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家蚕V型ATP酶基因的克隆、表达特征及功能研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·V-ATPase的结构与组装第13-15页
     ·V-ATPase的结构第13-14页
     ·V-ATPase的组装第14页
     ·V-ATPase活性调控第14-15页
   ·V-ATPase的功能研究第15-19页
     ·pH与V-ATPase对细胞周期的影响第16-17页
     ·V-ATPase在昆虫中的功能研究第17-18页
     ·V-ATPase在家蚕中的研究第18-19页
   ·动物丝蛋白成纤机制的研究第19-23页
     ·动物丝蛋白成纤机制的研究第19页
     ·pH对丝纤维形成的影响第19-23页
第二章 引言第23-25页
   ·研究背景及目的意义第23页
   ·研究内容第23-24页
   ·技术路线第24-25页
第三章 家蚕V-ATPase A、B亚基基因的克隆、原核表达、纯化及抗体制备第25-45页
   ·实验材料与试剂仪器第25-32页
     ·实验材料第25页
     ·主要仪器第25-26页
     ·主要试剂第26页
     ·主要溶液的配制第26-32页
   ·实验方法第32-40页
     ·引物设计第32页
     ·RNA的制备第32-33页
     ·cDNA的制备第33页
     ·目的基因的克隆第33-35页
     ·重组表达载体的构建第35-36页
     ·原核表达及检测第36-38页
     ·重组蛋白的纯化第38-39页
     ·多克隆抗体的制备第39-40页
   ·结果与分析第40-44页
     ·目的基因的克隆第40页
     ·重组表达载体的构建第40-41页
     ·重组蛋白的原核表达检测第41-43页
     ·重组蛋白的纯化及抗体制备第43-44页
   ·讨论第44-45页
第四章 BmV-ATPase B亚基的表达特征分析第45-55页
   ·实验材料与试剂仪器第45-47页
     ·实验材料第45页
     ·主要仪器第45页
     ·主要试剂第45-46页
     ·主要溶液配制第46-47页
   ·实验方法第47-49页
     ·Western blotting检测第47页
     ·免疫荧光定位第47-48页
     ·亚细胞免疫荧光定位第48-49页
   ·结果与分析第49-53页
     ·Western blotting检测第49-50页
     ·免疫荧光定位第50-53页
   ·讨论第53-55页
第五章V-ATPase调控细胞周期的研究第55-65页
   ·实验材料与试剂仪器第55-56页
     ·实验材料第55页
     ·主要仪器第55页
     ·主要试剂第55-56页
     ·主要溶液配制第56页
   ·实验方法第56-60页
     ·干涉片段DNA合成第56-57页
     ·双链RNA合成第57-58页
     ·双链RNA干涉第58页
     ·细胞蛋白的提取及检测第58页
     ·细胞cDNA的合成及检测第58-59页
     ·细胞周期检测第59页
     ·抑制剂处理细胞及细胞周期检测第59-60页
   ·结果与分析第60-62页
     ·双链RNA合成第60页
     ·干涉后分子水平检测第60-61页
     ·干涉后细胞周期检测第61-62页
     ·抑制剂对细胞周期的影响第62页
   ·讨论第62-65页
第六章 Bm V-ATPase在茧丝形成过程中的功能初探第65-71页
   ·实验材料与试剂仪器第65-66页
     ·实验材料第65页
     ·主要仪器第65页
     ·主要试剂第65-66页
     ·主要溶液配制第66页
   ·实验方法第66-67页
     ·蚕丝样品的制备第66页
     ·丝纤维直径的测量第66页
     ·红外光谱测定二级结构第66-67页
     ·拉伸实验第67页
   ·结果与分析第67-70页
     ·茧丝外型及直径的测量第67-68页
     ·茧丝二级结构测定第68-69页
     ·丝纤维力学性能测定第69-70页
   ·讨论第70-71页
第七章 综合与结论第71-73页
参考文献第73-82页
在读期间发表论文及参研课题第82-84页
致谢第84-85页

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