| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-31页 |
| ·mTOR及其信号通路 | 第13-16页 |
| ·mTOR的结构 | 第14页 |
| ·mTOR复合物 | 第14-15页 |
| ·mTOR信号通路 | 第15-16页 |
| ·FAK及其功能 | 第16-19页 |
| ·FAK的结构特点 | 第17-18页 |
| ·FAK的功能 | 第18页 |
| ·FAK信号通路与细胞调控 | 第18-19页 |
| ·Tuberin及其复合体功能 | 第19-22页 |
| ·TSC1/TSC2的结构特点 | 第20页 |
| ·TSC1(Hamartin)/TSC2(Tuberin)的功能 | 第20-21页 |
| ·TSC2信号通路 | 第21-22页 |
| ·FAK和TSC2(Tuberin)/mTOR的相互关系 | 第22页 |
| 参考文献 | 第22-31页 |
| 第二章 绒山羊胎儿成纤维细胞中FAK基因转录后沉默对mTOR信号通路活性的影响 | 第31-37页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·细胞系 | 第31页 |
| ·菌株和质粒 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-33页 |
| ·绒山羊FAK基因靶向siRNA质粒的构建与提取 | 第32页 |
| ·GFb的培养与目标质粒的转染 | 第32-33页 |
| ·蛋白提取 | 第33页 |
| ·Western blot分析 | 第33页 |
| ·结果 | 第33-35页 |
| ·绒山羊FAK基因靶向siRNA质粒的构建 | 第33-34页 |
| ·FAK靶向siRNA质粒转染GFb | 第34页 |
| ·FAK靶向RNAi对mTOR信号通路活性的影响 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 免疫共沉淀(Co-IP)验证FAK与Tuberin之间的相互关系 | 第37-41页 |
| ·材料 | 第37-38页 |
| ·细胞系 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·方法 | 第38-39页 |
| ·细胞培养 | 第38页 |
| ·蛋白提取 | 第38页 |
| ·免疫共沉淀 | 第38页 |
| ·Western blot分析 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-40页 |
| ·293T总蛋白的免疫共沉淀 | 第39页 |
| ·STO总蛋白的免疫共沉淀 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 酵母双杂交鉴定FAK与Tuberin的相互作用片段 | 第41-61页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·细胞系 | 第41页 |
| ·菌株和质粒 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-49页 |
| ·STO、293T细胞总RNA的提取与cDNA第一链合成 | 第42页 |
| ·FAK、TSC2引物设计与基因克隆 | 第42-45页 |
| ·中间载体的构建 | 第45页 |
| ·诱饵载体、靶载体的构建与提取 | 第45-47页 |
| ·酵母菌种复苏及感受态制备 | 第47-48页 |
| ·感受态酵母的转化 | 第48页 |
| ·酵母菌株阳性菌的PCR鉴定 | 第48页 |
| ·酵母交配及筛选 | 第48-49页 |
| ·结果 | 第49-58页 |
| ·基因克隆结果 | 第49-51页 |
| ·诱饵载体、靶载体构建 | 第51-53页 |
| ·酵母菌株阳性菌的PCR | 第53-55页 |
| ·酵母双杂交两种阳性菌株交配结果 | 第55-56页 |
| ·酵母双杂交筛选及相互作用片段的确定 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第63-65页 |
| 附录 | 第65-67页 |
