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KLF6对TNFα与IL-1β诱导的NF-κB激活的调控机制

论文创新点第1-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-13页
1 前言第13-54页
   ·NF-κB功能概述第13-19页
     ·NF-κB的组成者——Rel家族第13-15页
     ·NF-κB在免疫反应及炎症反应中的调控作用第15-19页
       ·免疫系统及天然免疫反应简介第15-16页
       ·炎症反应简介第16-17页
       ·NF-κB在天然免疫应答和炎症反应中的作用第17-19页
   ·NF-κB的激活途径及其调控作用第19-39页
     ·NF-κB激活的直接调节者——IκB家族和IKK家族第19-24页
       ·IκB家族及其调节功能第19-21页
       ·IκB家族及其调节功能第21-24页
     ·NF-κB激活的经典途径第24-35页
       ·PAMPs介导的NF-κB激活第24-28页
       ·IL-1β介导的NF-κB激活第28-31页
       ·TNFα介导的NF-κB激活第31-35页
     ·NF-κB激活的非经典途径第35-36页
     ·NF-κB激活过程中的信号调控机制第36-39页
       ·调节信号分子的蛋白质修饰第37-38页
       ·调节信号复合物的组装第38-39页
   ·NF-κB介导的下游基因转录及其调控机制第39-50页
     ·NF-κB介导下游基因转录的启动过程第39-43页
     ·NF-κB的转录终止第43-46页
       ·IκBα介导的NF-κB的核输出第44页
       ·NF-κB的泛素化修饰介导的信号终止第44-45页
       ·NF-κB从DNA上的解离第45-46页
     ·NF-κB介导下游基因转录的调控机制第46-50页
       ·调节NF-κB不同形式二聚体的转换第46-47页
       ·蛋白-蛋白相互作用对NF-κB转录复合物的组装的影响第47-49页
       ·染色质的构象改变第49-50页
   ·转录因子KLF家族在免疫与炎症反应中的作用第50-54页
2 实验材料和实验方法第54-63页
   ·实验材料第54-56页
     ·细胞系、细胞培养材料及刺激因子第54页
     ·表达载体第54-55页
     ·抗体第55页
     ·试剂及设备第55-56页
       ·荧光素酶报告基因实验第55页
       ·逆转录及实时定量荧光PCR第55页
       ·利用逆转录病毒载体构建稳定表达的过表达或RNAi细胞系第55页
       ·核质分离实验第55页
       ·免疫共沉淀及Western blot实验第55-56页
       ·染色质免疫共沉淀实验第56页
       ·细胞凋亡检测第56页
   ·实验方法第56-63页
     ·各种载体的构建及质粒提取第56-57页
       ·真核及原核表达载体及逆转录病毒过表达载体第56页
       ·RNAi载体第56-57页
       ·点突变载体第57页
       ·质粒提取第57页
     ·细胞培养、传代及瞬时转染第57-58页
       ·细胞培养第57页
       ·细胞传代第57-58页
       ·细胞的瞬时转染第58页
     ·双荧光素酶及单荧光素酶报告基因实验第58页
     ·逆转录及实时荧光定量PCR第58-59页
     ·逆转录病毒细胞系的建立第59页
     ·核质分离实验第59页
     ·免疫共沉淀及Western blot实验第59-60页
     ·染色质免疫共沉淀第60-62页
     ·细胞凋亡检测第62-63页
3 实验结果与讨论第63-89页
   ·研究背景与立项依据第63页
   ·实验结果第63-85页
     ·TNFα及IL-1β诱导NF-κB激活信号通路调控分子的筛选和鉴定第64-65页
     ·过量表达KLF6可以协同TNFα及IL-1 β诱导的NF-κB激活第65-69页
     ·降低KLF6的表达可以抑制TNFα及IL-1 β诱导的NF-κB激活第69-72页
     ·KLF6不影响TNFα及IL-1 β诱导的NF-KB入核第72-74页
     ·KLF6与p65在细胞核中存在相互作用第74-77页
     ·KLF6可以结合至NF-κB下游基因的启动子区域并促进p65对其部分下游基因启动子的结合第77-79页
     ·KLF6的DNA结合活性是其促进p65对靶基因启动子的结合所必需的第79-84页
     ·KLF6协同NF-κB激活的生理相关性——KLF6参与调节TNFα诱导的细胞凋亡第84-85页
   ·实验讨论与研究展望第85-89页
参考文献第89-104页
缩略词表第104-108页
作者简历第108-110页
致谢第110-111页

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