| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-27页 |
| ·普通菜豆国内外研究进展 | 第14-17页 |
| ·普通菜豆的起源 | 第14-15页 |
| ·普通菜豆基因组学研究进展 | 第15-16页 |
| ·中国普通菜豆的研究状况 | 第16-17页 |
| ·植物抗逆基因工程研究进展 | 第17-20页 |
| ·干旱和盐渍对农业生产的危害及应对策略 | 第17页 |
| ·植物抗逆的分子反应机制 | 第17-19页 |
| ·植物抗逆相关基因克隆研究进展 | 第19-20页 |
| ·植物转抗逆相关基因研究进展 | 第20页 |
| ·脯氨酸代谢的作用及基因工程研究进展 | 第20-25页 |
| ·脯氨酸代谢的生化途径 | 第20-21页 |
| ·逆境胁迫下植物脯氨酸积累的生物学意义 | 第21-23页 |
| ·脯氨酸合成酶基因研究进展 | 第23-24页 |
| ·转脯氨酸合成酶基因植物研究进展 | 第24-25页 |
| ·单核苷酸多态性研究进展 | 第25页 |
| ·本研究的目的意义和技术路线 | 第25-27页 |
| ·目的意义 | 第25-26页 |
| ·技术路线 | 第26-27页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第27-40页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·植物材料 | 第27页 |
| ·载体与菌株 | 第27页 |
| ·酶及其它试剂耗材 | 第27页 |
| ·试剂盒 | 第27页 |
| ·实验方法 | 第27-38页 |
| ·引物设计 | 第27-28页 |
| ·普通菜豆幼苗的培养 | 第28页 |
| ·普通菜豆材料总RNA的提取 | 第28-29页 |
| ·反转录 | 第29页 |
| ·RT-PCR 扩增PvP5CS1 cDNA 序列 | 第29页 |
| ·PCR 产物的回收与纯化 | 第29-30页 |
| ·JM109 感受态的制备 | 第30页 |
| ·PCR 产物的连接与转化 | 第30页 |
| ·质粒提取 | 第30页 |
| ·测序 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR 扩增PvP5CS2 cDNA 序列 | 第31页 |
| ·3'-RACE 扩增PvP5CS2 3'cDNA 序列 | 第31页 |
| ·实时定量PCR | 第31页 |
| ·普通菜豆叶片和根中脯氨酸含量的测定 | 第31-32页 |
| ·拟南芥在1×MS 固体培养基上的培养 | 第32-33页 |
| ·拟南芥在营养土上的培养 | 第33页 |
| ·拟南芥表达载体pCHF3-35S-PvP5CS1的构建 | 第33页 |
| ·pCHF3-35S-PvP5CS1质粒电击转化农杆菌 | 第33-34页 |
| ·PvP5CS1 转化拟南芥 | 第34页 |
| ·烟草病毒表达载体pCAPE2-PvP5CS2 的构建 | 第34页 |
| ·农杆菌电击转化 | 第34-35页 |
| ·烟草的转化 | 第35页 |
| ·瞬时表达载体构建 | 第35-36页 |
| ·基因枪轰击洋葱表皮 | 第36页 |
| ·普通菜豆DNA提取 | 第36-37页 |
| ·PvP5CS2 基因组序列的扩增 | 第37页 |
| ·质粒大量提取 | 第37-38页 |
| ·普通菜豆抗旱性鉴定方法 | 第38页 |
| ·数据统计分析 | 第38-40页 |
| ·数据统计 | 第38页 |
| ·序列分析 | 第38页 |
| ·中性检验 | 第38页 |
| ·系统进化树构建 | 第38-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-77页 |
| ·普通菜豆PvP5CS1 的克隆 | 第40-47页 |
| ·PvP5CS1 全长cDNA 序列的克隆 | 第40页 |
| ·PvP5CS2 全长cDNA 序列的克隆 | 第40-43页 |
| ·PvP5CS1 和PvP5CS2 与其它植物P5CS 同源性分析 | 第43-45页 |
| ·PvP5CS1 和PvP5CS2 蛋白质结构比较 | 第45-47页 |
| ·PvP5CS1 和PvP5CS2 对逆境胁迫的应答 | 第47-52页 |
| ·普通菜豆Actin 的克隆 | 第48页 |
| ·逆境胁迫下普通菜豆幼苗表型变化 | 第48-49页 |
| ·叶片中PvP5CS1 和PvP5CS2 对干旱胁迫的应答与脯氨酸积累 | 第49页 |
| ·叶片中PvP5CS1 和PvP5CS2 对盐胁迫的应答与脯氨酸积累 | 第49-50页 |
| ·根中PvP5CS1 和PvP5CS2 对盐胁迫的应答与脯氨酸积累 | 第50-51页 |
| ·叶片中PvP5CS1 和PvP5CS2 对冷胁迫的应答与脯氨酸积累 | 第51-52页 |
| ·根中PvP5CS1 和PvP5CS2 对冷胁迫的应答与脯氨酸积累 | 第52页 |
| ·转PvP5CS1 拟南芥对渗透胁迫的反应 | 第52-63页 |
| ·拟南芥pCHF3-PvP5CS1 表达载体 | 第52-53页 |
| ·转基因拟南芥阳性植株的鉴定及纯系获得 | 第53-55页 |
| ·转基因拟南芥种子在渗透胁迫下的发芽率 | 第55-56页 |
| ·转基因拟南芥幼苗耐渗透性 | 第56-60页 |
| ·转基因拟南芥株系耐盐性 | 第60-62页 |
| ·转基因拟南芥株系的抗旱性鉴定 | 第62-63页 |
| ·转PvP5CS2烟草抗旱性鉴定 | 第63-66页 |
| ·转PvP5CS2 烟草表达载体构建 | 第63页 |
| ·转GFP 植株荧光检测 | 第63-64页 |
| ·转PvP5CS2 植株的分子检测 | 第64页 |
| ·转基因烟草抗旱性 | 第64-66页 |
| ·PvP5CS1 和 PvP5CS2 亚细胞定位 | 第66-67页 |
| ·PvP5CS2 的单核苷酸多态性 | 第67-77页 |
| ·PvP5CS1 和PvP5CS2 cDNA 序列的单核苷酸多态性 | 第67页 |
| ·PvP5CS2 基因组序列的扩增 | 第67-68页 |
| ·PvP5CS2 单核苷酸多态性分布 | 第68-69页 |
| ·PvP5CS2 的单核苷酸多态性与普通菜豆抗旱性的关系 | 第69-70页 |
| ·PvP5CS2 的单核苷酸多态性与普通菜豆进化的关系 | 第70-71页 |
| ·PvP5CS2 的核苷酸多样性与中性检验 | 第71-73页 |
| ·PvP5CS2 的非同义替代和同义替代比 | 第73-74页 |
| ·PvP5CS2 的连锁不平衡分析 | 第74页 |
| ·PvP5CS2 分子标记开发 | 第74-76页 |
| ·PvP5CS2 在染色体上的精确定位 | 第76-77页 |
| 第四章 讨论 | 第77-83页 |
| ·高等植物P5CS 基因序列的相似性 | 第77-78页 |
| ·高等植物P5CS 对逆境胁迫的应答 | 第78-79页 |
| ·转P5CS 植物对渗透胁迫的反应 | 第79-81页 |
| ·PvP5CS2 的单核苷酸多态性与普通菜豆的抗旱性 | 第81页 |
| ·PvP5CS2 的单核苷酸多态性与自然选择 | 第81-83页 |
| 第五章 全文结论 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-96页 |
| 附录 | 第96-110页 |
| 附录 1 Pv97 在 221 份普通菜豆材料中的多态性 | 第96-102页 |
| 附录2 普通菜豆Actin 基因 | 第102-103页 |
| 附录3 DOR364 和G19833 PvP5CS2 基因组序列比对 | 第103-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 作者简历 | 第111页 |
