| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-14页 |
| ·肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)简介 | 第9-11页 |
| ·TNF-α-生物学性质 | 第9页 |
| ·TNF-α介导的信号传导途径 | 第9-11页 |
| ·鱼类中TNF-α研究近况 | 第11页 |
| ·干扰素(Interferon,IFN)简介 | 第11-13页 |
| ·IFNγ生物学性质 | 第11页 |
| ·IFNγ信号传导途径 | 第11-12页 |
| ·鱼类中IFNγ研究近况 | 第12-13页 |
| ·本研究的目的和内容 | 第13-14页 |
| 第二章 草鱼TNF-α的克隆鉴定、重组表达、分离纯化及生物学功能的研究 | 第14-41页 |
| ·实验材料 | 第14-17页 |
| ·实验动物 | 第14页 |
| ·菌种和质粒 | 第14页 |
| ·主要实验仪器和设备 | 第14页 |
| ·主要实验试剂 | 第14-15页 |
| ·主要溶液配制 | 第15-17页 |
| ·实验方法与操作 | 第17-26页 |
| ·草鱼TNF-α的克隆与测序以及序列分析 | 第17-20页 |
| ·草鱼TNF-α表达载体(pET30a(+)-gcTNF-α)的构建 | 第20-22页 |
| ·重组草鱼TNF-α(rgcTNF-α)融合蛋白诱导表达 | 第22-23页 |
| ·rgcTNF-α融合蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| ·草鱼TNF-α生物学功能的研究 | 第24-26页 |
| ·实验结果 | 第26-38页 |
| ·草鱼TNF-α部分cDNA序列的克隆 | 第26-27页 |
| ·用3’-RACE方法克隆草鱼TNF-α 3’端序列 | 第27页 |
| ·用5’-RACE方法克隆草鱼TNF-α 5’端序列 | 第27-28页 |
| ·草鱼TNF-α的核苷酸序列及推测的氨基酸序列分析 | 第28-31页 |
| ·系统进化分析 | 第31页 |
| ·pET30a(+)-gcTNF-α表达质粒的构建和鉴定 | 第31-32页 |
| ·rgcTNF-α融合蛋白的诱导表达 | 第32-33页 |
| ·rgcTNF-α融合蛋白的纯化和鉴定 | 第33-34页 |
| ·不同剂量rgcTNF-α对草鱼HKL中gcTNF-α、gcIκBα、gcTRAF1和gcTRAF2 mRNA表达水平的影响 | 第34-35页 |
| ·不同时间条件下rgcTNF-α对草鱼HKL中gcTNF-α、gcIκBα、gcTRAF1和gcTRAF2 mRNA表达水平的影响 | 第35-36页 |
| ·NF-κB抑制剂PDTC对rgcTNF-α刺激后的草鱼HKL分泌TNF-α的影响 | 第36-37页 |
| ·rgcTNF-α对草鱼HKL中IκBα磷酸化状态的影响 | 第37-38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| 第三章 草鱼IFNγ2的克隆鉴定、重组表达、分离纯化及生物学功能的研究 | 第41-51页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·实验方法与操作 | 第41-43页 |
| ·草鱼IFNγ2的克隆与测序以及序列分析 | 第41页 |
| ·草鱼IFNγ2表达载体(pET30a(+)-gcIFNγ2)的构建 | 第41页 |
| ·重组草鱼IFNγ2(rgcIFNγ2)融合蛋白的诱导表达 | 第41-42页 |
| ·rgcIFNγ2融合蛋白的纯化 | 第42-43页 |
| ·rgcIFNγ2融合蛋白生物学活性的确定 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-49页 |
| ·草鱼IFNγ2的核苷酸序列及推测的氨基酸序列分析 | 第43-45页 |
| ·系统进化分析 | 第45-46页 |
| ·pET30a(+)-gcIFNγ2表达质粒构建和鉴定 | 第46-47页 |
| ·rgcIFNγ2融合蛋白诱导表达 | 第47页 |
| ·rgcIFNγ2融合蛋白纯化 | 第47-48页 |
| ·rgcIFNγ2融合蛋白生物学活性的确定 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 总结 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 攻读硕士期间取得的研究成果 | 第57页 |
