摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
主要符号对照表 | 第9-11页 |
第1章 前言 | 第11-24页 |
·脱落酸(ABA)的生理功能 | 第11页 |
·ABA 的结构 | 第11-12页 |
·ABA 受体的研究进展 | 第12-16页 |
·G 蛋白偶联受体 | 第12-13页 |
·PYR/PYL/RCAR | 第13-14页 |
·CHLH/ABAR | 第14-16页 |
·ABA 下游信号转导研究概述 | 第16-17页 |
·镁螯合酶(Mg-chelatase)研究进展 | 第17-23页 |
·镁螯合酶的 H 亚基 | 第19页 |
·镁螯合酶的 I 亚基 | 第19-20页 |
·镁螯合酶的 D 亚基 | 第20-21页 |
·镁螯合酶的重要组分 GUN4 蛋白 | 第21-22页 |
·镁螯合酶催化的酶促反应过程 | 第22-23页 |
·研究目的及意义 | 第23-24页 |
第2章 实验材料与方法 | 第24-52页 |
·实验材料 | 第24-29页 |
·植物材料 | 第24页 |
·主要菌种、细胞株系和载体 | 第24页 |
·实验仪器 | 第24-25页 |
·各类酶、试剂和试剂盒 | 第25页 |
·常用培养基配制 | 第25-26页 |
·常用抗生素配制 | 第26页 |
·常用溶液配制 | 第26-29页 |
·实验方法 | 第29-47页 |
·载体构建 | 第29-32页 |
·抗体制备 | 第32-34页 |
·拟南芥栽培 | 第34页 |
·转基因植株的获得 | 第34-35页 |
·拟南芥基因组微量 DNA 提取 | 第35页 |
·拟南芥总蛋白提取及免疫印迹 | 第35-37页 |
·拟南芥 RNA 提取及实时荧光定量 PCR | 第37-40页 |
·表型实验及相关参数测定 | 第40-41页 |
·烟草荧光素酶互补实验 | 第41页 |
·烟草脆裂病毒介导的病毒基因沉默系统 | 第41-42页 |
·酵母双杂交实验方法 | 第42-43页 |
·酵母总蛋白提取和免疫共沉淀 | 第43-44页 |
·拟南芥总蛋白免疫共沉淀 | 第44页 |
·Sf9 昆虫细胞的培养 | 第44-45页 |
·昆虫表达系统表达蛋白 | 第45-46页 |
·FLAG 标签融合蛋白的纯化 | 第46-47页 |
·ABA 结合实验 | 第47页 |
·实验中用到的引物 | 第47-52页 |
第3章 镁螯合酶 H 亚基能够与与 I 亚基相互作用 | 第52-57页 |
·引言 | 第52页 |
·CHLH/ABAR 与 CHLI 和 CHLD 在酵母中互作研究 | 第52-53页 |
·ABARs 与 CHLI1 和 CHLD 相互作用强度分析 | 第53-54页 |
·用免疫共沉淀验证 ABARs 与 CHLI1 和 CHLD 的相互作用 | 第54-55页 |
·用荧光素酶互补实验验证 ABAR 与 CHLI1 和 CHLD 的互作 | 第55-56页 |
·小结 | 第56-57页 |
第4章 镁螯合酶 H 亚基特异结合 ABA | 第57-61页 |
·引言 | 第57页 |
·融合蛋白在昆虫细胞 sf9 中的表达及纯化 | 第57-58页 |
·融合蛋白在昆虫细胞 sf9 中的表达 | 第57-58页 |
·融合蛋白的纯化 | 第58页 |
·利用 SPR 技术研究镁螯合酶各组分的 ABA 结合 | 第58-59页 |
·小结 | 第59-61页 |
第5章 镁螯合酶 H 亚基和 I 亚基正向调控 ABA 信号转导 | 第61-77页 |
·引言 | 第61页 |
·遗传材料的准备 | 第61-63页 |
·T-DNA 插入突变体 | 第61-62页 |
·稳定 RNAi 突变体植株的获得 | 第62页 |
·过表达突变体植株的获得 | 第62-63页 |
·烟草脆裂病毒介导的病毒基因沉默 | 第63页 |
·CHLD 特异抗体制备 | 第63-65页 |
·CHLD 特异片段融合蛋白的诱导表达及纯化 | 第63-64页 |
·CHLD 抗体的纯化及特异性分析 | 第64-65页 |
·各突变体材料中目的基因表达量的分子检测 | 第65-66页 |
·CHLH/ABAR 正向介导 ABA 信号转导 | 第66-68页 |
·ABA 对 cch 和 rtl1 种子萌发的影响 | 第66-68页 |
·ABA 对 cch 和 rtl1 幼苗生长的影响 | 第68页 |
·ABA 对 cch 和 rtl1 气孔运动的影响 | 第68页 |
·CHLI 正向介导 ABA 信号转导 | 第68-72页 |
·ABA 对 CHLI 各突变体种子萌发的影响 | 第68-69页 |
·ABA 对 CHLI 各突变体幼苗生长的影响 | 第69-70页 |
·ABA 对 CHLI 各突变体气孔运动的影响 | 第70页 |
·ABA 对 CHLI 各突变体耐受干旱胁迫的影响 | 第70-72页 |
·CHLD 不参与 ABA 信号转导 | 第72-74页 |
·GUN4 不参与 ABA 信号转导 | 第74-76页 |
·小结 | 第76-77页 |
第6章 讨论 | 第77-82页 |
·CHLH/ABAR 和 CHLI 是 ABA 信号转导的正调节子 | 第77-79页 |
·镁螯合酶四组分中只有 CHLH 能够结合 ABA | 第79-80页 |
·CHLH 和 CHLI 介导的 ABA 信号转导与镁卟啉 IX 合成是互相独立的过程 | 第80-82页 |
第7章 结论 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-91页 |
致谢 | 第91-93页 |
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第93页 |