摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
目录 | 第5-8页 |
第一章 绪论 | 第8-16页 |
·引言 | 第8-9页 |
·非病毒基因载体 | 第9-13页 |
·阳离子脂质体(Liposome) | 第9-10页 |
·聚乙烯亚胺(PEI) | 第10-11页 |
·树枝状聚合物载体(Dendrimers) | 第11-12页 |
·聚赖氨酸(PLL) | 第12页 |
·聚甲基丙烯酸-N,N-二甲氨基乙酯(PDMAEMA) | 第12-13页 |
·提高聚阳离子载体基因传递效率的方法 | 第13-15页 |
·提高复合物的血液输送稳定性 | 第13页 |
·靶向细胞基因传递 | 第13-14页 |
·提高复合物逃逸内涵体/溶酶体效果 | 第14-15页 |
·课题的提出及研究内容 | 第15-16页 |
第二章 侧链含酸敏感基团的 PEG 嵌段共聚物(PEG-b-PAOE)制备与表征 | 第16-30页 |
·引言 | 第16页 |
·实验试剂和仪器 | 第16-17页 |
·实验试剂 | 第16-17页 |
·实验仪器 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-20页 |
·试剂纯化 | 第17页 |
·2,2,2-三氟-N-(2,3-二羟基丙醇)乙酰胺(产物 a)的制备 | 第17-18页 |
·2,2,2-三氟-N-(2-甲氧基-[1,3]二恶烷-4-亚甲基)乙酰胺(产物 b)的制备 | 第18页 |
·对甲苯磺酸-2-二甲氨基乙醇盐(产物 c)的制备 | 第18页 |
·4-氨基甲基-2-(N,N-二甲基乙氧基)- [1,3] 二恶烷(氨基原酸酯单体 d)的制备 | 第18-19页 |
·侧链含酸敏感基团的嵌段共聚物(PEG-b-PAOE)的制备 | 第19-20页 |
·表征 | 第20-22页 |
·核磁共振分析 | 第20页 |
·质谱分析 | 第20页 |
·凝胶渗透色谱分析 | 第20页 |
·侧链含酸敏感基团的嵌段共聚物(PEG-b-PAOE)的 pH 敏感性检测 | 第20-22页 |
·不同 pH 试剂的配制 | 第21-22页 |
·聚合物 pH 敏感性的检测 | 第22页 |
·结果与分析 | 第22-28页 |
·产物 a 的1H NMR 核磁图谱分析 | 第22页 |
·产物 b 的1H NMR 核磁图谱分析 | 第22页 |
·氨基原酸酯单体 d 的1H NMR、13C NMR 核磁图谱及质谱分析 | 第22-23页 |
·PEG-b-PNSM 和 PEG-b-PAOE 的1H NMR 核磁图谱分析 | 第23-24页 |
·PEG-b-PNSM 和 PEG-b-PAOE 凝胶渗透色谱(GPC)分析 | 第24-25页 |
·PEG-b-PAOE 的 pH 敏感性结果分析 | 第25-28页 |
·小结 | 第28-30页 |
第三章 PEG-b-PAOE/DNA 复合物的研究 | 第30-40页 |
·引言 | 第30页 |
·实验试剂和仪器 | 第30-31页 |
·实验试剂 | 第30页 |
·实验仪器 | 第30-31页 |
·实验部分 | 第31-34页 |
·菌体的培养与质粒的提取 | 第31-33页 |
·液体的配制 | 第31页 |
·菌体培养 | 第31页 |
·质粒提取 | 第31-32页 |
·质粒的验证与浓度测定 | 第32-33页 |
·PEG-b-PAOE/DNA 复合物的制备 | 第33页 |
·琼脂糖凝胶电泳阻滞实验 | 第33页 |
·DNase I 酶解实验 | 第33页 |
·复合物稳定性实验 | 第33-34页 |
·复合物粒径和 Zeta 电位实验 | 第34页 |
·不同 pH 下复合物释放 DNA 实验 | 第34页 |
·结果与讨论 | 第34-39页 |
·琼脂糖凝胶电泳阻滞分析 | 第34-35页 |
·复合物抗酶解能力分析 | 第35-36页 |
·复合物稳定性分析 | 第36-37页 |
·复合物粒径和 Zeta 电位分析 | 第37-38页 |
·复合物释放 DNA 分析 | 第38-39页 |
·本章小结 | 第39-40页 |
第四章 PEG-b-PAOE 基因载体介导的体外细胞基因传递及细胞毒性评价 | 第40-48页 |
·引言 | 第40页 |
·实验仪器及试剂 | 第40-41页 |
·实验试剂 | 第40页 |
·实验仪器 | 第40-41页 |
·细胞的培养 | 第41-42页 |
·溶液的配制 | 第41页 |
·细胞培养 | 第41-42页 |
·实验方法 | 第42-43页 |
·细胞毒性实验 | 第42-43页 |
·体外基因传递实验 | 第43页 |
· | 第43-47页 |
·PEG-b-PAOE 基因载体的细胞毒性 | 第43-44页 |
·PEG-b-PAOE 基因载体的基因传递效率 | 第44-47页 |
·小结 | 第47-48页 |
主要结论与展望 | 第48-50页 |
致谢 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第54页 |