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镁螯合酶各组分在ABA信号转导中的功能

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
主要符号对照表第9-11页
第1章 前言第11-24页
   ·脱落酸(ABA)的生理功能第11页
   ·ABA 的结构第11-12页
   ·ABA 受体的研究进展第12-16页
     ·G 蛋白偶联受体第12-13页
     ·PYR/PYL/RCAR第13-14页
     ·CHLH/ABAR第14-16页
   ·ABA 下游信号转导研究概述第16-17页
   ·镁螯合酶(Mg-chelatase)研究进展第17-23页
     ·镁螯合酶的 H 亚基第19页
     ·镁螯合酶的 I 亚基第19-20页
     ·镁螯合酶的 D 亚基第20-21页
     ·镁螯合酶的重要组分 GUN4 蛋白第21-22页
     ·镁螯合酶催化的酶促反应过程第22-23页
   ·研究目的及意义第23-24页
第2章 实验材料与方法第24-52页
   ·实验材料第24-29页
     ·植物材料第24页
     ·主要菌种、细胞株系和载体第24页
     ·实验仪器第24-25页
     ·各类酶、试剂和试剂盒第25页
     ·常用培养基配制第25-26页
     ·常用抗生素配制第26页
     ·常用溶液配制第26-29页
   ·实验方法第29-47页
     ·载体构建第29-32页
     ·抗体制备第32-34页
     ·拟南芥栽培第34页
     ·转基因植株的获得第34-35页
     ·拟南芥基因组微量 DNA 提取第35页
     ·拟南芥总蛋白提取及免疫印迹第35-37页
     ·拟南芥 RNA 提取及实时荧光定量 PCR第37-40页
     ·表型实验及相关参数测定第40-41页
     ·烟草荧光素酶互补实验第41页
     ·烟草脆裂病毒介导的病毒基因沉默系统第41-42页
     ·酵母双杂交实验方法第42-43页
     ·酵母总蛋白提取和免疫共沉淀第43-44页
     ·拟南芥总蛋白免疫共沉淀第44页
     ·Sf9 昆虫细胞的培养第44-45页
     ·昆虫表达系统表达蛋白第45-46页
     ·FLAG 标签融合蛋白的纯化第46-47页
     ·ABA 结合实验第47页
   ·实验中用到的引物第47-52页
第3章 镁螯合酶 H 亚基能够与与 I 亚基相互作用第52-57页
   ·引言第52页
   ·CHLH/ABAR 与 CHLI 和 CHLD 在酵母中互作研究第52-53页
   ·ABARs 与 CHLI1 和 CHLD 相互作用强度分析第53-54页
   ·用免疫共沉淀验证 ABARs 与 CHLI1 和 CHLD 的相互作用第54-55页
   ·用荧光素酶互补实验验证 ABAR 与 CHLI1 和 CHLD 的互作第55-56页
   ·小结第56-57页
第4章 镁螯合酶 H 亚基特异结合 ABA第57-61页
   ·引言第57页
   ·融合蛋白在昆虫细胞 sf9 中的表达及纯化第57-58页
     ·融合蛋白在昆虫细胞 sf9 中的表达第57-58页
     ·融合蛋白的纯化第58页
   ·利用 SPR 技术研究镁螯合酶各组分的 ABA 结合第58-59页
   ·小结第59-61页
第5章 镁螯合酶 H 亚基和 I 亚基正向调控 ABA 信号转导第61-77页
   ·引言第61页
   ·遗传材料的准备第61-63页
     ·T-DNA 插入突变体第61-62页
     ·稳定 RNAi 突变体植株的获得第62页
     ·过表达突变体植株的获得第62-63页
     ·烟草脆裂病毒介导的病毒基因沉默第63页
   ·CHLD 特异抗体制备第63-65页
     ·CHLD 特异片段融合蛋白的诱导表达及纯化第63-64页
     ·CHLD 抗体的纯化及特异性分析第64-65页
   ·各突变体材料中目的基因表达量的分子检测第65-66页
   ·CHLH/ABAR 正向介导 ABA 信号转导第66-68页
     ·ABA 对 cch 和 rtl1 种子萌发的影响第66-68页
     ·ABA 对 cch 和 rtl1 幼苗生长的影响第68页
     ·ABA 对 cch 和 rtl1 气孔运动的影响第68页
   ·CHLI 正向介导 ABA 信号转导第68-72页
     ·ABA 对 CHLI 各突变体种子萌发的影响第68-69页
     ·ABA 对 CHLI 各突变体幼苗生长的影响第69-70页
     ·ABA 对 CHLI 各突变体气孔运动的影响第70页
     ·ABA 对 CHLI 各突变体耐受干旱胁迫的影响第70-72页
   ·CHLD 不参与 ABA 信号转导第72-74页
   ·GUN4 不参与 ABA 信号转导第74-76页
   ·小结第76-77页
第6章 讨论第77-82页
   ·CHLH/ABAR 和 CHLI 是 ABA 信号转导的正调节子第77-79页
   ·镁螯合酶四组分中只有 CHLH 能够结合 ABA第79-80页
   ·CHLH 和 CHLI 介导的 ABA 信号转导与镁卟啉 IX 合成是互相独立的过程第80-82页
第7章 结论第82-83页
参考文献第83-91页
致谢第91-93页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第93页

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