| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 中英文对照 | 第12-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 第一章 netrin-1与VEGF在糖尿病视网膜病变患者玻璃体腔内表达水平变化及关系 | 第15-27页 |
| ·材料和方法 | 第15-18页 |
| ·实验材料 | 第15页 |
| ·研究对象 | 第15-16页 |
| ·研究方法 | 第16-18页 |
| ·实验结果 | 第18-21页 |
| ·netrin-1在PDR患者玻璃体腔及血清内的表达变化 | 第18-19页 |
| ·VEGF在PDR患者玻璃体腔及血清内的表达变化 | 第19-20页 |
| ·VEGF和netrin-1在PDR患者玻璃体腔内表达变化的关系 | 第20-21页 |
| ·讨论 | 第21-26页 |
| ·糖尿病视网膜病变与视网膜新生血管 | 第21-22页 |
| ·VEGF与新生血管的关系 | 第22-24页 |
| ·netrin-1与新生血管的关系 | 第24-25页 |
| ·Netrin-1与VEGF相关性分析的意义 | 第25-26页 |
| ·小结 | 第26-27页 |
| 第二章 慢病毒介导的靶向netrin-1的小发夹状RNA的构建及筛选 | 第27-50页 |
| ·RNAi慢病毒载体的制备 | 第27-34页 |
| ·实验流程 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·双链DNA Oligo制备 | 第30页 |
| ·克隆制备与鉴定 | 第30-34页 |
| ·RNAi慢病毒包装与滴度检测 | 第34-38页 |
| ·实验流程 | 第34-35页 |
| ·实验材料 | 第35-36页 |
| ·Lentivirus病毒包装 | 第36页 |
| ·病毒的收获及浓缩 | 第36-37页 |
| ·Lentivirus滴度测定 | 第37-38页 |
| ·慢病毒介导的netrin-1 shRNA的体外转染效率检测 | 第38-44页 |
| ·实验流程 | 第38页 |
| ·实验材料 | 第38-39页 |
| ·实验仪器 | 第39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·实验结果 | 第42-44页 |
| ·讨论 | 第44-49页 |
| ·RNA干扰与慢病毒的应用 | 第44-46页 |
| ·shRNA干扰的作用机制 | 第46-47页 |
| ·血管内皮细胞的特性 | 第47-48页 |
| ·慢病毒介导的netrin-1shRNA体外转染抑制netrin-1的表达 | 第48-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第三章 慢病毒介导靶向netrin-1的小发夹状RNA抑制视网膜新生血管形成的研究 | 第50-66页 |
| ·材料与方法 | 第50-57页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·实验主要仪器 | 第50-51页 |
| ·实验方法 | 第51-57页 |
| ·结果 | 第57-61页 |
| ·OIR模型小鼠视网膜中netrin-1的mRNA及蛋白表达变化 | 第57-59页 |
| ·慢病毒介导的靶向netrin-1的shRNA对视网膜netrin-1表达的抑制 | 第59页 |
| ·视网膜铺片观察视网膜血管形态 | 第59-60页 |
| ·突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核计数 | 第60-61页 |
| ·讨论 | 第61-65页 |
| ·OIR小鼠模型的建立及netrin-1在OIR小鼠视网膜中表达变化 | 第61-62页 |
| ·玻璃体腔内注射慢病毒介导的RNAi转染的意义 | 第62-63页 |
| ·慢病毒介导的靶向netrin-1的shRNA对小鼠视网膜新生血管的抑制作用 | 第63-64页 |
| ·靶向netrin-1的RNAi在抗新生血管治疗中的展望 | 第64-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 综述 | 第74-82页 |
| 参考文献 | 第80-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 攻读博士期间发表的文章 | 第83页 |
