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侧链含酸敏感基因的PEG嵌段共聚物的制备、评价及基因传递的研究

摘要第1-4页
Abstract第4-5页
目录第5-8页
第一章 绪论第8-16页
   ·引言第8-9页
   ·非病毒基因载体第9-13页
     ·阳离子脂质体(Liposome)第9-10页
     ·聚乙烯亚胺(PEI)第10-11页
     ·树枝状聚合物载体(Dendrimers)第11-12页
     ·聚赖氨酸(PLL)第12页
     ·聚甲基丙烯酸-N,N-二甲氨基乙酯(PDMAEMA)第12-13页
   ·提高聚阳离子载体基因传递效率的方法第13-15页
     ·提高复合物的血液输送稳定性第13页
     ·靶向细胞基因传递第13-14页
     ·提高复合物逃逸内涵体/溶酶体效果第14-15页
   ·课题的提出及研究内容第15-16页
第二章 侧链含酸敏感基团的 PEG 嵌段共聚物(PEG-b-PAOE)制备与表征第16-30页
   ·引言第16页
   ·实验试剂和仪器第16-17页
     ·实验试剂第16-17页
     ·实验仪器第17页
   ·实验方法第17-20页
     ·试剂纯化第17页
     ·2,2,2-三氟-N-(2,3-二羟基丙醇)乙酰胺(产物 a)的制备第17-18页
     ·2,2,2-三氟-N-(2-甲氧基-[1,3]二恶烷-4-亚甲基)乙酰胺(产物 b)的制备第18页
     ·对甲苯磺酸-2-二甲氨基乙醇盐(产物 c)的制备第18页
     ·4-氨基甲基-2-(N,N-二甲基乙氧基)- [1,3] 二恶烷(氨基原酸酯单体 d)的制备第18-19页
     ·侧链含酸敏感基团的嵌段共聚物(PEG-b-PAOE)的制备第19-20页
   ·表征第20-22页
     ·核磁共振分析第20页
     ·质谱分析第20页
     ·凝胶渗透色谱分析第20页
     ·侧链含酸敏感基团的嵌段共聚物(PEG-b-PAOE)的 pH 敏感性检测第20-22页
       ·不同 pH 试剂的配制第21-22页
       ·聚合物 pH 敏感性的检测第22页
   ·结果与分析第22-28页
     ·产物 a 的1H NMR 核磁图谱分析第22页
     ·产物 b 的1H NMR 核磁图谱分析第22页
     ·氨基原酸酯单体 d 的1H NMR、13C NMR 核磁图谱及质谱分析第22-23页
     ·PEG-b-PNSM 和 PEG-b-PAOE 的1H NMR 核磁图谱分析第23-24页
     ·PEG-b-PNSM 和 PEG-b-PAOE 凝胶渗透色谱(GPC)分析第24-25页
     ·PEG-b-PAOE 的 pH 敏感性结果分析第25-28页
   ·小结第28-30页
第三章 PEG-b-PAOE/DNA 复合物的研究第30-40页
   ·引言第30页
   ·实验试剂和仪器第30-31页
     ·实验试剂第30页
     ·实验仪器第30-31页
   ·实验部分第31-34页
     ·菌体的培养与质粒的提取第31-33页
       ·液体的配制第31页
       ·菌体培养第31页
       ·质粒提取第31-32页
       ·质粒的验证与浓度测定第32-33页
     ·PEG-b-PAOE/DNA 复合物的制备第33页
     ·琼脂糖凝胶电泳阻滞实验第33页
     ·DNase I 酶解实验第33页
     ·复合物稳定性实验第33-34页
     ·复合物粒径和 Zeta 电位实验第34页
     ·不同 pH 下复合物释放 DNA 实验第34页
   ·结果与讨论第34-39页
     ·琼脂糖凝胶电泳阻滞分析第34-35页
     ·复合物抗酶解能力分析第35-36页
     ·复合物稳定性分析第36-37页
     ·复合物粒径和 Zeta 电位分析第37-38页
     ·复合物释放 DNA 分析第38-39页
   ·本章小结第39-40页
第四章 PEG-b-PAOE 基因载体介导的体外细胞基因传递及细胞毒性评价第40-48页
   ·引言第40页
   ·实验仪器及试剂第40-41页
     ·实验试剂第40页
     ·实验仪器第40-41页
   ·细胞的培养第41-42页
     ·溶液的配制第41页
     ·细胞培养第41-42页
   ·实验方法第42-43页
     ·细胞毒性实验第42-43页
     ·体外基因传递实验第43页
   ·第43-47页
     ·PEG-b-PAOE 基因载体的细胞毒性第43-44页
     ·PEG-b-PAOE 基因载体的基因传递效率第44-47页
   ·小结第47-48页
主要结论与展望第48-50页
致谢第50-51页
参考文献第51-54页
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文第54页

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