摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词(Abbreviation) | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
·蓝细菌及集胞藻PCC6803概述 | 第12-14页 |
·集胞藻PCC6803的遗传操作 | 第14-15页 |
·集胞藻PCC6803基因功能的研究现状 | 第15页 |
·藻胆体 | 第15-17页 |
·藻胆蛋白 | 第17-20页 |
·连接多肽 | 第20-22页 |
·课题的设计及意义 | 第22-24页 |
2 核膜连接蛋白体外分离纯化研究 | 第24-42页 |
·引言 | 第24-25页 |
·材料与方法 | 第25-27页 |
·主要材料 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25-26页 |
·主要仪器 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·色素蛋白大量表达 | 第27页 |
·蛋白镍离子螯合亲和层析纯化 | 第27-28页 |
·蛋白HiPrep DEAE FF 16/10柱层析纯化 | 第28页 |
·蛋白HiPrep 16/60 Sephacryl s-200 HR柱凝胶过滤层析 | 第28-29页 |
·样品浓缩制备 | 第29页 |
·SDS-PAGE和色素蛋白的锌电泳 | 第29页 |
·色素蛋白的光谱分析 | 第29-30页 |
·色素蛋白消光系数、荧光量子产率的计算 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31-40页 |
·镍离子螯合亲和层析纯化 | 第31-32页 |
·离子交换柱HiPrep DEAE FF 16/10柱层析纯化 | 第32-34页 |
·蛋白凝胶过滤层析柱HiPrep 16/60 Sephacryl s-200 HR纯化 | 第34-36页 |
·SDS-PAGE检测纯度和色素蛋白的锌电泳 | 第36-38页 |
·色素蛋白各个步骤的纯度变化 | 第38页 |
·色素蛋白消光系数、荧光量子产率分析 | 第38-40页 |
·分析与讨论 | 第40-42页 |
3 基因缺失体的构建及Δsll0871生理分析 | 第42-66页 |
·引言 | 第42-43页 |
·材料与仪器 | 第43-45页 |
·主要材料 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43-44页 |
·主要仪器 | 第44-45页 |
·实验方法 | 第45-54页 |
·pBlue-target gene-lost-kan的分子克隆 | 第45-49页 |
·构建pBlu-target gene质粒 | 第45-47页 |
·构建pBlu-target gene-lost质粒 | 第47-48页 |
·构建pBlu-target gene-Kan | 第48-49页 |
·转藻及突变体的鉴定检测 | 第49页 |
·从琼脂糖凝胶中回收DNA | 第49-50页 |
·感受态细胞的制备和质粒转化 | 第50页 |
·碱裂解法提取质粒 | 第50-51页 |
·藻种的纯化及纯度鉴定 | 第51页 |
·蓝细菌总DNA的提取 | 第51-52页 |
·藻的培养条件 | 第52页 |
·生长曲线的测定 | 第52页 |
·藻内含物的测定 | 第52-53页 |
·叶绿素a(Chl a)含量的测定 | 第52-53页 |
·藻蓝蛋白C-PC含量测定 | 第53页 |
·室温叶绿素荧光的测定 | 第53-54页 |
·HPLC法分析PQ及MSBQ | 第54页 |
·结果与分析 | 第54-65页 |
·突变体质粒构建检测 | 第54-57页 |
·不同培养条件下Δsll0871与wt间生长曲线的比较 | 第57-59页 |
·藻蓝蛋白(C-PC)含量的测定 | 第59-60页 |
·室温叶绿素荧光的测定 | 第60-61页 |
·S110871体外表达 | 第61-63页 |
·构建pET-sll0871质粒 | 第61-62页 |
·目的基因的表达和纯化 | 第62-63页 |
·HPLC分析PQ及MSBQ | 第63-65页 |
·小结与讨论 | 第65-66页 |
全文总结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-74页 |
致谢 | 第74页 |