| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-21页 |
| ·造血干细胞 | 第9-12页 |
| ·造血干细胞的发生和发育 | 第9-10页 |
| ·转录因子在造血分化中的作用 | 第10-12页 |
| ·THAP11 基因 | 第12-17页 |
| ·THAP 蛋白家族结构 | 第12-13页 |
| ·THAP 蛋白家族成员 | 第13-15页 |
| ·THAP11 蛋白 | 第15-17页 |
| ·慢病毒载体的发展及应用 | 第17-20页 |
| ·慢病毒的生物学特性 | 第17页 |
| ·慢病毒载体的发展 | 第17-18页 |
| ·慢病毒载体的包装 | 第18-19页 |
| ·慢病毒载体在血液系统疾病研究中的应用 | 第19-20页 |
| ·本课题的研究意义 | 第20-21页 |
| 第二章 THAP11 慢病毒系统的建立 | 第21-33页 |
| ·材料与方法 | 第21-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第21页 |
| ·实验相关溶液的配制 | 第21-23页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-27页 |
| ·实验结果 | 第27-32页 |
| ·THAP11 RNAi 慢病毒载体的构建 | 第27-28页 |
| ·THAP11RNAi 慢病毒的包装 | 第28-29页 |
| ·敲低 THAP11 的 K562 细胞稳定株的建立 | 第29-30页 |
| ·敲低 THAP11 的 TF-1 细胞稳定株的建立 | 第30页 |
| ·过表达 THAP11 的 K562 细胞稳定株的建立 | 第30-31页 |
| ·过表达 THAP11 的 TF-1 细胞稳定株的建立 | 第31-32页 |
| ·讨论 | 第32-33页 |
| 第三章 THAP11 在造血细胞分化中的作用 | 第33-62页 |
| ·材料与方法 | 第33-36页 |
| ·诱导剂的配制 | 第33页 |
| ·K562 和 TF-1 细胞及稳定株向红系分化的诱导条件 | 第33-34页 |
| ·K562 细胞及稳定株向巨核系分化的诱导条件 | 第34页 |
| ·脐带血 CD34~+细胞分离 | 第34-35页 |
| ·CD34~+细胞的体外扩增培养和诱导分化培养条件 | 第35页 |
| ·慢病毒感染 CD34~+细胞 | 第35页 |
| ·CD34~+细胞增殖实验 | 第35页 |
| ·CD34~+细胞集落形成实验 | 第35-36页 |
| ·流式细胞仪检测细胞表面标志 | 第36页 |
| ·联苯胺染液和工作液的配制 | 第36页 |
| ·联苯胺染色 | 第36页 |
| ·多倍体样本的制备 | 第36页 |
| ·实验结果 | 第36-58页 |
| ·THAP11 在 CD34~+细胞分化过程中的表达 | 第36-39页 |
| ·THAP11 抑制 hemin 诱导的 K562 细胞向红系分化 | 第39-44页 |
| ·THAP11 抑制 EPO 诱导的 TF-1 细胞向红系分化 | 第44-49页 |
| ·THAP11 促进 PMA 诱导的 K562 细胞向巨核系分化 | 第49-53页 |
| ·THAP11 过表达影响多种转录因子的表达 | 第53-54页 |
| ·THAP11 负调控 CD34~+细胞生长增殖 | 第54-58页 |
| ·讨论 | 第58-62页 |
| 第四章 结论与展望 | 第62-63页 |
| ·结论 | 第62页 |
| ·展望 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 附录 | 第71-74页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
