| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 中英文缩略词表 | 第12-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一篇 文献综述 | 第15-33页 |
| 第一章 禽类呼吸系统主要病毒性疾病的检测方法和液相芯片技术 | 第15-33页 |
| 1 禽类呼吸系统主要病毒性疾病检测方法的研究进展 | 第15-20页 |
| ·病原学方法 | 第15-16页 |
| ·病毒分离 | 第15页 |
| ·电镜技术 | 第15-16页 |
| ·血清学方法 | 第16-18页 |
| ·病毒中和实验 | 第16页 |
| ·红细胞凝集试验及红细胞凝集抑制试验 | 第16页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第16-17页 |
| ·免疫荧光试验 | 第17页 |
| ·酶联免疫吸附试验 | 第17页 |
| ·胶体金技术 | 第17-18页 |
| ·分子生物学方法 | 第18-20页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第18页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第18-19页 |
| ·核酸探针技术 | 第19页 |
| ·环介导等温扩增 | 第19-20页 |
| ·基因芯片 | 第20页 |
| 2 液相芯片的原理及应用 | 第20-26页 |
| ·液相芯片的原理 | 第21-23页 |
| ·液相芯片的特点 | 第23页 |
| ·液相芯片的应用 | 第23-25页 |
| ·液相核酸芯片 | 第23-24页 |
| ·液相蛋白芯片 | 第24-25页 |
| ·液相芯片技术的展望 | 第25-26页 |
| 3 本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| 参考文献 | 第27-33页 |
| 第二篇 试验研究 | 第33-73页 |
| 第二章 AIV,NDV,IBV和ILTV单重液相芯片检测方法的建立 | 第33-57页 |
| 摘要 | 第33页 |
| ABSTEACT | 第33-35页 |
| 1 材料与方法 | 第35-45页 |
| ·实验材料 | 第35页 |
| ·实验试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| ·主要试剂的配置 | 第35-36页 |
| ·引物和探针的设计 | 第36-38页 |
| ·病毒核酸DNA/RNA提取 | 第38页 |
| ·病毒质粒的制备 | 第38-41页 |
| ·病毒RNA和DNA的扩增 | 第39页 |
| ·胶回收 | 第39-40页 |
| ·连接与转化 | 第40页 |
| ·质粒的提取与测序 | 第40-41页 |
| ·各病毒不对称PCR扩增 | 第41页 |
| ·探针的偶联 | 第41-42页 |
| ·偶联探针的验证 | 第42-43页 |
| ·杂交与检测 | 第43-44页 |
| ·杂交的步骤 | 第43页 |
| ·液相芯片杂交结果的判定 | 第43-44页 |
| ·液相芯片杂交条件的优化 | 第44页 |
| ·特异性试验 | 第44页 |
| ·敏感性试验 | 第44-45页 |
| ·液相芯片检测的稳定性试验 | 第45页 |
| ·液相芯片的应用 | 第45页 |
| 2 结果 | 第45-52页 |
| ·质粒序列测定结果 | 第45页 |
| ·电泳检测结果 | 第45-47页 |
| ·特异性电泳结果 | 第45-46页 |
| ·敏感性电泳结果 | 第46-47页 |
| ·探针与微球偶联验证 | 第47-48页 |
| ·液相杂交结果 | 第48-51页 |
| ·杂交条件的优化 | 第48-50页 |
| ·特异性试验结果 | 第50页 |
| ·敏感性试验结果 | 第50-51页 |
| ·稳定性试验结果 | 第51页 |
| ·样品检测结果 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-55页 |
| ·探针和引物的设计 | 第52-53页 |
| ·液相芯片质量控制 | 第53页 |
| ·液相芯片检测结果判定标准 | 第53-54页 |
| ·液相芯片检测方法的特异性、敏感性和稳定性 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第三章 AIV,NDV,IBV和ILTV多重液相芯片检测方法的初步建立 | 第57-73页 |
| 摘要 | 第57页 |
| ABSTRACT | 第57-58页 |
| 1 材料和方法 | 第58-62页 |
| ·实验材料 | 第58页 |
| ·实验试剂 | 第58-59页 |
| ·主要仪器 | 第59页 |
| ·主要试剂的配制 | 第59页 |
| ·引物和探针的设计 | 第59页 |
| ·病毒核酸DNA/RNA提取 | 第59页 |
| ·病毒多重不对称PCR扩增 | 第59页 |
| ·探针的偶联 | 第59-60页 |
| ·偶联探针的验证 | 第60页 |
| ·杂交与检测 | 第60-61页 |
| ·杂交的步骤 | 第60页 |
| ·液相芯片杂交结果的判定 | 第60-61页 |
| ·液相芯片杂交条件的优化 | 第61页 |
| ·特异性试验 | 第61页 |
| ·敏感性试验 | 第61-62页 |
| ·稳定性试验 | 第62页 |
| ·样品的检测 | 第62页 |
| 2 结果 | 第62-69页 |
| ·电泳检测结果 | 第62-64页 |
| ·特异性试验结果 | 第62-63页 |
| ·敏感性试验结果 | 第63-64页 |
| ·探针与微球偶联验证结果 | 第64-65页 |
| ·液相芯片杂交结果 | 第65-68页 |
| ·杂交条件的优化 | 第65-66页 |
| ·特异性试验结果 | 第66-67页 |
| ·敏感性试验结果 | 第67-68页 |
| ·液相芯片的稳定性试验结果 | 第68页 |
| ·样品的检测结果 | 第68-69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| ·多重液相芯片杂交条件的优化 | 第69页 |
| ·液相芯片检测方法的特异性、敏感性和稳定性 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-73页 |
| 全文结论 | 第73-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
