| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-43页 |
| 1 烟粉虱抗性研究概况 | 第13-24页 |
| ·烟粉虱的生物型分布及为害 | 第13-19页 |
| ·烟粉虱综合防治与抗药性 | 第19-24页 |
| 2 昆虫对杀虫剂的解毒代谢抗性研究进展 | 第24-28页 |
| ·酯酶引起的代谢抗性 | 第24-26页 |
| ·谷胱甘肽-S-转移酶引起的代谢抗性 | 第26页 |
| ·多功能氧化酶系引起的代谢抗性 | 第26-28页 |
| 3 昆虫对杀虫剂的靶标抗性研究进展 | 第28-40页 |
| ·乙酰胆碱酯酶及其引起抗性的机理 | 第28-37页 |
| ·乙酰胆碱酯酶与昆虫抗药性的关系 | 第29-30页 |
| ·AChE的高级结构及酶动力学参数 | 第30-35页 |
| ·与昆虫抗药性相关的AChE的变异 | 第35-37页 |
| ·与昆虫抗药性相关的其它靶标 | 第37-40页 |
| 4 烟粉虱对毒死蜱抗性机理研究的意义 | 第40-43页 |
| 第二章 烟粉虱对毒死蜱抗、感品系的室内筛选 | 第43-49页 |
| 摘要 | 第43-44页 |
| 1 材料和方法 | 第44-45页 |
| ·供试烟粉虱及饲养 | 第44页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第44页 |
| ·生物测定 | 第44页 |
| ·室内抗药性筛选 | 第44-45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-46页 |
| ·烟粉虱抗感品系的室内筛选 | 第45-46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 烟粉虱对毒死蜱的代谢抗性机制 | 第49-55页 |
| 摘要 | 第49-50页 |
| 1 材料和方法 | 第50-51页 |
| ·供试烟粉虱及饲养 | 第50页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第50页 |
| ·解毒代谢酶活力离体测定 | 第50-51页 |
| ·蛋白量测定 | 第51页 |
| ·毒力测定及活体增效试验测定 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-53页 |
| ·抗感品系解毒代谢酶活力比较 | 第51-52页 |
| ·增效剂TPP、DEM和PBO对毒死蜱的增效作用 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53-55页 |
| 第四章 烟粉虱对毒死蜱的靶标抗性机制 | 第55-65页 |
| 摘要 | 第55-56页 |
| 1 材料和方法 | 第56-58页 |
| ·供试烟粉虱 | 第56页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第56页 |
| ·AChE酶活力测定 | 第56-57页 |
| ·AChE酶动力学参数与Ki值分析 | 第57页 |
| ·蛋白含量测定 | 第57页 |
| ·抗感品系烟粉虱总RNA提取和RT-PCR | 第57-58页 |
| ·Ace1基因片段PCR扩增及产物克隆、测序与序列分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-62页 |
| ·烟粉虱抗感品系AChE酶活力的比较 | 第58-59页 |
| ·烟粉虱抗感品系AChE酶动力学参数及Ki值比较 | 第59-60页 |
| ·烟粉虱抗感品系ace1氨基酸序列比对 | 第60-62页 |
| ·烟粉虱抗感品系ace1抗性突变频率调查 | 第62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| 第五章 不同地理种群烟粉虱生物型鉴定及靶标抗性突变频率的PCR-RFLP检测 | 第65-75页 |
| 摘要 | 第65-66页 |
| 1 材料和方法 | 第66-70页 |
| ·供试烟粉虱 | 第66-67页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第67页 |
| ·烟粉虱基因组DNA的提取 | 第67-68页 |
| ·COI基因片段的克隆与测序 | 第68页 |
| ·Ace1基因片段的克隆及PCR产物的酶切检测 | 第68-70页 |
| 2 结果与分析 | 第70-73页 |
| ·mtDNA COI基因序列鉴定法对不同地区烟粉虱生物型的鉴定 | 第70-71页 |
| ·RFLP-PCR对不同地理种群烟粉虱ace1基因突变频率的检测 | 第71-73页 |
| 3 讨论 | 第73-75页 |
| 第六章 烟粉虱抗感ACE1基因的体外真核表达及分析 | 第75-89页 |
| 摘要 | 第75-76页 |
| 1 材料和方法 | 第76-82页 |
| ·菌种与载体 | 第76页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第76页 |
| ·定点突变获得烟粉虱ace1抗感基因型质粒 | 第76-77页 |
| ·烟粉虱乙酰胆碱酯酶基因真核表达实验方法 | 第77-82页 |
| ·烟粉虱乙酰胆碱酯酶基因真核表达供体质粒构建 | 第77-78页 |
| ·昆虫细胞的培养 | 第78页 |
| ·重组病毒的构建 | 第78-80页 |
| ·重组病毒Bacmid DNA对昆虫细胞的转染及感染 | 第80-81页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第81-82页 |
| ·AChE表达产物酶活测定 | 第82页 |
| 2 结果与分析 | 第82-88页 |
| ·定点突变结果测序检测 | 第82-84页 |
| ·供体质粒构建 | 第84页 |
| ·重组杆状病毒Bacmid的获得 | 第84-85页 |
| ·重组Bacmid转染Sf9细胞 | 第85-86页 |
| ·SDS-PAGE检测表达产物 | 第86-87页 |
| ·表达产物的生物活性分析 | 第87-88页 |
| 3 讨论 | 第88-89页 |
| 全文总结 | 第89-91页 |
| 参考文献 | 第91-105页 |
| 附录：攻读学位期间发表的学术论文 | 第105-107页 |
| 致谢 | 第107页 |
