| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 英文缩写词表 | 第11-12页 |
| 第一篇 文献综述 | 第12-36页 |
| 第一章 马链球菌兽疫亚种的研究进展 | 第12-36页 |
| 1 流行病学特征 | 第12-15页 |
| ·猪链球菌病的流行病学 | 第12-13页 |
| ·马链球菌的流行病学 | 第13-15页 |
| 2 马链球菌的病原学 | 第15-16页 |
| ·病原学总述 | 第15页 |
| ·兽疫亚种的病原学 | 第15-16页 |
| 3 临床症状及病理变化 | 第16-17页 |
| 4 常见毒力因子与致病机理 | 第17-24页 |
| ·类M蛋白 | 第17-20页 |
| ·金属结合脂蛋白 | 第20-21页 |
| ·IgG结合蛋白 | 第21页 |
| ·纤维结合素结合蛋白 | 第21-22页 |
| ·链激酶 | 第22-23页 |
| ·透明质酸荚膜 | 第23-24页 |
| 5 猪链球菌病的诊断 | 第24-28页 |
| ·分离培养及生化鉴定 | 第24-25页 |
| ·血清学鉴定 | 第25-27页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第27-28页 |
| 6 猪链球菌病的防治 | 第28-31页 |
| ·管理因素 | 第28-29页 |
| ·治疗和控制 | 第29-31页 |
| 参考文献 | 第31-36页 |
| 第二篇 试验研究 | 第36-81页 |
| 第一章 马链球菌兽疫亚种Szp基因的克隆与表达 | 第36-52页 |
| 摘要 | 第36页 |
| 1 材料 | 第36-37页 |
| ·菌株与质粒 | 第36页 |
| ·主要酶和试剂 | 第36-37页 |
| ·主要仪器设备 | 第37页 |
| 2 试验方法 | 第37-44页 |
| ·引物设计及合成 | 第37页 |
| ·模板DNA的提取 | 第37页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第37-38页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第38页 |
| ·目的基因的A/T克隆 | 第38-40页 |
| ·Szp基因与表达载体pET-28a(+)的连接 | 第40-41页 |
| ·重组质粒pET-28a(+)-Szp的双酶切鉴定 | 第41页 |
| ·阳性重组质粒转化表达用感受态细胞 | 第41页 |
| ·重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第41-43页 |
| ·蛋白的凝胶过滤层析 | 第43页 |
| ·重组蛋白的免疫原性鉴定 | 第43-44页 |
| 3 试验结果 | 第44-48页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第44页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定和双酶切鉴定结果 | 第44-46页 |
| ·测序结果 | 第46页 |
| ·重组蛋白的表达结果 | 第46-47页 |
| ·重组蛋白纯化的结果 | 第47-48页 |
| ·重组蛋白的免疫原性鉴定 | 第48页 |
| 4 讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-50页 |
| ABSTRACT | 第50-52页 |
| 第二章 马链球菌兽疫亚种间接ELISA试剂盒的研制及应用 | 第52-70页 |
| 摘要 | 第52页 |
| 1 试验材料 | 第52-53页 |
| ·菌株和血清 | 第52-53页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第53页 |
| ·主要试验仪器 | 第53页 |
| ·ELISA相关溶液的配制 | 第53页 |
| 2 试验方法 | 第53-57页 |
| ·重组类M蛋白的定量分析 | 第53-54页 |
| ·重组蛋白抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定 | 第54页 |
| ·封闭液的确定 | 第54页 |
| ·血清稀释液的确定 | 第54页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第54-55页 |
| ·酶标二抗反应时间的确定 | 第55页 |
| ·底物的最佳反应时间的确定 | 第55页 |
| ·确定ELISA最佳操作程序 | 第55页 |
| ·间接ELISA检测试剂盒的组建 | 第55页 |
| ·间接ELISA检测试剂盒的敏感性试验 | 第55-56页 |
| ·间接ELISA检测试剂盒的特异性试验 | 第56页 |
| ·重复性试验 | 第56页 |
| ·保存期试验 | 第56-57页 |
| ·反应板破坏性试验 | 第57页 |
| ·ELISA判定标准的确定 | 第57页 |
| 3 试验结果 | 第57-66页 |
| ·类M蛋白浓度测定的结果 | 第57-58页 |
| ·抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定 | 第58-59页 |
| ·封闭液的确定 | 第59-60页 |
| ·血清稀释液的确定 | 第60页 |
| ·血清最佳反应时间的确定 | 第60-61页 |
| ·酶标二抗反应时间的确定 | 第61页 |
| ·底物的最佳反应时间的确定 | 第61-62页 |
| ·敏感性试验 | 第62页 |
| ·特异性试验 | 第62-63页 |
| ·重复性试验 | 第63-65页 |
| ·保存期试验 | 第65页 |
| ·反应板破坏性试验 | 第65页 |
| ·ELISA判定标准的确定 | 第65-66页 |
| 4 讨论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-68页 |
| ABSTRACT | 第68-70页 |
| 第三章 马链球菌兽疫亚种间接ELISA诊断试剂盒的应用、血清流行病学调查与分析验证 | 第70-81页 |
| 摘要 | 第70页 |
| 1 试验材料 | 第70-71页 |
| ·试剂 | 第70-71页 |
| ·待检血清来源 | 第71页 |
| 2 试验方法 | 第71-72页 |
| ·ELISA操作规程 | 第71-72页 |
| ·分析与验证 | 第72页 |
| ·血清流行病学调查 | 第72页 |
| 3 试验结果 | 第72-77页 |
| ·分析与验证结果 | 第72-73页 |
| ·清流行病学调查结果 | 第73-76页 |
| ·对大型家畜的血清流行病学调查 | 第76-77页 |
| 4 结果讨论 | 第77-79页 |
| 参考文献 | 第79-80页 |
| ABSTRACT | 第80-81页 |
| 全文总结 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86页 |
