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重组NDV HN基因减毒鸡白痢沙门菌的构建及其特性研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
符号表第7-12页
第1章 文献综述第12-30页
   ·ND的研究进展第12-22页
     ·ND的病原学研究第12-14页
     ·NDV的分子生物学研究第14-18页
     ·ND的流行特点第18-19页
     ·ND的疫苗研究第19-22页
   ·减毒沙门菌作为疫苗活载体的研究进展第22-28页
     ·减毒沙门菌的免疫机制第23-25页
     ·减毒沙门菌疫苗活载体的优缺点第25-26页
     ·减毒沙门菌作为疫苗活载体的应用第26-28页
   ·展望第28-30页
第2章 减毒S. Pullorum C79-13?crp?asd的构建及其生物学特性第30-41页
   ·材料第30-32页
     ·菌株和质粒第30-31页
     ·主要试剂和培养基第31页
     ·主要试剂和培养基的配制第31-32页
     ·主要实验器材第32页
   ·方法第32-35页
     ·PCR引物的合成第32-33页
     ·细菌的活化及培养条件第33页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd的筛选第33-34页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd的PCR鉴定第34页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd表型及生化鉴定第34页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd稳定性试验第34-35页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd生长特性鉴定第35页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd对雏鸡的毒性试验第35页
   ·结果与分析第35-39页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd的筛选及PCR鉴定第35-36页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd的表型鉴定第36-37页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd稳定性试验第37-38页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd生长特性鉴定第38页
     ·缺失菌株C79-13?crp?asd对雏鸡的毒性试验第38-39页
   ·讨论第39-41页
第3章 重组NDV HN基因减毒S. Pullorum的构建及其生物学特性第41-62页
   ·材料第41-44页
     ·菌株和质粒第41-42页
     ·主要试剂和培养基第42页
     ·主要培养基和试剂的配制第42-44页
     ·实验动物来源第44页
     ·主要实验器材第44页
   ·方法第44-51页
     ·质粒DNA的提取第44-45页
     ·凝胶产物的回收第45页
     ·大肠杆菌(χ6097)感受态的制备(Ca Cl_2法)第45-46页
     ·目的基因的扩增第46页
     ·PCR产物与pMD19-T载体的连接第46页
     ·大肠杆菌的转化第46-47页
     ·重组质粒pMD19-T-HN的PCR及酶切鉴定第47页
     ·重组载体pYA-HN的构建及鉴定第47-48页
     ·沙门菌(C79-13Δcrp?asd)感受态的制备第48页
     ·沙门菌的电转化第48页
     ·重组菌株C79-13Δcrp?asd(pYA-HN)的PCR及酶切鉴定第48-49页
     ·重组菌株的表型及生化鉴定第49页
     ·目的基因在重组菌株中的稳定性检测第49页
     ·重组菌株的生长特性鉴定第49页
     ·重组蛋白体外的表达第49-50页
     ·重组菌株对雏鸡的毒性试验第50-51页
     ·重组菌在鸡体内各器官的动态分布第51页
   ·结果与分析第51-60页
     ·重组菌株C79-13Δcrp?asd(p YA-HN)的PCR鉴定第51-52页
     ·重组菌株C79-13Δcrp?asd(p YA-HN)的酶切鉴定第52-53页
     ·重组菌株的表型及生化鉴定第53页
     ·重组菌株的遗传稳定性检测第53-54页
     ·重组菌株的生长特性鉴定第54-55页
     ·重组菌株体外蛋白的表达第55-56页
     ·重组菌株对雏鸡的毒性试验第56-57页
     ·细菌在鸡体内各器官的动态分布第57-60页
   ·讨论第60-62页
第4章 重组NDV HN减毒S. Pullorum的免疫学特性研究第62-76页
   ·材料第62-64页
     ·菌株第62-63页
     ·实验动物第63页
     ·主要试剂第63页
     ·主要试剂的配制第63-64页
     ·主要仪器设备第64页
   ·方法第64-68页
     ·雏鸡的免疫第64页
     ·免疫后鸡只的体重变化第64-65页
     ·免疫后鸡只免疫器官指数变化第65页
     ·红细胞血凝抑制试验(HI)检测NDV抗体水平第65-66页
     ·免疫鸡血清沙门菌Ig G抗体的测定第66页
     ·免疫雏鸡消化道s IgA抗体水平的测定第66-67页
     ·淋巴细胞增殖试验第67页
     ·重组菌株对鸡的免疫保护效力试验第67-68页
     ·统计分析第68页
   ·结果与分析第68-74页
     ·免疫后鸡只体重的变化第68-69页
     ·免疫后对鸡只免疫器官指数的影响第69-70页
     ·重组菌株免疫后对鸡新城疫HI抗体水平的影响第70-71页
     ·免疫鸡血清中沙门菌Ig G抗体的测定第71页
     ·免疫雏鸡消化道s IgA抗体水平的测定第71-72页
     ·淋巴细胞增殖试验第72-73页
     ·免疫保护力试验第73-74页
   ·讨论第74-76页
第5章 结论第76-77页
参考文献第77-85页
附录A 主要仪器设备第85-86页
致谢第86-87页
硕士期间的研究成果第87-88页

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