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黄脂菌素生物合成机理研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-10页
目录第10-12页
符号说明第12-14页
第一章 文献综述第14-40页
   ·链霉菌简介第14-15页
   ·II 型聚酮合酶及芳香聚酮类抗生素第15-18页
   ·聚环 xanthone 类抗生素研究进展第18-37页
     ·聚环 xanthone 类抗生素简介第18-19页
     ·聚环 xanthone 类抗生素的同位素标记前体喂养实验第19-31页
     ·聚环 xanthone 类抗生素的生物合成基因簇第31-37页
   ·聚环 xanthone 类化合物黄脂菌素的研究进展第37-40页
     ·黄脂菌素的化学结构第37页
     ·黄脂菌素的生物活性第37-38页
     ·黄脂菌素衍生物的生物合成第38-40页
第二章 实验材料与方法第40-77页
   ·实验材料第40-61页
     ·实验中使用的菌株第40-42页
     ·实验中使用的质粒第42-51页
     ·实验中使用的引物第51-55页
     ·培养基及化学试剂第55-61页
     ·抗生素使用第61页
   ·实验方法第61-77页
     ·链霉菌培养及菌种保藏第61-62页
     ·DNA 基本操作第62-65页
     ·基因文库构建及阳性克隆的筛选第65页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及 DNA 转化第65-66页
     ·脉冲场电泳第66页
     ·质粒 DNA 从大肠杆菌到灰黄链霉菌的两亲本接合转移第66-67页
     ·链霉菌原生质体制备及 DNA 转化第67页
     ·灰黄链霉菌 SS101 基因敲除第67-68页
     ·蛋白操作第68-73页
     ·灰黄链霉菌液体发酵, 产物的粗提及检测第73-74页
     ·黄脂菌素中间产物的分离纯化及结构鉴定第74-75页
     ·黄脂菌素及其中间产物的生物活性测定第75-76页
     ·生物信息学分析第76-77页
第三章 黄脂菌素生物合成基因簇的克隆与鉴定第77-86页
   ·黄脂菌素生物合成基因簇的克隆第77-82页
   ·黄脂菌素生物合成基因簇的鉴定第82-86页
第四章 黄脂菌素生物合成基因簇的序列测定与边界确定第86-96页
   ·黄脂菌素生物合成基因簇的序列测定及 ORF 预测第86-91页
   ·黄脂菌素生物合成基因簇的边界确定第91-96页
     ·黄脂菌素生物合成基因簇左边界的确定第91-93页
     ·黄脂菌素生物合成基因簇右边界的确定第93-96页
第五章 黄脂菌素生物合成基因 xanA 的功能研究第96-111页
   ·中断 xanA 直接影响黄脂菌素生物合成第96-101页
   ·xanA 回补突变株 ZWK2 恢复其黄脂菌素的产生第101-102页
   ·黄脂菌素中间产物 8a 及 8b 的结构鉴定及 XanA 功能分析第102-111页
第六章 黄脂菌素生物合成基因 xanO4 的功能研究第111-143页
   ·研究背景介绍第111-117页
     ·聚环 xanthone 类化合物中 xanthone 结构形成机制研究进展第111-112页
     ·Baeyer-Villiger 单加氧酶第112-117页
   ·xanO4 的体内功能研究第117-129页
     ·xanO4 的生物信息学分析第117-119页
     ·xanO4 缺失突变株的构建及检测第119-121页
     ·xanO4 缺失突变株积累产物的分离纯化及结构鉴定第121-129页
   ·XanO4 的体外功能探索第129-143页
     ·XanO4 的蛋白表征第129-130页
     ·XanO4 的体外功能研究第130-133页
     ·XanO4 催化反应产物的分离及结构鉴定第133-140页
     ·XanO4 功能讨论及其可能的催化机制第140-143页
第七章 黄脂菌素生物合成基因 xanO2,xanO5 及 xanT 的功能研究第143-158页
   ·xanO2 的体内功能研究第143-149页
     ·xanO2 的基因置换第143-147页
     ·xanO2 能赋予突变株 ZWK7( xanO2)产生黄脂菌素的能力第147-149页
     ·小结与讨论第149页
   ·xanO5 的体内功能研究第149-154页
   ·xanT 的体内功能研究第154-158页
第八章 黄脂菌素及其中间产物的生物活性测定第158-159页
第九章 黄脂菌素生物合成途径的推断第159-170页
   ·黄脂菌素生物合成基因簇与 lysolipin 及 FD-594 生物合成基因簇的比较第159-161页
   ·黄脂菌素生物合成途径的推导第161-170页
第十章 总结与展望第170-174页
   ·本研究总结与主要创新点第170-172页
     ·研究总结第170-171页
     ·主要创新点第171-172页
   ·研究展望第172-174页
参考文献第174-185页
攻读学位期间发表学术论文和申请的专利第185-186页
致谢第186-190页
附件第190页

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