摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
符号表 | 第7-12页 |
第1章 文献综述 | 第12-30页 |
·ND的研究进展 | 第12-22页 |
·ND的病原学研究 | 第12-14页 |
·NDV的分子生物学研究 | 第14-18页 |
·ND的流行特点 | 第18-19页 |
·ND的疫苗研究 | 第19-22页 |
·减毒沙门菌作为疫苗活载体的研究进展 | 第22-28页 |
·减毒沙门菌的免疫机制 | 第23-25页 |
·减毒沙门菌疫苗活载体的优缺点 | 第25-26页 |
·减毒沙门菌作为疫苗活载体的应用 | 第26-28页 |
·展望 | 第28-30页 |
第2章 减毒S. Pullorum C79-13?crp?asd的构建及其生物学特性 | 第30-41页 |
·材料 | 第30-32页 |
·菌株和质粒 | 第30-31页 |
·主要试剂和培养基 | 第31页 |
·主要试剂和培养基的配制 | 第31-32页 |
·主要实验器材 | 第32页 |
·方法 | 第32-35页 |
·PCR引物的合成 | 第32-33页 |
·细菌的活化及培养条件 | 第33页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd的筛选 | 第33-34页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd的PCR鉴定 | 第34页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd表型及生化鉴定 | 第34页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd稳定性试验 | 第34-35页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd生长特性鉴定 | 第35页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd对雏鸡的毒性试验 | 第35页 |
·结果与分析 | 第35-39页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd的筛选及PCR鉴定 | 第35-36页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd的表型鉴定 | 第36-37页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd稳定性试验 | 第37-38页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd生长特性鉴定 | 第38页 |
·缺失菌株C79-13?crp?asd对雏鸡的毒性试验 | 第38-39页 |
·讨论 | 第39-41页 |
第3章 重组NDV HN基因减毒S. Pullorum的构建及其生物学特性 | 第41-62页 |
·材料 | 第41-44页 |
·菌株和质粒 | 第41-42页 |
·主要试剂和培养基 | 第42页 |
·主要培养基和试剂的配制 | 第42-44页 |
·实验动物来源 | 第44页 |
·主要实验器材 | 第44页 |
·方法 | 第44-51页 |
·质粒DNA的提取 | 第44-45页 |
·凝胶产物的回收 | 第45页 |
·大肠杆菌(χ6097)感受态的制备(Ca Cl_2法) | 第45-46页 |
·目的基因的扩增 | 第46页 |
·PCR产物与pMD19-T载体的连接 | 第46页 |
·大肠杆菌的转化 | 第46-47页 |
·重组质粒pMD19-T-HN的PCR及酶切鉴定 | 第47页 |
·重组载体pYA-HN的构建及鉴定 | 第47-48页 |
·沙门菌(C79-13Δcrp?asd)感受态的制备 | 第48页 |
·沙门菌的电转化 | 第48页 |
·重组菌株C79-13Δcrp?asd(pYA-HN)的PCR及酶切鉴定 | 第48-49页 |
·重组菌株的表型及生化鉴定 | 第49页 |
·目的基因在重组菌株中的稳定性检测 | 第49页 |
·重组菌株的生长特性鉴定 | 第49页 |
·重组蛋白体外的表达 | 第49-50页 |
·重组菌株对雏鸡的毒性试验 | 第50-51页 |
·重组菌在鸡体内各器官的动态分布 | 第51页 |
·结果与分析 | 第51-60页 |
·重组菌株C79-13Δcrp?asd(p YA-HN)的PCR鉴定 | 第51-52页 |
·重组菌株C79-13Δcrp?asd(p YA-HN)的酶切鉴定 | 第52-53页 |
·重组菌株的表型及生化鉴定 | 第53页 |
·重组菌株的遗传稳定性检测 | 第53-54页 |
·重组菌株的生长特性鉴定 | 第54-55页 |
·重组菌株体外蛋白的表达 | 第55-56页 |
·重组菌株对雏鸡的毒性试验 | 第56-57页 |
·细菌在鸡体内各器官的动态分布 | 第57-60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
第4章 重组NDV HN减毒S. Pullorum的免疫学特性研究 | 第62-76页 |
·材料 | 第62-64页 |
·菌株 | 第62-63页 |
·实验动物 | 第63页 |
·主要试剂 | 第63页 |
·主要试剂的配制 | 第63-64页 |
·主要仪器设备 | 第64页 |
·方法 | 第64-68页 |
·雏鸡的免疫 | 第64页 |
·免疫后鸡只的体重变化 | 第64-65页 |
·免疫后鸡只免疫器官指数变化 | 第65页 |
·红细胞血凝抑制试验(HI)检测NDV抗体水平 | 第65-66页 |
·免疫鸡血清沙门菌Ig G抗体的测定 | 第66页 |
·免疫雏鸡消化道s IgA抗体水平的测定 | 第66-67页 |
·淋巴细胞增殖试验 | 第67页 |
·重组菌株对鸡的免疫保护效力试验 | 第67-68页 |
·统计分析 | 第68页 |
·结果与分析 | 第68-74页 |
·免疫后鸡只体重的变化 | 第68-69页 |
·免疫后对鸡只免疫器官指数的影响 | 第69-70页 |
·重组菌株免疫后对鸡新城疫HI抗体水平的影响 | 第70-71页 |
·免疫鸡血清中沙门菌Ig G抗体的测定 | 第71页 |
·免疫雏鸡消化道s IgA抗体水平的测定 | 第71-72页 |
·淋巴细胞增殖试验 | 第72-73页 |
·免疫保护力试验 | 第73-74页 |
·讨论 | 第74-76页 |
第5章 结论 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-85页 |
附录A 主要仪器设备 | 第85-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
硕士期间的研究成果 | 第87-88页 |