| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 一、绪论 | 第11-25页 |
| 1 乙型肝炎病毒X蛋白 | 第11-17页 |
| ·HBx的生物学功能 | 第13-17页 |
| ·HBx的反式激活作用和信号转导功能 | 第13-14页 |
| ·HBx在肝癌中的诱导与转化 | 第14-16页 |
| ·HBx在细胞凋亡中的调控机制 | 第16-17页 |
| ·HBx抑制肝细胞凋亡 | 第16-17页 |
| ·HBx促进细胞凋亡 | 第17页 |
| 2 染色体稳定性下降可导致肿瘤发生 | 第17-19页 |
| 3 RECQL解螺旋酶 | 第19-23页 |
| ·RECQ的结构与生物学特性 | 第20-23页 |
| ·RECQL在DNA复制,重组,修复中的作用 | 第21-22页 |
| ·RECQL在抑制癌症和肿瘤方面的作用 | 第22-23页 |
| 4 研究的目的与意义 | 第23-25页 |
| 二、材料与方法 | 第25-37页 |
| 1 材料 | 第25-30页 |
| ·细胞系、质粒、菌株和引物 | 第25-27页 |
| ·细胞系 | 第25页 |
| ·质粒 | 第25-26页 |
| ·菌株 | 第26-27页 |
| ·引物 | 第27页 |
| ·培养基 | 第27-28页 |
| ·试剂和酶 | 第28页 |
| ·主要缓冲液 | 第28-30页 |
| 2 方法 | 第30-37页 |
| ·PCR | 第30-31页 |
| ·质粒DNA的抽提 | 第31页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
| ·大肠杆菌的常规转化 | 第32页 |
| ·大肠杆菌的快速转化 | 第32页 |
| ·SDS-PAGE | 第32-33页 |
| ·免疫印记 | 第33-34页 |
| ·哺乳动物细胞HEK293的复苏 | 第34页 |
| ·哺乳动物细胞HEK293的冻存 | 第34页 |
| ·哺乳动物细胞HEK293的组织培养 | 第34-35页 |
| ·哺乳动物细胞的转染(以sofast转染试剂为列) | 第35页 |
| ·免疫共沉淀 | 第35-37页 |
| 三、结果与分析 | 第37-45页 |
| 1 HBx相互作用蛋白的筛选 | 第37页 |
| 2 表达载体的构建 | 第37-40页 |
| 3 免疫共沉淀验证HBx与RECQL之间的相互作用 | 第40-41页 |
| 4 HBx与RECQL共定位在细胞中 | 第41-42页 |
| 5 HBx与RECQL缺失突变体的构建 | 第42-45页 |
| 四、讨论 | 第45-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52页 |