玉米黄质环氧化酶基因的转基因RNA干涉
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-23页 |
| ·玉米黄质 | 第10-15页 |
| ·理化性质 | 第10页 |
| ·玉米黄质资源 | 第10-11页 |
| ·玉米黄质的生物合成途径 | 第11-12页 |
| ·玉米黄质的生理功能 | 第12-14页 |
| ·玉米黄质的研究现状 | 第14-15页 |
| ·RNA干扰 | 第15-19页 |
| ·RNAi发展 | 第15-16页 |
| ·RNAi的的分子机制 | 第16-17页 |
| ·RNAi的特点 | 第17-19页 |
| ·RNAi的基因功能研究前景 | 第19页 |
| ·玉米遗传转化 | 第19-21页 |
| ·玉米遗传转化系统 | 第19-20页 |
| ·玉米转化的方法 | 第20-21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料和方法 | 第23-37页 |
| ·玉米黄质环氧化酶基因Zep的克隆 | 第23-26页 |
| ·玉米总RNA提取 | 第23-24页 |
| ·cDNA的合成 | 第24页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·目的片段的回收与纯化 | 第25-26页 |
| ·ZepRNAi载体的构建 | 第26-30页 |
| ·目的片段和表达载体的酶切 | 第26-27页 |
| ·目的片段插入表达载体 | 第27-30页 |
| ·表达载体导入农杆菌 | 第30-31页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第30页 |
| ·冻融法转化农杆菌感受态细胞 | 第30-31页 |
| ·农杆菌菌液PCR鉴定 | 第31页 |
| ·农杆菌介导法转化玉米胚性愈伤组织 | 第31-34页 |
| ·培养基的制备 | 第31-33页 |
| ·诱导玉米愈伤组织 | 第33页 |
| ·农杆菌侵染液的制备 | 第33页 |
| ·农杆菌浸染玉米愈伤组织及共培养转化 | 第33-34页 |
| ·抗性愈伤组织的筛选 | 第34页 |
| ·植株再生 | 第34页 |
| ·再生植株的的PCR检测 | 第34-37页 |
| ·植株基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·目的基因片段的PCR检测 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-47页 |
| ·表达载体构建结果 | 第37-39页 |
| ·目的片段的扩增结果 | 第37-38页 |
| ·中间载体的构建结果 | 第38-39页 |
| ·表达载体的PCR检测和酶切验证 | 第39页 |
| ·玉米转基因植株 | 第39-42页 |
| ·玉米胚性愈伤组织 | 第39-40页 |
| ·愈伤组织分化的再生植株 | 第40-42页 |
| ·再生植株移栽大田 | 第42页 |
| ·抗性愈伤率、再生率和转化率 | 第42-43页 |
| ·再生植株的PCR检测结果 | 第43-47页 |
| 4 讨论 | 第47-49页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第47页 |
| ·RNAi技术在植物功能基因研究中的应用 | 第47页 |
| ·受体材料对转基因结果的影响 | 第47-48页 |
| ·玉米黄质的研究展望 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
