| 摘要 | 第1-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 哺乳动物毛色形成的生物学基础 | 第9-14页 |
| ·哺乳动物的毛色类型 | 第9-10页 |
| ·哺乳动物毛色形成的细胞生物学 | 第10-14页 |
| 2 控制毛色遗传的基因座位及其遗传的分子基础 | 第14-18页 |
| ·Agouti座位 | 第15-16页 |
| ·棕色位点 | 第16-17页 |
| ·Extension座位 | 第17-18页 |
| 3 本研究的立项依据和研究意义 | 第18-19页 |
| 试验一 利用定量PCR检测28954基因在不同毛色绵羊皮肤中表达差异 | 第19-31页 |
| 1 试验材料与软件 | 第19页 |
| ·试验动物及取材 | 第19页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第19页 |
| ·分析工具软件及功能网站 | 第19页 |
| 2 试验方法 | 第19-23页 |
| ·绵羊皮肤总RNA的提取(Trizol法) | 第19-20页 |
| ·cDNA的合成 | 第20页 |
| ·引物设计 | 第20-21页 |
| ·Real-time PCR体系的建立 | 第21页 |
| ·RT-PCR扩增条件建立 | 第21-22页 |
| ·数据分析 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-28页 |
| ·不同毛色绵羊皮肤组织RNA质量鉴定 | 第23页 |
| ·28954的荧光定量结果 | 第23-25页 |
| ·28954的列检索与分析 | 第25-28页 |
| 4 讨论 | 第28-31页 |
| ·绵羊皮肤组织Total RNA提取结果及注意事项 | 第28-29页 |
| ·QRT-PCR实验方法的优化 | 第29页 |
| ·28954在不同毛色绵羊皮肤中的表达差异和生物信息学分析 | 第29-31页 |
| 试验二 绵羊Bos d 2-like真核表达载体的构建及其对毛色相关基因表达的影响 | 第31-56页 |
| 1 试验材料 | 第31-34页 |
| ·pcDNA3.1-Bos d 2 like载体构建的试验材料 | 第31-32页 |
| ·小鼠皮肤黑色素细胞培养的实验材料 | 第32-34页 |
| 2 试验方法 | 第34-44页 |
| ·Bos d 2-like基因CDS的扩增 | 第34-37页 |
| ·pMD18T-Bd21载体的构建 | 第37-39页 |
| ·pcDNA3.1-Bd21真核表达载体的构建 | 第39-40页 |
| ·无内毒素质粒DNA的制备及纯化 | 第40-41页 |
| ·小鼠皮肤黑色素细胞的复苏与冻存 | 第41页 |
| ·黑色素细胞的传代培养 | 第41-42页 |
| ·无内毒素pcDNA3.1-Bd21CDS质粒载体转染黑色素细胞 | 第42页 |
| ·RT-PCR检测 | 第42-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-54页 |
| ·载体构建结果 | 第44-46页 |
| ·小鼠黑色素细胞的转染结果 | 第46-54页 |
| 4 讨论 | 第54-56页 |
| ·关于转染方式和效率 | 第54页 |
| ·Bos d 2-like对毛色相关基因表达的影响 | 第54-56页 |
| 全文结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| Abstract | 第61-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
