| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 目录 | 第6-9页 |
| 英文缩略表 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| ·前言 | 第10-12页 |
| ·大片段基因组文库的研究进展 | 第12-17页 |
| ·λ噬菌体文库 | 第12页 |
| ·柯斯(Cosmid)文库 | 第12页 |
| ·YAC文库 | 第12-13页 |
| ·BAC文库 | 第13-16页 |
| ·BAC载体的发展 | 第13-15页 |
| ·BAC载体的优点 | 第15-16页 |
| ·BIBAC载体 | 第16-17页 |
| ·BAC文库的构建流程 | 第17-20页 |
| ·BAC载体的制备 | 第18-19页 |
| ·高分子量DNA(HMW-DNA)的制备 | 第19页 |
| ·高分子量DNA的部分消化 | 第19页 |
| ·载体与高分子量DNA连接技术 | 第19-20页 |
| ·重组子的电击转化技术 | 第20页 |
| ·BAC文库的质量检测 | 第20页 |
| ·BAC文库的应用 | 第20-23页 |
| ·基因的图位克隆 | 第20-21页 |
| ·基因组物理图谱构建及基因组测序 | 第21-22页 |
| ·BAC-FISH | 第22页 |
| ·BAC转基因技术 | 第22-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-42页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·供试品种 | 第23页 |
| ·菌株来源 | 第23页 |
| ·载体来源 | 第23页 |
| ·主要药品及试剂 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备和耗材 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-42页 |
| ·BAC载体的获得 | 第25页 |
| ·载体质量检测 | 第25-27页 |
| ·大肠杆菌EP1300电转化感受态细胞的转化效率检测 | 第25-26页 |
| ·载体质量检测 | 第26-27页 |
| ·大片段核DNA的制备 | 第27-31页 |
| ·材料的预处理 | 第27页 |
| ·细胞核的提取 | 第27-29页 |
| ·Plug的制备 | 第29-30页 |
| ·大片段核DNA质量检测 | 第30-31页 |
| ·限制性酶切 | 第31-34页 |
| ·酶切前预处理 | 第31页 |
| ·最适酶切条件的选择 | 第31-33页 |
| ·大量酶切 | 第33-34页 |
| ·酶切大片段的纯化回收 | 第34-37页 |
| ·酶切片段的纯化 | 第34-36页 |
| ·大片段的回收 | 第36-37页 |
| ·连接与转化 | 第37-39页 |
| ·预连接 | 第37-38页 |
| ·脱盐 | 第38页 |
| ·电转化 | 第38-39页 |
| ·空载率和插入片段大小的初步检测 | 第39-40页 |
| ·BAC DNA的提取 | 第39页 |
| ·Not Ⅰ酶切 | 第39-40页 |
| ·大量连接转化 | 第40页 |
| ·BAC克隆的挑取和BAC文库的建成 | 第40-41页 |
| ·文库质量检测 | 第41-42页 |
| ·插入片段大小检测 | 第41页 |
| ·克隆稳定性检测 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-51页 |
| ·EP1300商用感受态和BAC载体质量的鉴定 | 第42页 |
| ·大片段DNA包埋胶块儿的制备 | 第42-45页 |
| ·部分酶切最适酶量的确定 | 第45页 |
| ·部分酶切及大片段回收 | 第45-48页 |
| ·DNA大片段的连接与转化 | 第48-49页 |
| ·插入片段大小的检测 | 第49-50页 |
| ·BAC克隆稳定性的检测 | 第50页 |
| ·文库覆盖率 | 第50-51页 |
| 4 讨论 | 第51-54页 |
| ·花生基因组BAC文库构建过程中遇到的问题 | 第51-53页 |
| ·针对花生细胞核提取的优化 | 第51页 |
| ·酶切过程遇到问题的探讨 | 第51页 |
| ·大片段纯化步骤的改进 | 第51-52页 |
| ·DNA电洗脱过程中遇到的问题 | 第52页 |
| ·提高连接转化效率的措施 | 第52-53页 |
| ·工作不足及下一步工作计划 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简历 | 第61页 |