| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第1章 绪论 | 第13-25页 |
| ·菌蜕简介 | 第13-16页 |
| ·细菌菌蜕 | 第13-15页 |
| ·细菌菌蜕的形成机制 | 第15-16页 |
| ·影响菌蜕形成的因子 | 第16页 |
| ·菌蜕应用研究现状 | 第16-19页 |
| ·菌蜕作为疫苗使用 | 第16-17页 |
| ·菌蜕作为佐剂使用 | 第17页 |
| ·菌蜕作为生物活性物质的载体 | 第17-19页 |
| ·癌症治疗现状及埃博霉素的抑癌机理 | 第19-21页 |
| ·埃博霉素与癌症治疗 | 第19-20页 |
| ·菌蜕作为载体在癌症治疗中应用 | 第20-21页 |
| ·课题研究内容及意义 | 第21-23页 |
| ·技术路线 | 第23-25页 |
| 第2章 温控裂解质粒的构建 | 第25-39页 |
| ·引言 | 第25-26页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·菌株和质粒 | 第26页 |
| ·仪器 | 第26页 |
| ·试剂盒及工具酶 | 第26-27页 |
| ·培养基及试剂 | 第27页 |
| ·实验内容与方法 | 第27-31页 |
| ·构建质粒pMD-19T-geneE | 第27-30页 |
| ·温控裂解质粒PBV220-geneE的构建 | 第30-31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-36页 |
| ·构建质粒pMD19T-geneE | 第31-34页 |
| ·温控裂解质粒pBV220-geneE的构建 | 第34-36页 |
| ·本章小结 | 第36-39页 |
| 第3章 E.coli BL21(DE3)菌蜕的制备及条件优化 | 第39-49页 |
| ·引言 | 第39页 |
| ·实验材料 | 第39-40页 |
| ·仪器 | 第39-40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·实验内容与方法 | 第40-42页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕制备条件优化 | 第40-41页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕制备及裂解效率的测定 | 第41页 |
| ·制备E.coli BL21(DE3)菌蜕冻干粉 | 第41页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕中遗传物质的电泳分析 | 第41-42页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕的电镜观察 | 第42页 |
| ·结果与讨论 | 第42-47页 |
| ·E.coli BL21(DE3)-pBV220-geneE生长曲线测定 | 第42-43页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕的最优制备条件 | 第43-45页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕的制备及裂解效率的计算 | 第45-46页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕中遗传物质分析 | 第46-47页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕的电镜观察 | 第47页 |
| ·本章小结 | 第47-49页 |
| 第4章 埃博霉素菌蜕系统对肿瘤细胞抑制作用 | 第49-61页 |
| ·引言 | 第49-50页 |
| ·实验材料 | 第50-52页 |
| ·仪器 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50-52页 |
| ·实验内容与方法 | 第52-54页 |
| ·埃博霉素B标准曲线的制定 | 第52页 |
| ·菌蜕负载埃博霉素B的条件优化及其负载量测定 | 第52-53页 |
| ·Hela细胞的培养及用药研究 | 第53-54页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第54页 |
| ·TEM观察细胞形态变化 | 第54页 |
| ·结果与讨论 | 第54-60页 |
| ·埃博霉素B的标准曲线 | 第54-55页 |
| ·E.coli BL21(DE3)菌蜕搭载埃博霉素B的最优条件 | 第55-56页 |
| ·药物作用Hela细胞的IC_(50)值 | 第56-57页 |
| ·细胞活性实验 | 第57-59页 |
| ·药物作用后细胞形态变化 | 第59-60页 |
| ·本章小结 | 第60-61页 |
| 第5章 埃博霉素菌蜕系统对Hela细胞EpCAM表达水平影响 | 第61-73页 |
| ·引言 | 第61-62页 |
| ·实验材料 | 第62-63页 |
| ·仪器 | 第62页 |
| ·试剂 | 第62-63页 |
| ·实验内容与方法 | 第63-66页 |
| ·内参基因及引物设计确定 | 第63页 |
| ·Hela细胞基因组DNA的提取 | 第63-64页 |
| ·引物特异性检测 | 第64-65页 |
| ·Trizol法提取Hela细胞总RNA | 第65页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第65-66页 |
| ·Real-time quantitative PCR | 第66页 |
| ·实验数据分析 | 第66页 |
| ·结果与讨论 | 第66-71页 |
| ·Hela细胞总DNA的提取 | 第66-67页 |
| ·引物特异性检测 | 第67页 |
| ·RNA的纯度验证和浓度测定 | 第67-69页 |
| ·cDNA质量检测 | 第69页 |
| ·基因转录水平分析 | 第69-71页 |
| ·本章小结 | 第71-73页 |
| 全文总结与展望 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-81页 |
| 附录 | 第81-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 在学期间主要科研成果 | 第85页 |
