| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 1 研究背景 | 第13-34页 |
| ·细胞的兴奋性 | 第13-17页 |
| ·兴奋和兴奋性 | 第13-14页 |
| ·静息膜电位 | 第14-15页 |
| ·动作电位 | 第15-16页 |
| ·神经元的自发放电 | 第16-17页 |
| ·离子通道的研究背景及意义 | 第17-20页 |
| ·离子通道的特征 | 第17-18页 |
| ·离子通道的分类 | 第18-19页 |
| ·离子通道病简介 | 第19-20页 |
| ·电压门控钾通道 | 第20-29页 |
| ·电压门控钾通道的分类 | 第21页 |
| ·电压门控钾通道的结构 | 第21-23页 |
| ·电压门控钾通道的门控机制 | 第23-25页 |
| ·电压门控钾通道的离子选择性 | 第25-26页 |
| ·电压门控钾通道的功能及调控 | 第26-29页 |
| ·延迟整流钾通道 | 第26页 |
| ·瞬时外向钾通道 | 第26-27页 |
| ·钙激活钾通道 | 第27页 |
| ·内向整流钾通道 | 第27-28页 |
| ·慢失活钾通道 | 第28-29页 |
| ·蟾酥的研究概况 | 第29-33页 |
| ·蟾酥的化学成分 | 第29页 |
| ·蟾酥的药理作用 | 第29-32页 |
| ·本实验使用的典型化合物 | 第32-33页 |
| ·本论文的研究目的与研究内容 | 第33-34页 |
| ·研究目的 | 第33页 |
| ·研究内容 | 第33-34页 |
| 2 RBG/CBG对大鼠大脑海马神经元兴奋性的影响 | 第34-57页 |
| ·实验材料及设备 | 第35-37页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·实验试剂 | 第35-36页 |
| ·实验仪器 | 第36-37页 |
| ·主要液体 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-39页 |
| ·新生SD大鼠海马神经元细胞培养 | 第37-38页 |
| ·膜片钳记录 | 第38-39页 |
| ·实验数据的处理 | 第39页 |
| ·实验结果 | 第39-52页 |
| ·RBG对动作电位发放模式的影响 | 第40-41页 |
| ·RBG对动作电位基强度(rheobase)的影响 | 第41-42页 |
| ·RBG对动作电位阈电位(threshold)的影响 | 第42页 |
| ·RBG对动作电位峰值(peak amplitude)的影响 | 第42-46页 |
| ·RBG对动作电位半峰时程(APD0.5)的影响 | 第46页 |
| ·RBG对海马神经元电压依赖型钠通道的影响 | 第46-48页 |
| ·RBG对海马神经元电压依赖性钾通道的影响 | 第48-49页 |
| ·RBG对海马神经元电压依赖性钙通道的影响 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52-56页 |
| ·小结 | 第56-57页 |
| 3 RBG/CBG对大鼠大脑海马神经元电压门控性钾通道的作用 | 第57-81页 |
| ·实验材料及设备 | 第58-60页 |
| ·实验动物 | 第58页 |
| ·实验试剂 | 第58页 |
| ·实验仪器 | 第58-59页 |
| ·主要液体 | 第59-60页 |
| ·实验方法 | 第60页 |
| ·新生SD大鼠海马神经元细胞培养 | 第60页 |
| ·膜片钳记录 | 第60页 |
| ·实验数据的处理 | 第60页 |
| ·实验结果 | 第60-76页 |
| ·两种电压依赖型钾离子通道电流 | 第60-61页 |
| ·RBG对海马神经元I_A和I_K电流峰值的影响 | 第61-62页 |
| ·RBG对海马神经元I_A和I_K的电流-电压曲线的影响 | 第62-64页 |
| ·RBG对海马神经元I_K的稳态激活和失活特性的影响 | 第64页 |
| ·RBG对海马神经元I_A的稳态激活和失活特性的影响 | 第64-66页 |
| ·CBG对海马神经元I_A和I_K电流峰值的影响 | 第66-68页 |
| ·CBG对海马神经元I_A和I_K的电流-电压曲线的影响 | 第68页 |
| ·CBG对海马神经元I_K的稳态激活和失活特性的影响 | 第68-69页 |
| ·CBG对海马神经元I_A的稳态激活和失活特性的影响 | 第69-70页 |
| ·单通道记录时I_K通道的特征 | 第70-71页 |
| ·RBG/CBG对I_K通道电流幅度与电导的影响 | 第71-73页 |
| ·RBG/CBG对I_K通道开放概率的影响 | 第73-74页 |
| ·RBG/CBG对I_K通道开关时间的影响 | 第74-76页 |
| ·讨论 | 第76-80页 |
| ·RBG对于I_A电流的影响及其机制分析 | 第76-77页 |
| ·RBG和CBG对于I_K电流的影响及其机制分析 | 第77-80页 |
| ·小结 | 第80-81页 |
| 4 蟾蜍二烯内酯类化合物和K_V通道的分子对接研究 | 第81-104页 |
| ·钾通道蛋白和蟾蜍甾二烯类化合物的结构预处理 | 第81-84页 |
| ·分子对接方法 | 第84页 |
| ·对接结果 | 第84-101页 |
| ·Kv1.2(2A79)分子对接 | 第84-92页 |
| ·Kv1.2-Kv2.1(2R9R)的分子对接 | 第92-101页 |
| ·讨论 | 第101-102页 |
| ·小结 | 第102-104页 |
| 5 RBG对Kv2.1 通道作用机制的研究 | 第104-131页 |
| ·实验材料及设备 | 第106-107页 |
| ·实验细胞系 | 第106页 |
| ·实验试剂 | 第106页 |
| ·实验仪器 | 第106-107页 |
| ·实验方法 | 第107-114页 |
| ·质粒的提取,采用TIANpure Mini Plasmid Kit操作如下 | 第107-108页 |
| ·CaCl_2法制备DH5α或JM109感受态细胞 | 第108页 |
| ·热激法转化DH5α或JM109感受态细胞 | 第108页 |
| ·凝胶回收 | 第108-109页 |
| ·使用Alkaline Phosphatase做载体的去磷酸化反应 | 第109页 |
| ·EGFP基因的克隆 | 第109-110页 |
| ·RnKv2.1/RBG4-EGFP载体的构建 | 第110-111页 |
| ·敲除C-末端的RnKv2.1/RBG4-EGFP载体的构建 | 第111-113页 |
| ·HEK293细胞瞬时转染 | 第113页 |
| ·全细胞膜片钳记录 | 第113-114页 |
| ·实验结果 | 第114-127页 |
| ·RnKv2.1/RBG4-EGFP质粒的构建 | 第114-115页 |
| ·C末端敲除的RnKv2.1/RBG4-EGFP质粒的构建 | 第115-116页 |
| ·RBG对Kv2.1通道电流的抑制作用 | 第116页 |
| ·RBG对Kv2.1通道电流-电压曲线的影响 | 第116-119页 |
| ·RBG对Kv2.1通道门控特性的影响 | 第119-120页 |
| ·RBG对Kv2.1通道稳态动力学特征的影响 | 第120-122页 |
| ·RBG对TEA抑制作用的影响 | 第122页 |
| ·RBG对TEA依赖于K~+浓度的抑制作用的影响 | 第122-123页 |
| ·敲除Kv2.1的C末端可以去除RBG在Kv2.1通道上的影响 | 第123-127页 |
| ·讨论 | 第127-129页 |
| ·小结 | 第129-131页 |
| 结论与展望 | 第131-133页 |
| 结论 | 第131页 |
| 展望 | 第131-133页 |
| 创新点摘要 | 第133-134页 |
| 附录A 缩略词表 | 第134-136页 |
| 参考文献 | 第136-154页 |
| 攻读博士学位期间发表学术论文情况 | 第154-155页 |
| 致谢 | 第155-156页 |
| 作者简介 | 第156-157页 |
