摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-10页 |
目录 | 第10-12页 |
符号说明 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-40页 |
·链霉菌简介 | 第14-15页 |
·II 型聚酮合酶及芳香聚酮类抗生素 | 第15-18页 |
·聚环 xanthone 类抗生素研究进展 | 第18-37页 |
·聚环 xanthone 类抗生素简介 | 第18-19页 |
·聚环 xanthone 类抗生素的同位素标记前体喂养实验 | 第19-31页 |
·聚环 xanthone 类抗生素的生物合成基因簇 | 第31-37页 |
·聚环 xanthone 类化合物黄脂菌素的研究进展 | 第37-40页 |
·黄脂菌素的化学结构 | 第37页 |
·黄脂菌素的生物活性 | 第37-38页 |
·黄脂菌素衍生物的生物合成 | 第38-40页 |
第二章 实验材料与方法 | 第40-77页 |
·实验材料 | 第40-61页 |
·实验中使用的菌株 | 第40-42页 |
·实验中使用的质粒 | 第42-51页 |
·实验中使用的引物 | 第51-55页 |
·培养基及化学试剂 | 第55-61页 |
·抗生素使用 | 第61页 |
·实验方法 | 第61-77页 |
·链霉菌培养及菌种保藏 | 第61-62页 |
·DNA 基本操作 | 第62-65页 |
·基因文库构建及阳性克隆的筛选 | 第65页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及 DNA 转化 | 第65-66页 |
·脉冲场电泳 | 第66页 |
·质粒 DNA 从大肠杆菌到灰黄链霉菌的两亲本接合转移 | 第66-67页 |
·链霉菌原生质体制备及 DNA 转化 | 第67页 |
·灰黄链霉菌 SS101 基因敲除 | 第67-68页 |
·蛋白操作 | 第68-73页 |
·灰黄链霉菌液体发酵, 产物的粗提及检测 | 第73-74页 |
·黄脂菌素中间产物的分离纯化及结构鉴定 | 第74-75页 |
·黄脂菌素及其中间产物的生物活性测定 | 第75-76页 |
·生物信息学分析 | 第76-77页 |
第三章 黄脂菌素生物合成基因簇的克隆与鉴定 | 第77-86页 |
·黄脂菌素生物合成基因簇的克隆 | 第77-82页 |
·黄脂菌素生物合成基因簇的鉴定 | 第82-86页 |
第四章 黄脂菌素生物合成基因簇的序列测定与边界确定 | 第86-96页 |
·黄脂菌素生物合成基因簇的序列测定及 ORF 预测 | 第86-91页 |
·黄脂菌素生物合成基因簇的边界确定 | 第91-96页 |
·黄脂菌素生物合成基因簇左边界的确定 | 第91-93页 |
·黄脂菌素生物合成基因簇右边界的确定 | 第93-96页 |
第五章 黄脂菌素生物合成基因 xanA 的功能研究 | 第96-111页 |
·中断 xanA 直接影响黄脂菌素生物合成 | 第96-101页 |
·xanA 回补突变株 ZWK2 恢复其黄脂菌素的产生 | 第101-102页 |
·黄脂菌素中间产物 8a 及 8b 的结构鉴定及 XanA 功能分析 | 第102-111页 |
第六章 黄脂菌素生物合成基因 xanO4 的功能研究 | 第111-143页 |
·研究背景介绍 | 第111-117页 |
·聚环 xanthone 类化合物中 xanthone 结构形成机制研究进展 | 第111-112页 |
·Baeyer-Villiger 单加氧酶 | 第112-117页 |
·xanO4 的体内功能研究 | 第117-129页 |
·xanO4 的生物信息学分析 | 第117-119页 |
·xanO4 缺失突变株的构建及检测 | 第119-121页 |
·xanO4 缺失突变株积累产物的分离纯化及结构鉴定 | 第121-129页 |
·XanO4 的体外功能探索 | 第129-143页 |
·XanO4 的蛋白表征 | 第129-130页 |
·XanO4 的体外功能研究 | 第130-133页 |
·XanO4 催化反应产物的分离及结构鉴定 | 第133-140页 |
·XanO4 功能讨论及其可能的催化机制 | 第140-143页 |
第七章 黄脂菌素生物合成基因 xanO2,xanO5 及 xanT 的功能研究 | 第143-158页 |
·xanO2 的体内功能研究 | 第143-149页 |
·xanO2 的基因置换 | 第143-147页 |
·xanO2 能赋予突变株 ZWK7( xanO2)产生黄脂菌素的能力 | 第147-149页 |
·小结与讨论 | 第149页 |
·xanO5 的体内功能研究 | 第149-154页 |
·xanT 的体内功能研究 | 第154-158页 |
第八章 黄脂菌素及其中间产物的生物活性测定 | 第158-159页 |
第九章 黄脂菌素生物合成途径的推断 | 第159-170页 |
·黄脂菌素生物合成基因簇与 lysolipin 及 FD-594 生物合成基因簇的比较 | 第159-161页 |
·黄脂菌素生物合成途径的推导 | 第161-170页 |
第十章 总结与展望 | 第170-174页 |
·本研究总结与主要创新点 | 第170-172页 |
·研究总结 | 第170-171页 |
·主要创新点 | 第171-172页 |
·研究展望 | 第172-174页 |
参考文献 | 第174-185页 |
攻读学位期间发表学术论文和申请的专利 | 第185-186页 |
致谢 | 第186-190页 |
附件 | 第190页 |