论文创新点 | 第1-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-13页 |
1 前言 | 第13-54页 |
·NF-κB功能概述 | 第13-19页 |
·NF-κB的组成者——Rel家族 | 第13-15页 |
·NF-κB在免疫反应及炎症反应中的调控作用 | 第15-19页 |
·免疫系统及天然免疫反应简介 | 第15-16页 |
·炎症反应简介 | 第16-17页 |
·NF-κB在天然免疫应答和炎症反应中的作用 | 第17-19页 |
·NF-κB的激活途径及其调控作用 | 第19-39页 |
·NF-κB激活的直接调节者——IκB家族和IKK家族 | 第19-24页 |
·IκB家族及其调节功能 | 第19-21页 |
·IκB家族及其调节功能 | 第21-24页 |
·NF-κB激活的经典途径 | 第24-35页 |
·PAMPs介导的NF-κB激活 | 第24-28页 |
·IL-1β介导的NF-κB激活 | 第28-31页 |
·TNFα介导的NF-κB激活 | 第31-35页 |
·NF-κB激活的非经典途径 | 第35-36页 |
·NF-κB激活过程中的信号调控机制 | 第36-39页 |
·调节信号分子的蛋白质修饰 | 第37-38页 |
·调节信号复合物的组装 | 第38-39页 |
·NF-κB介导的下游基因转录及其调控机制 | 第39-50页 |
·NF-κB介导下游基因转录的启动过程 | 第39-43页 |
·NF-κB的转录终止 | 第43-46页 |
·IκBα介导的NF-κB的核输出 | 第44页 |
·NF-κB的泛素化修饰介导的信号终止 | 第44-45页 |
·NF-κB从DNA上的解离 | 第45-46页 |
·NF-κB介导下游基因转录的调控机制 | 第46-50页 |
·调节NF-κB不同形式二聚体的转换 | 第46-47页 |
·蛋白-蛋白相互作用对NF-κB转录复合物的组装的影响 | 第47-49页 |
·染色质的构象改变 | 第49-50页 |
·转录因子KLF家族在免疫与炎症反应中的作用 | 第50-54页 |
2 实验材料和实验方法 | 第54-63页 |
·实验材料 | 第54-56页 |
·细胞系、细胞培养材料及刺激因子 | 第54页 |
·表达载体 | 第54-55页 |
·抗体 | 第55页 |
·试剂及设备 | 第55-56页 |
·荧光素酶报告基因实验 | 第55页 |
·逆转录及实时定量荧光PCR | 第55页 |
·利用逆转录病毒载体构建稳定表达的过表达或RNAi细胞系 | 第55页 |
·核质分离实验 | 第55页 |
·免疫共沉淀及Western blot实验 | 第55-56页 |
·染色质免疫共沉淀实验 | 第56页 |
·细胞凋亡检测 | 第56页 |
·实验方法 | 第56-63页 |
·各种载体的构建及质粒提取 | 第56-57页 |
·真核及原核表达载体及逆转录病毒过表达载体 | 第56页 |
·RNAi载体 | 第56-57页 |
·点突变载体 | 第57页 |
·质粒提取 | 第57页 |
·细胞培养、传代及瞬时转染 | 第57-58页 |
·细胞培养 | 第57页 |
·细胞传代 | 第57-58页 |
·细胞的瞬时转染 | 第58页 |
·双荧光素酶及单荧光素酶报告基因实验 | 第58页 |
·逆转录及实时荧光定量PCR | 第58-59页 |
·逆转录病毒细胞系的建立 | 第59页 |
·核质分离实验 | 第59页 |
·免疫共沉淀及Western blot实验 | 第59-60页 |
·染色质免疫共沉淀 | 第60-62页 |
·细胞凋亡检测 | 第62-63页 |
3 实验结果与讨论 | 第63-89页 |
·研究背景与立项依据 | 第63页 |
·实验结果 | 第63-85页 |
·TNFα及IL-1β诱导NF-κB激活信号通路调控分子的筛选和鉴定 | 第64-65页 |
·过量表达KLF6可以协同TNFα及IL-1 β诱导的NF-κB激活 | 第65-69页 |
·降低KLF6的表达可以抑制TNFα及IL-1 β诱导的NF-κB激活 | 第69-72页 |
·KLF6不影响TNFα及IL-1 β诱导的NF-KB入核 | 第72-74页 |
·KLF6与p65在细胞核中存在相互作用 | 第74-77页 |
·KLF6可以结合至NF-κB下游基因的启动子区域并促进p65对其部分下游基因启动子的结合 | 第77-79页 |
·KLF6的DNA结合活性是其促进p65对靶基因启动子的结合所必需的 | 第79-84页 |
·KLF6协同NF-κB激活的生理相关性——KLF6参与调节TNFα诱导的细胞凋亡 | 第84-85页 |
·实验讨论与研究展望 | 第85-89页 |
参考文献 | 第89-104页 |
缩略词表 | 第104-108页 |
作者简历 | 第108-110页 |
致谢 | 第110-111页 |