| 摘要 | 第1-8页 |
| 第一部分 前言 | 第8-20页 |
| 1. 动物毛色研究进展 | 第8页 |
| 2. 动物黑色素研究进展 | 第8-11页 |
| ·黑色素及其功能 | 第8-9页 |
| ·黑色素合成的调节 | 第9-11页 |
| 3. microRNA在动物中的研究进展 | 第11-13页 |
| ·microRNA结构特点和合成 | 第11-12页 |
| ·miRNA的功能 | 第12-13页 |
| ·miRNA靶基因预测与鉴定 | 第13页 |
| 4. TGF-β的研究进展 | 第13-19页 |
| ·TGF-β超家族 | 第13-14页 |
| ·TGF-β信号转导 | 第14-17页 |
| ·TGF-β的生物学功能 | 第17-19页 |
| 5. 本研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二部分 材料与方法 | 第20-33页 |
| 1. 实验材料、试剂及仪器 | 第20-23页 |
| ·细胞材料和载体 | 第20页 |
| ·实验试剂 | 第20页 |
| ·主要溶液及试剂的配制 | 第20-23页 |
| ·实验仪器设备 | 第23页 |
| 2. 实验方法 | 第23-33页 |
| ·miR-663靶基因的预测和筛选 | 第23页 |
| ·羊驼TGF-β1基因的克隆、表达及定位 | 第23-27页 |
| ·双荧光素酶活性检测 | 第27-28页 |
| ·miR-663对黑色素细胞合成黑色素的影响 | 第28-33页 |
| 第三部分 结果与分析 | 第33-48页 |
| 1. miR-663靶基因筛选及分析 | 第33-34页 |
| 2. TGF-β1基因克隆、表达及定位分析 | 第34-39页 |
| ·TGF-β1基因的克隆及序列分析 | 第34-37页 |
| ·TGF-β1基因表达分析 | 第37-38页 |
| ·TGF-β1基因定位分析 | 第38-39页 |
| 3. miR-663靶基因验证 | 第39-41页 |
| ·pmirGLO-TGF-β1-3'UTR双荧光报告载体的构建及鉴定 | 第39-40页 |
| ·双荧光素酶活性检测 | 第40-41页 |
| 4. miR-663对黑色素生成的影响 | 第41-48页 |
| ·转染miR-663 mimic后miR-663的表达量分析 | 第42页 |
| ·转染miR-663 inhibitor后miR-663的表达量分析 | 第42-43页 |
| ·TGF-β1基因的mRNA表达分析 | 第43页 |
| ·TGF-β1信号转导分子Smads基因的mRNA表达分析 | 第43-44页 |
| ·黑色素合成相关基因的mRNA表达分析 | 第44-45页 |
| ·黑色素合成相关蛋白的Western blotting结果分析 | 第45-46页 |
| ·细胞黑色素含量检测 | 第46-48页 |
| 第四部分 讨论 | 第48-54页 |
| 1. miR-663靶基因预测与验证 | 第48-49页 |
| 2. TGF-β1与毛色形成的关系 | 第49-50页 |
| 3. miR-663对羊驼黑色素细胞色素合成的影响 | 第50-52页 |
| 4. miRNA对靶基因mRNA的影响 | 第52-54页 |
| 第五部分 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| Abstract | 第61-63页 |
| 附录 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
