| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-24页 |
| ·胸腺肽α1的研究概况 | 第15-17页 |
| ·Tα1的发现及其性质 | 第15页 |
| ·Tα1的生物活性与临床应用 | 第15-16页 |
| ·Tα1制备方法简介 | 第16-17页 |
| ·化学合成法Tα1简介 | 第17-18页 |
| ·液相合成Tα1 | 第17页 |
| ·固相合成Tα1 | 第17-18页 |
| ·片段缩合法合成Tα1 | 第18页 |
| ·固相合成Tα1的纯化简介 | 第18-20页 |
| ·主要杂质的产生及其特点 | 第18-19页 |
| ·反相高效液相色谱法分离纯化Tα1 | 第19页 |
| ·离子交换法分离纯化Tα1 | 第19-20页 |
| ·复合法分离纯化Tα1 | 第20页 |
| ·Tα1精制液转盐 | 第20页 |
| ·合成Tα1的杂质及其来源 | 第20-21页 |
| ·消旋肽杂质 | 第20页 |
| ·缺失肽杂质 | 第20-21页 |
| ·杂质的分离纯化 | 第21页 |
| ·本课题的研究意义及技术路线 | 第21-24页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| ·技术路线 | 第22-24页 |
| 第2章 Tα1的合成与裂解工艺研究 | 第24-44页 |
| ·合成过程中涉及的定性定量方法 | 第24-28页 |
| ·定性检测方法 | 第24-25页 |
| ·茚三酮显色检测 | 第24-25页 |
| ·脱保护反应终点检测 | 第25页 |
| ·偶联反应终点检测 | 第25页 |
| ·定量检测方法 | 第25-28页 |
| ·树脂替代度的检测 | 第25-26页 |
| ·氨基酸-树脂替代度的检测 | 第26-27页 |
| ·肽树脂的增重 | 第27页 |
| ·HPLC法测定Tα1的纯度及含量 | 第27-28页 |
| ·Tα1-王树脂的合成 | 第28-38页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·仪器设备 | 第28页 |
| ·试剂试药 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-31页 |
| ·脱保护试剂(DBLK)的配制 | 第29页 |
| ·偶联试剂的配制 | 第29-30页 |
| ·复投偶联试剂的配制 | 第30页 |
| ·树脂洗涤 | 第30页 |
| ·氨基酸-王树脂的制备 | 第30页 |
| ·氨基酸-王树脂的封闭 | 第30-31页 |
| ·Tα1-王树脂的制备 | 第31页 |
| ·氨基酸的复投反应 | 第31页 |
| ·实验过程 | 第31-33页 |
| ·Tα1-王树脂的制备过程 | 第31-32页 |
| ·Tα1-肽树脂对照组实验 | 第32-33页 |
| ·结果与分析 | 第33-37页 |
| ·Tα1-王树脂制备结果 | 第33页 |
| ·Fmoc-Asn(Trt)-Wang替代度的选择 | 第33-34页 |
| ·原始王树脂替代度的选择 | 第34-35页 |
| ·偶联试剂的选择 | 第35页 |
| ·偶联反应时间的选择 | 第35页 |
| ·偶联温度的选择 | 第35-36页 |
| ·复投反应对合成结果的影响 | 第36页 |
| ·投料比的选择 | 第36-37页 |
| ·树脂浓度的选择 | 第37页 |
| ·小结 | 第37-38页 |
| ·影响合成效率的因素及解决策略 | 第37页 |
| ·合成副反应的控制 | 第37-38页 |
| ·Tα1-王树脂的裂解、洗涤、干燥 | 第38-42页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·仪器与设备 | 第38页 |
| ·试剂与试药 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-39页 |
| ·裂解液的配制 | 第38页 |
| ·Tα1-王树脂的裂解 | 第38-39页 |
| ·粗肽的洗涤 | 第39页 |
| ·粗肽的干燥 | 第39页 |
| ·实验过程 | 第39页 |
| ·Tα1-王树脂的裂解 | 第39页 |
| ·Tα1裂解液的洗涤 | 第39页 |
| ·Tα1粗肽的干燥 | 第39页 |
| ·结果与分析 | 第39-42页 |
| ·Tα1的裂解、洗涤、干燥结果 | 第39-40页 |
| ·肽树脂裂解的影响因素 | 第40-41页 |
| ·粗肽洗涤的影响因素 | 第41页 |
| ·干燥的影响因素 | 第41-42页 |
| ·小结 | 第42页 |
| ·粗肽干燥程度对粗肽溶解工序的影响 | 第42页 |
| ·裂解工序对后续工序的影响 | 第42页 |
| ·洗涤工序对干燥及纯化工序的影响 | 第42页 |
| ·结论 | 第42-44页 |
| ·影响消旋肽杂质产生的因素及解决策略 | 第42-43页 |
| ·影响缺失肽杂质产生的因素及解决策略 | 第43-44页 |
| 第3章 Tα1的纯化与脱盐工艺研究 | 第44-61页 |
| ·纯化与脱盐过程中涉及的定性和定量方法 | 第44-45页 |
| ·定性检测 | 第44页 |
| ·粗肽、纯化中间体及产品的定性检测 | 第44页 |
| ·质谱检测 | 第44页 |
| ·定量检测 | 第44-45页 |
| ·Tα1的分离纯化 | 第45-54页 |
| ·实验材料 | 第45-46页 |
| ·仪器与设备 | 第45页 |
| ·试剂与试药 | 第45-46页 |
| ·实验方法 | 第46-47页 |
| ·多步法分离纯化合成Tα1 | 第46页 |
| ·反相离子对色谱法分离纯化Tα1 | 第46-47页 |
| ·Tα1纯化中间体的处理 | 第47页 |
| ·实验过程 | 第47-48页 |
| ·粗肽预处理 | 第47页 |
| ·一步纯化 | 第47页 |
| ·二步纯化 | 第47-48页 |
| ·三步纯化 | 第48页 |
| ·结果与分析 | 第48-53页 |
| ·分离纯化结果 | 第48-49页 |
| ·流动相的选择 | 第49-50页 |
| ·pH的选择 | 第50-52页 |
| ·洗脱梯度的选择 | 第52页 |
| ·离子对试剂浓度对纯化的影响 | 第52-53页 |
| ·小结 | 第53-54页 |
| ·反相离子对色谱法应用 | 第53页 |
| ·影响分离效果的因素 | 第53-54页 |
| ·Tα1精制液的脱盐 | 第54-58页 |
| ·实验材料 | 第54-55页 |
| ·仪器与设备 | 第54-55页 |
| ·试剂与试药 | 第55页 |
| ·实验方法 | 第55页 |
| ·离子交换-反相色谱法脱盐 | 第55页 |
| ·反相色谱法脱盐 | 第55页 |
| ·实验过程 | 第55-56页 |
| ·离子交换-反相色谱法脱除Tα1中的有机盐 | 第55-56页 |
| ·反相色谱法脱除Tα1中的无机盐 | 第56页 |
| ·结果与分析 | 第56-57页 |
| ·实验结果 | 第56页 |
| ·离子交换-反相色谱法脱盐条件的筛选 | 第56页 |
| ·离子交换-反相色谱上样pH的选择 | 第56-57页 |
| ·离子交换树脂的选择 | 第57页 |
| ·离子交换-反相色谱洗脱液的选择 | 第57页 |
| ·小结 | 第57-58页 |
| ·Tα1冻干与质谱鉴定 | 第58-59页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·仪器与设备 | 第58页 |
| ·试剂与试药 | 第58页 |
| ·实验方法 | 第58页 |
| ·Tα1脱盐液浓缩与冻干 | 第58页 |
| ·实验过程与结果分析 | 第58-59页 |
| ·结论 | 第59-61页 |
| ·反相离子对液相色谱法的应用 | 第59页 |
| ·离子交换-反相色谱法脱除有机盐的应用 | 第59-61页 |
| 第4章 结论与展望 | 第61-63页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| ·展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72页 |