53页 |
| 3.1.2 实时定量引物特异性及模板质量检测 | 第53-54页 |
| 3.1.3 qRT-PCR检测TeERR在mRNA水平的表达 | 第54-57页 |
| 3.2 TeERR蛋白水平表达的定量研究 | 第57-59页 |
| 3.2.1 蛋白质标准曲线的制作 | 第57页 |
| 3.2.2 Western-blot检测TeERR蛋白水平的表达 | 第57-59页 |
| 3.3 TeERR蛋白水平表达的定位研究 | 第59-60页 |
| 3.3.1 免疫组化检测TeERR蛋白在4龄若虫脑部表达分布 | 第59页 |
| 3.3.2 免疫组化检测TeERR蛋白在成虫脑部表达分布 | 第59-60页 |
| 3.4 TeERR的RNAi实验 | 第60-70页 |
| 3.4.1 合成dsRNA的引物特异性及模板质量检测 | 第60-61页 |
| 3.4.2 添加T7启动子序列的目的基因片段检测 | 第61页 |
| 3.4.3 dsRNA稳定性检测 | 第61-62页 |
| 3.4.4 TeERR-dsRNA干扰浓度的确定 | 第62-63页 |
| 3.4.5 半定量PCR检测TeERR-dsRNA的干扰效果 | 第63-64页 |
| 3.4.6 qRT-PCR检测干扰后TeERR mRNA水平表达的变化 | 第64-67页 |
| 3.4.7 Western-blot检测干扰后TeERR蛋白水平表达的变化 | 第67-69页 |
| 3.4.8 免疫组化检测干扰后TeERR蛋白在脑部表达分布的变化 | 第69-70页 |
| 3.5 TeERR-dsRNA干扰后虫体表型及行为的变化 | 第70-73页 |
| 3.6 TeERR与TeEcR相关性研究 | 第73-79页 |
| 3.6.1 qRT-PCR检测干扰后TeEcR在mRNA水平表达的变化 | 第73-76页 |
| 3.6.2 Western-blot检测干扰后TeEcR蛋白水平表达的变化 | 第76-78页 |
| 3.6.3 免疫组化检测干扰后TeEcR蛋白在脑部表达分布的变化 | 第78-79页 |
| 第4章 讨论 | 第79-85页 |
| 4.1 关于TeERR mRNA水平表达的定量结果 | 第79-80页 |
| 4.2 关于TeERR蛋白水平表达的定量结果 | 第80页 |
| 4.3 关于TeERR蛋白水平表达的定位结果 | 第80-81页 |
| 4.4 关于TeERR被干扰后虫体表型及行为的变化结果 | 第81-82页 |
| 4.5 关于TeERR与TeEcR的相关性结果 | 第82-85页 |
| 总结 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-101页 |
| 附录 | 第101-113页 |
| 致谢 | 第113-115页 |
| 攻读硕士学位期间研究成果 | 第115页 |
