荷叶铁线蕨和鹿角蕨遗传转化体系的研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 主要符号及缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第11-20页 |
| ·蕨类植物简介 | 第11-12页 |
| ·蕨类植物组织培养研究进展 | 第12-16页 |
| ·蕨类植物组织培养培养基与培养方式 | 第12-15页 |
| ·基本培养基的选择 | 第12-13页 |
| ·植物生长调节剂 | 第13-14页 |
| ·糖源和pH值 | 第14页 |
| ·光照和温度 | 第14-15页 |
| ·其他 | 第15页 |
| ·蕨类植物再生体系研究进展 | 第15-16页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化研究进展 | 第16-19页 |
| ·转化机理 | 第16页 |
| ·农杆菌转化应用范围 | 第16-17页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第17-19页 |
| ·菌株类型 | 第17页 |
| ·基因型和外植体类型 | 第17-18页 |
| ·培养方法 | 第18-19页 |
| ·农杆菌介导的蕨类植物转化概述 | 第19页 |
| ·研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 2 荷叶铁线蕨再生体系的建立与优化 | 第20-28页 |
| ·材料与方法 | 第20-23页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·试验方法 | 第20-23页 |
| ·孢子的消毒与培养 | 第20页 |
| ·荷叶铁线蕨原叶体的增殖 | 第20-22页 |
| ·荷叶铁线蕨孢子体诱导GGB的形成 | 第22页 |
| ·荷叶铁线蕨GGB的增殖和分化 | 第22-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-26页 |
| ·外源激素对荷叶铁线蕨原叶体增殖的影响 | 第23页 |
| ·外源激素对荷叶铁线蕨孢子体诱导GGB的影响 | 第23-25页 |
| ·外源激素对荷叶铁线蕨GGB增殖与分化的影响 | 第25-26页 |
| ·讨论 | 第26-28页 |
| ·外源激素对荷叶铁线蕨再生的影响 | 第26-27页 |
| ·荷叶铁线蕨再生不同途径比较分析 | 第27-28页 |
| 3 鹿角蕨再生体系的建立与优化 | 第28-35页 |
| ·材料与方法 | 第28-30页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·试验方法 | 第28-30页 |
| ·不同处理对鹿角蕨GGB的诱导 | 第28-29页 |
| ·鹿角蕨GGB增殖与分化 | 第29-30页 |
| ·鹿角蕨孢子体诱导生根 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-33页 |
| ·生长调节剂对鹿角蕨不同外植体诱导GGB的影响 | 第30-32页 |
| ·放置方式和是否划伤对鹿角蕨GGB诱导的影响 | 第32页 |
| ·生长调节剂对鹿角蕨GGB增殖的影响 | 第32-33页 |
| ·鹿角蕨诱导生根 | 第33页 |
| ·结论与讨论 | 第33-35页 |
| ·鹿角蕨GGB的诱导 | 第33-34页 |
| ·鹿角蕨GGB的增殖与分化 | 第34页 |
| ·试管苗诱导生根 | 第34-35页 |
| 4 两种蕨类植物遗传转化体系的探索 | 第35-46页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·生化试剂 | 第35页 |
| ·根癌农杆菌 | 第35-36页 |
| ·菌株及载体 | 第36页 |
| ·培养基 | 第36页 |
| ·主要仪器及设备 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-39页 |
| ·农杆菌EHA105感受态细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·冻融法转化感受态农杆菌EHA105 | 第37页 |
| ·Kan选择压的确定 | 第37页 |
| ·抑菌剂对外植体生长的影响 | 第37-38页 |
| ·工程菌的制备及转化过程 | 第38页 |
| ·不同处理时间对转化率的影响 | 第38-39页 |
| ·预培养时间设置 | 第38页 |
| ·侵染时间和不同浓度OD600值设置 | 第38页 |
| ·共培养时间设置 | 第38-39页 |
| ·推迟筛选对荷叶铁线蕨原叶体再生的影响 | 第39页 |
| ·GUS基因瞬时表达的检测 | 第39页 |
| ·结果 | 第39-44页 |
| ·选择合适的Kan筛选压 | 第39-40页 |
| ·选择合适的Cef抑菌剂浓度 | 第40-41页 |
| ·选择合适的农杆菌侵染浓度及时间 | 第41-42页 |
| ·预培养时间对转化率的影响 | 第42页 |
| ·共培养时间对转化率的影响 | 第42-43页 |
| ·推迟筛选对转化率的影响 | 第43-44页 |
| ·讨论 | 第44-46页 |
| ·选择转化受体材料 | 第44页 |
| ·选择合适的转化条件 | 第44-45页 |
| ·筛选方式 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 图版及说明 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |