| 摘要 | 第1-12页 |
| Abstract | 第12-17页 |
| 缩略词表 | 第17-19页 |
| 前言 | 第19-22页 |
| 第一部分 | 第22-41页 |
| 一、 材料与方法 | 第23-31页 |
| （一） 实验材料 | 第23-24页 |
| 1、 主要化学药品和生物试剂 | 第23页 |
| 2、 主要仪器设备和耗材 | 第23-24页 |
| 3、 细胞株 | 第24页 |
| 4、 组织切片 | 第24页 |
| （二） 实验方法 | 第24-31页 |
| 1、 细胞培养 | 第24页 |
| 2、 流式细胞术检测 CPS1 与 ASGPR 在肝癌细胞系中的表达 | 第24-25页 |
| 3、 免疫组织荧光检测 HCC 组织中 CPS1 与 ASGPR 的表达 | 第25-26页 |
| 4、 血液标本收集 | 第26页 |
| 5、 单个核细胞富集 | 第26-27页 |
| 6、 CD45 抗体偶联的磁珠标记白细胞 | 第27-28页 |
| 7、 免疫磁珠阴性富集肝癌 CTCs | 第28-29页 |
| 8、 基于 CPS1 和 ASGPR 双抗体的免疫荧光染色鉴定肝癌细胞 | 第29-30页 |
| 9、 肝癌 CTCs 判定标准和计数 | 第30页 |
| 10、 细胞掺入试验分析改进方法的回收率、敏感性和特异性 | 第30页 |
| 11、改进方法与原方法回收率的比较 | 第30-31页 |
| 12、采用改进方法检测临床血液样本 HCC CTCs | 第31页 |
| 13、改进方法与原方法检测临床血液标本 HCC CTCs 的比较 | 第31页 |
| 14、统计学处理 | 第31页 |
| 二、 实验结果 | 第31-37页 |
| （一） 应用 ASGPR 与 CPS1 混合抗体检测肝癌细胞系阳性率高于单个抗体检测 | 第31-32页 |
| （二） 应用 ASGPR 与 CPS1 混合抗体检测肝癌组织可以避免单个抗体检测的假阴性 | 第32-33页 |
| （三） 细胞掺入实验分析改进方法的回收率、敏感性和特异性 | 第33-34页 |
| （四） 改进方法比原方法具有更高的的回收率、敏感性、特异性 | 第34-35页 |
| （五） 只有 HCC 血液样本可检出 CTCs | 第35-37页 |
| （六） 改进方法比原方法从临床肝癌血液样本中检测到更多 CTCs | 第37页 |
| 三、 讨论 | 第37-41页 |
| 第二部分 | 第41-64页 |
| 一、 材料与方法 | 第41-51页 |
| （一） 实验材料 | 第41-43页 |
| 1、 主要化学药品和生物试剂 | 第41-42页 |
| 2、 主要仪器设备和耗材 | 第42页 |
| 3、 细胞株 | 第42页 |
| 4、 组织切片 | 第42-43页 |
| （二） 实验方法 | 第43-51页 |
| 1、 细胞培养 | 第43页 |
| 2、 患者选择及标本采集 | 第43-44页 |
| 3、 采用肝癌 CTCs 血液模型建立 CPS1+ASGPR/Zeb1/Vimentin 多色免疫荧光染色方法 | 第44-45页 |
| 4、 HCC 患者外周血中 CTCs EMT 表型检测 | 第45-46页 |
| 5、 免疫组织化学检测 HCC 组织 Zeb1/Vimentin 表达 | 第46-48页 |
| 6、 免疫组织荧光双染检测 HCC 组织 Zeb1/Vimentin 表达 | 第48-49页 |
| 7、 阳性判定标准 | 第49-50页 |
| 8、 复查和随访方法 | 第50页 |
| 9、 统计学处理 | 第50-51页 |
| 二、 实验结果 | 第51-60页 |
| （一） 86 例 HCC 患者临床资料 | 第51-52页 |
| （二） 建立的多色免疫荧光染色方法可准确检测出不同细胞之间Zeb1/Vimentin 的表达差异 | 第52-53页 |
| （三） 在 HCC CTCs 中检测到 4 种不同的 Zeb1/Vimentin 表型 | 第53-54页 |
| （四） 不同肝癌个体的 CTCs 之间 Zeb1/Vimentin 表型不尽相同 | 第54-56页 |
| （五） 同一 HCC 患者中不同 CTCs 之间 Zeb1/Vimentin 表型也不尽相同 | 第56-57页 |
| （六） 在 HCC 组织中检测到 4 种不同的 Zeb1/Vimentin 表型 | 第57-59页 |
| （七） HCC 组织 Zeb1/Vimentin 表达与 CTCs 阳性与否具有相关性 | 第59页 |
| （八） 肝癌患者血样中检测到少量具有 Zeb1/Vimentin 表型的 CTM | 第59-60页 |
| 三、 讨论 | 第60-64页 |
| 全文小结 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-71页 |
| 综述 | 第71-75页 |
| 参考文献 | 第73-75页 |
| 在读期间参加科研工作和发表论文情况 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76页 |
