| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 文献综述 | 第13-30页 |
| 1 microRNA概述 | 第13-16页 |
| ·microRNA的发现及研究 | 第13-14页 |
| ·miRNA与siRNA的异同 | 第14-16页 |
| 2 microRNA的结构特征 | 第16页 |
| 3 microRNA的生物合成机制 | 第16-18页 |
| ·动物microRNA的生物合成机制 | 第16-17页 |
| ·植物microRNA的生物合成机制 | 第17-18页 |
| 4 microRNA的作用机理 | 第18-19页 |
| 5 microRNA表达检测技术 | 第19-22页 |
| ·基于表面杂交的表达检测技术 | 第19-21页 |
| ·Northern blotting | 第19-20页 |
| ·基因芯片 | 第20页 |
| ·原位杂交 | 第20-21页 |
| ·基于扩增技术的表达检测技术 | 第21-22页 |
| ·滚环复制 | 第21-22页 |
| ·实时定量PCR | 第22页 |
| 6 植物microRNA与干旱胁迫响应 | 第22页 |
| 7 microRNA及其靶基因的预测方法 | 第22-28页 |
| ·microRNA基因预测 | 第23-24页 |
| ·同源片段搜索法 | 第23页 |
| ·比较基因组搜索法 | 第23-24页 |
| ·靶标序列反向搜索法 | 第24页 |
| ·机器学习方法 | 第24页 |
| ·microRNA靶基因预测 | 第24-28页 |
| ·MiRanda | 第25页 |
| ·TargetScan(S) | 第25页 |
| ·DIANA-microT | 第25-26页 |
| ·RNAhybrid | 第26页 |
| ·PicTar | 第26-27页 |
| ·RNA22 | 第27页 |
| ·WMD3 | 第27-28页 |
| 8 本研究的目的及意义 | 第28-29页 |
| 9 技术路线 | 第29-30页 |
| 试验部分 | 第30-77页 |
| 1 材料和方法 | 第30-41页 |
| ·耐旱性不同的玉米自交系模拟干旱处理 | 第30页 |
| ·总RNA提取 | 第30-32页 |
| ·除RNase处理 | 第30页 |
| ·总RNA提取 | 第30-32页 |
| ·RNA的检测与鉴定 | 第32页 |
| ·microRNA芯片杂交 | 第32-34页 |
| ·芯片制备 | 第32-33页 |
| ·Poly(A)末端加尾 | 第33页 |
| ·杂交反应 | 第33页 |
| ·数据处理和分析 | 第33-34页 |
| ·差异表达microRNA的靶基因预测 | 第34页 |
| ·差异表达microRNA靶基因的数字化表达谱分析 | 第34-37页 |
| ·LNA-Northern Blotting检测验证 | 第37-41页 |
| ·RNA的提取和分离 | 第37-39页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第39页 |
| ·转膜 | 第39-40页 |
| ·固定 | 第40页 |
| ·预杂交 | 第40页 |
| ·探针变性 | 第40页 |
| ·杂交 | 第40页 |
| ·洗膜 | 第40页 |
| ·显影 | 第40-41页 |
| ·脱探针 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-70页 |
| ·RNA完整性及质量分析 | 第41页 |
| ·干旱胁迫下4个玉米自交系中差异表达的microRNA | 第41-63页 |
| ·自交系“81565”中干旱胁迫差异表达microRNA | 第45-48页 |
| ·自交系“87-1”中干旱胁迫差异表达microRNA | 第48-52页 |
| ·自交系“21ES”中干旱胁迫差异表达microRNA | 第52-58页 |
| ·自交系“丹340”中干旱胁迫差异表达microRNA | 第58-61页 |
| ·干旱胁迫响应microRNA家族的差异表达谱 | 第61-63页 |
| ·干旱胁迫响应microRNA的预测靶基因 | 第63-68页 |
| ·差异表达microRNA靶基因的数字化表达谱 | 第68-69页 |
| ·miR159和miR168差异表达的LNA-Northern Blotting检测验证 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-77页 |
| ·不同自交系microRNA表达对干旱胁迫响应不同 | 第70-71页 |
| ·差异表达microRNA靶基因在干旱胁迫下的潜在作用 | 第71-75页 |
| ·miR159和miR168与玉米的抗旱应答密切相关 | 第71-72页 |
| ·miR164靶基因在干旱胁迫下的潜在作用 | 第72-74页 |
| ·miR165和miR166靶基因在干旱胁迫下的潜在作用 | 第74页 |
| ·其他microRNA靶基因在干旱胁迫下的潜在作用 | 第74-75页 |
| ·关于microRNA对其靶基因调控 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 攻读学位论文期间发表论文 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
