| 英文缩略词 | 第1-9页 |
| 第一部分:新型紫杉烷类化合物Lx2-32c的抗肿瘤作用及机制研究 | 第9-70页 |
| 中文摘要 | 第10-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 实验材料 | 第18-21页 |
| 实验方法 | 第21-29页 |
| 1.细胞培养及形态观察 | 第21页 |
| 2.MTT法测定Lx2-32c对肿瘤细胞存活率的影响 | 第21页 |
| 3.SRB法测定Lx2-32c对肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第21-22页 |
| 4.克隆原形成试验测定Lx2-32c对肿瘤细胞集落形成的影响 | 第22页 |
| 5.Lx2-32c对小鼠Lewis肺癌的生长抑制作用 | 第22-23页 |
| 6.Lx2-32c对人体肿瘤细胞裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用 | 第23页 |
| 7.流式细胞术分析Lx2-32c对肿瘤细胞周期分别的影响 | 第23-24页 |
| 8.循环离心法提取微管蛋白 | 第24页 |
| 9.比浊法测定Lx2-32c对微管聚合动力学的影响 | 第24页 |
| 10.使用荧光探针测定Lx2-32c对微管蛋白动力学的影响 | 第24-25页 |
| 11.间接免疫荧光法测定Lx2-32c对细胞内微管的影响 | 第25-27页 |
| 12.Western Blot法分析Lx2-32c对细胞内微管蛋白聚合的影响 | 第27页 |
| 13.Hoechst 33258染色荧光显微镜观察Lx2-32c对细胞凋亡的影响 | 第27页 |
| 14.Western Blot法分析Lx2-32c对细胞内凋亡相关蛋白表达的影响 | 第27-28页 |
| 15.竞争法检测Lx2-32c在微管蛋白的结合位点 | 第28-29页 |
| 实验结果 | 第29-59页 |
| 1.Lx2-32c对人胃癌细胞BGC-823形态的影响 | 第29-30页 |
| 2.Lx2-32c对多种不同组织来源肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第30-33页 |
| ·MTT法测定Lxz-32c对肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第30-31页 |
| ·SRB法测定Lx2-32c对四种肿瘤细胞的生长抑制作用 | 第31页 |
| ·集落形成试验测定Lx2-32c对四种肿瘤细胞集落形成的抑制作用 | 第31-33页 |
| 3.Lx2-32c对小鼠Lewis肺癌同种移植瘤生长的抑制作用 | 第33-34页 |
| 4.Lx2-32c对裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用 | 第34-41页 |
| ·对人胃癌BGC-823裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用 | 第34-37页 |
| ·对人肺腺癌A549裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用 | 第37-39页 |
| ·对人卵巢癌A2780裸鼠异体移植瘤的生长抑制作用 | 第39-41页 |
| 5.Lx2-32c对肿瘤细胞周期的影响 | 第41-46页 |
| ·流式细胞术检测Lx2-32c对不同组织来源肿瘤细胞周期的影响 | 第41-44页 |
| ·荧光显微镜观察Lx2-32c对肿瘤细胞周期的影响 | 第44-46页 |
| 6.Lx2-32c对纯化微管蛋白体外动力学的影响 | 第46-49页 |
| ·犬脑组织粗提微管蛋白的鉴定 | 第46页 |
| ·比浊法检测Lx2-32c对微管蛋白动力学的影响 | 第46-48页 |
| ·应用荧光探针技术研究Lx2-32c对微管蛋白动力学的影响 | 第48-49页 |
| 7.Lx2-32c对细胞内微管动力学的影响 | 第49-55页 |
| ·间接免疫荧光法观察Lx2-32c对肿瘤细胞内微管的影响 | 第49-53页 |
| ·Western blot法检测Lx2-32c对肿瘤细胞内微管动态平衡的影响 | 第53-55页 |
| 8.Lx2-32c对A549细胞凋亡的影响 | 第55-57页 |
| ·Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡 | 第55-56页 |
| ·Western Blot法分析Lx2-32c对凋亡相关蛋白表达的影响 | 第56-57页 |
| 9.Lx2-32c在微管蛋白结合位点的确定 | 第57-59页 |
| 讨论 | 第59-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 第二部分:肺腺癌A549/Paclitaxel耐药株的鉴定及其耐药机制研究 | 第70-102页 |
| 中文摘要 | 第71-72页 |
| 英文摘要 | 第72-74页 |
| 前言 | 第74-76页 |
| 实验材料 | 第76-78页 |
| 实验方法 | 第78-84页 |
| 1.细胞培养及形态观察 | 第78页 |
| 2.MTT法测定肿瘤细胞对多种细胞毒类化合物的敏感性 | 第78页 |
| 3.克隆原形成试验比较亲本株与耐药株肿瘤细胞的集落形成能力 | 第78-79页 |
| 4.两株细胞生长曲线的比较 | 第79页 |
| 5.流式细胞术分析亲代细胞与耐药株细胞的周期分布 | 第79页 |
| 6.间接免疫荧光法观察亲本株与耐药株细胞内的微管蛋白 | 第79-80页 |
| 7.RT-PCR法分析药泵基因的表达 | 第80-82页 |
| 8.间接免疫荧光法观察细胞内P-gp的表达 | 第82页 |
| 9.Western Blot法分析两株细胞P-gp、p-EGFR及p-AKT蛋白的表达 | 第82页 |
| 10.Rhodamine123蓄积试验 | 第82-83页 |
| 11.HPLC测定胞内Paclitaxel的剩余浓度 | 第83页 |
| 12.药泵抑制剂Verapamil对A549/Paclitaxel细胞耐药性的逆转作用 | 第83-84页 |
| 实验结果 | 第84-95页 |
| 1.A549/Paclitaxel细胞对多种细胞毒类化合物的多药耐药性 | 第84页 |
| 2.A549/Paclitaxel细胞的基本生物学性状 | 第84-87页 |
| ·形态学观察 | 第84-85页 |
| ·集落形成率 | 第85-86页 |
| ·生长曲线 | 第86页 |
| ·细胞周期分布 | 第86-87页 |
| 3.A549/Paclitaxel细胞内微管的存在状态 | 第87-88页 |
| 4.A549/Paclitaxel细胞耐药基因及耐药蛋白表达的检测 | 第88-90页 |
| ·RT-PCR法检测细胞MDR-1和MRP mRNA的表达 | 第88页 |
| ·间接免疫荧光检测细胞P-gp的表达 | 第88-89页 |
| ·Western blot法检测细胞膜P-gp的表达 | 第89-90页 |
| 5.A549/Paclitaxel细胞膜转运蛋白功能的检测 | 第90-93页 |
| ·A549/Paclitaxel细胞Rhodamine123蓄积能力降低 | 第90-91页 |
| ·A549/Paclitaxel细胞对Flutax-1外排功能增强 | 第91-92页 |
| ·A549/Paclitaxel细胞内Paclitaxel的残余量降低 | 第92-93页 |
| 6.Verapamil逆转A549/Paclitaxel细胞的耐药性 | 第93-94页 |
| 7.A549/Paclitaxel细胞内p-EGFR及p-AKT的表达水平增高 | 第94-95页 |
| 讨论 | 第95-98页 |
| 结论 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-102页 |
| 论文综述:紫杉烷类化合物研究现状 | 第102-116页 |
| 附录 | 第116-119页 |
| 致谢 | 第119-122页 |
| 个人简历 | 第122-124页 |
| 附件1 | 第124-125页 |
| 附件2 | 第125-126页 |
| 附件3 | 第126-127页 |
| 附件4 | 第127-135页 |
