| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略词表 | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-25页 |
| ·ERs | 第11-13页 |
| ·ERs 的结构 | 第11页 |
| ·ERs 相关结合配体 | 第11-12页 |
| ·ERs 介导的基因转录及调控 | 第12-13页 |
| ·ERβ及其剪切异构体的研究进展 | 第13-18页 |
| ·ERβ简介 | 第13-14页 |
| ·哺乳动物 ERβ剪切异构体简介 | 第14-17页 |
| ·ERβ及其剪切异构体与相关雌性生殖系统疾病研究进展 | 第17-18页 |
| ·RNA 干涉研究进展 | 第18-22页 |
| ·RNA 干涉 | 第18页 |
| ·PTGS 简介 | 第18-20页 |
| ·RNAi 技术的应用 | 第20-22页 |
| ·慢病毒研究进展 | 第22页 |
| ·本研究的实验目的和意义 | 第22-25页 |
| 第二章 比格犬 ERβ1293、ERβ1257 体外细胞蛋白定位分析 | 第25-41页 |
| ·试验材料与方法 | 第25-34页 |
| ·试验材料 | 第25-27页 |
| ·试验方法 | 第27-34页 |
| ·试验结果 | 第34-38页 |
| ·ERβ1293、ERβ1257 编码序列的克隆 | 第34-35页 |
| ·ERβ1293、ERβ1257 重组质粒的菌液 PCR 鉴定 | 第35-36页 |
| ·ERβ1293、ERβ1257 MYC 标签重组质粒的双酶切鉴定 | 第36-37页 |
| ·ERβ1293、ERβ1257 重组质粒的测序 | 第37页 |
| ·Western Blot 鉴定 ERβ1293、ERβ1257 MYC 标签重组质粒融合蛋白的表达 | 第37页 |
| ·ERβ1293、ERβ1257 MYC 标签重组质粒蛋白定位 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-39页 |
| ·结论 | 第39-41页 |
| 第三章 比格犬 ERβ1293、ERβ1257 稳定表达细胞系的构建 | 第41-49页 |
| ·试验材料与方法 | 第41-45页 |
| ·试验材料 | 第41-43页 |
| ·试验方法 | 第43-45页 |
| ·试验结果 | 第45-46页 |
| ·筛选 ERβ1293、ERβ1257 阳性克隆细胞 | 第45页 |
| ·Western Blot 方法检测 ERβ1293、ERβ1257 阳性克隆细胞中表达 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| ·结论 | 第48-49页 |
| 第四章 比格犬 ERβ1293、ERβ1257 RNAi 重组慢病毒的构建及筛选 | 第49-67页 |
| ·试验材料与方法 | 第49-58页 |
| ·试验材料 | 第49-51页 |
| ·试验方法 | 第51-58页 |
| ·试验结果 | 第58-64页 |
| ·ERβ1293、ERβ1257 基因 shRNA 序列的设计 | 第58页 |
| ·荧光定量引物设计 | 第58-59页 |
| ·慢病毒载体侵染细胞感染复数的测定 | 第59页 |
| ·Western Blot 检测 ERβ1293、ERβ1257 基因 shRNA 序列对目的蛋白的干涉效果 | 第59-60页 |
| ·检测提取侵染细胞 RNA 的完整性 | 第60-61页 |
| ·PCR 法检测荧光引物特异性 | 第61-62页 |
| ·ERβ1293、ERβ1257 基因和β-actin 基因的标准曲线 | 第62-63页 |
| ·qRT-PCR 检测 ERβ1293、ERβ1257 干涉序列在 mRNA 水平的定量分析 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-66页 |
| ·结论 | 第66-67页 |
| 第五章 结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 致谢 | 第77-79页 |
| 附录 | 第79-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
