| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 1 绪言 | 第11-23页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第11-14页 |
| ·巴斯德毕赤酵母表达系统的简介 | 第11页 |
| ·巴斯德毕赤酵母的生物学特性 | 第11-12页 |
| ·毕赤酵母表达系统的优点 | 第12-13页 |
| ·重组毕赤酵母的典型发酵过程 | 第13页 |
| ·微生物反应动力学模型 | 第13-14页 |
| ·毕赤酵母表达系统的应用前景 | 第14页 |
| ·青霉素酰化酶的研究进展 | 第14-20页 |
| ·青霉素酰化酶 | 第14页 |
| ·青霉素酰化酶的分离纯化 | 第14-16页 |
| ·青霉素酰化酶的固定化 | 第16-18页 |
| ·青霉素酰化酶的应用 | 第18-20页 |
| ·论文的研究目的意义及内容 | 第20-23页 |
| ·论文的研究目的意义 | 第20页 |
| ·研究内容 | 第20-23页 |
| 2 重组毕赤酵母发酵产青霉素G酰化酶条件优化 | 第23-33页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·材料与方法 | 第23-25页 |
| ·菌株 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·培养方法 | 第24-25页 |
| ·青霉素酰化酶的活力测定及定义 | 第25页 |
| ·响应面试验 | 第25页 |
| ·结果与分析 | 第25-32页 |
| ·单因素实验结果与分析 | 第26-28页 |
| ·Box-Behnken Design实验结果与分析 | 第28-32页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| 3 重组毕赤酵母分批发酵动力学的研究 | 第33-47页 |
| ·引言 | 第33页 |
| ·材料与方法 | 第33-36页 |
| ·菌种 | 第33页 |
| ·主要的仪器与试剂 | 第33-34页 |
| ·培养基 | 第34页 |
| ·发酵过程中参数的测定 | 第34-36页 |
| ·高密度发酵工艺 | 第36-37页 |
| ·种子制备 | 第36页 |
| ·分批发酵实验 | 第36-37页 |
| ·实验数据的获取 | 第37页 |
| ·模型参数拟合 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-45页 |
| ·重组毕赤酵母分批补料发酵过程曲线 | 第37-38页 |
| ·动力学模型的建立 | 第38-41页 |
| ·模型参数拟合 | 第41-45页 |
| ·模型的验证 | 第45页 |
| ·小结 | 第45-47页 |
| 4 青霉素G酰化酶的分离纯化 | 第47-53页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料与方法 | 第47-48页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·相关试剂的配制 | 第48页 |
| ·实验方法 | 第48-50页 |
| ·酶活测定方法 | 第48页 |
| ·青霉素酰化酶比活力定义 | 第48页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第48-49页 |
| ·酶的提取 | 第49-50页 |
| ·酶的分离纯化 | 第50页 |
| ·结果与分析 | 第50-52页 |
| ·酶的提取效果 | 第50页 |
| ·酶的分离纯化效果 | 第50-51页 |
| ·浓缩除盐 | 第51页 |
| ·青霉素G酰化酶纯化小结 | 第51-52页 |
| ·小结 | 第52-53页 |
| 5 青霉素G酰化酶的固定化 | 第53-65页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·实验材料 | 第53页 |
| ·药品和试剂 | 第53页 |
| ·主要仪器 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-55页 |
| ·酶活测定方法及定义 | 第53-54页 |
| ·酶活力回收率 | 第54页 |
| ·氨基型载体LX-1000HA的活化 | 第54页 |
| ·载体的筛选 | 第54页 |
| ·单因素实验 | 第54-55页 |
| ·Box-Benhnken Design | 第55页 |
| ·结果与分析 | 第55-63页 |
| ·不同载体对青霉素酰化酶固定化的影响 | 第55-56页 |
| ·单因素试验结果与分析 | 第56-59页 |
| ·响应面试验结果与分析 | 第59-63页 |
| ·回归模型验证实验 | 第63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 6 结论与展望 | 第65-69页 |
| ·结论 | 第65页 |
| ·创新点 | 第65-66页 |
| ·展望 | 第66-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 附录 攻读硕士学位期间主要成果 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |