| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 引言 | 第13-36页 |
| 志贺氏菌致病机理 | 第13-15页 |
| 志贺氏菌致病的分子机制 | 第15-26页 |
| 志贺氏菌毒力大质粒基因组 | 第15-16页 |
| 志贺氏菌毒力大质粒编码蛋白 | 第16-17页 |
| 志贺氏菌毒力大质粒的毒力调控 | 第17-19页 |
| 志贺氏菌T3SS | 第19-21页 |
| 志贺氏菌T3SS的粘附和诱导 | 第21-22页 |
| 志贺氏菌T3SS诱导引发细菌侵袭 | 第22-23页 |
| 志贺氏菌细胞内移动和细胞间播散 | 第23-24页 |
| 总结 | 第24-26页 |
| 志贺氏菌毒力调控因子VirB蛋白研究进展 | 第26-36页 |
| VirB蛋白的主要结构域 | 第26-27页 |
| VirB蛋白转录调控的分子遗传学基础 | 第27页 |
| VirB蛋白通过佶抗H-NS蛋白实现基因转录 | 第27-29页 |
| VirB 同源蛋白 ParB，KorB，SopB 和 SpoOJ 结构 | 第29-31页 |
| VirB蛋白措抗H-NS的分子机制 | 第31-32页 |
| 总结 | 第32-36页 |
| 本课题研究拟解决科学问题 | 第36-37页 |
| 本课题研究内容和意义 | 第37-38页 |
| 1. VirB蛋白结构生物学研究 | 第37页 |
| 2. VirB蛋白的生物物理及生物化学的研究 | 第37页 |
| 3. VirB蛋白的体内细菌学研究 | 第37-38页 |
| 1. 材料 | 第38-43页 |
| ·菌株 | 第38页 |
| ·DNA | 第38页 |
| ·质粒 | 第38-40页 |
| ·常用试剂和耗材 | 第40-41页 |
| ·常用溶液 | 第41-42页 |
| ·常用仪器和设备 | 第42-43页 |
| 2. 方法 | 第43-57页 |
| ·质粒构建 | 第43-44页 |
| ·virB基因突变菌株的构建 | 第44-45页 |
| ·蛋白表达纯化 | 第45-46页 |
| ·硒代蛋白表达纯化 | 第46-47页 |
| ·荧光光谱实验 | 第47-48页 |
| ·复合物的组装 | 第48-49页 |
| ·晶体的初筛 | 第49-52页 |
| ·晶体优化 | 第52-54页 |
| ·晶体数据收集与结构解析 | 第54-56页 |
| ·凝胶阻滞实验 | 第56页 |
| ·beta半乳糖苷酶活性测定 | 第56-57页 |
| 3. 结果 | 第57-83页 |
| ·VirB蛋白同源于质粒分离蛋白 | 第57-58页 |
| ·蛋白表达和纯化 | 第58-59页 |
| ·VirB蛋白结合DNA的模式 | 第59-61页 |
| ·VirB蛋白晶体学研究 | 第61-68页 |
| ·VirB蛋白核心结构域与DNA复合物的结构 | 第68-78页 |
| ·VirB蛋白体外结合DNA特性 | 第78-79页 |
| ·VirB蛋白结构与功能的关系 | 第79-81页 |
| ·VirB蛋白R167氨基酸功能 | 第81-83页 |
| 4. 讨论 | 第83-85页 |
| ·VirB蛋白核心结构域与质粒分离蛋白ParB高度类似 | 第83页 |
| ·VirB蛋白结构核心结构域C端螺旋束的功能 | 第83-84页 |
| ·VirB蛋白核心结构域结合box2生物学意义 | 第84页 |
| ·VirB蛋白C端结构域参与蛋白与DNA高分子复合物的组装 | 第84-85页 |
| ·VirB蛋白特异性和非特异性结合DNA | 第85页 |
| ·R167为VirB蛋白特异性识别DNA的重要氨基酸 | 第85页 |
| 5. 结论 | 第85-88页 |
| 参考文献 | 第88-101页 |
| 附录 | 第101-103页 |
| 致谢 | 第103-105页 |
| 个人简历及发表文章 | 第105页 |
