摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 前言 | 第11-26页 |
1 植物对昆虫的防御机制 | 第12-18页 |
·植物对昆虫的直接防御反应 | 第12-17页 |
·植物对昆虫的间接防御反应 | 第17页 |
·耐受性 | 第17-18页 |
2 植物与昆虫互作的分子机理 | 第18-19页 |
·植物对咀嚼式昆虫的反应 | 第18-19页 |
·植物对刺吸式昆虫的反应 | 第19页 |
3 常见功能基因组研究方法 | 第19-24页 |
·cDNA芯片技术 | 第20-21页 |
·基因表达系列分析 | 第21-22页 |
·差异显示PCR | 第22页 |
·抑制消减杂交 | 第22-23页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第23-24页 |
4 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第二章 水稻应答稻纵卷叶螟取食的cDNA-AFLP分析 | 第26-46页 |
1 材料与方法 | 第26-32页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·试验方法 | 第27-32页 |
2 结果与分析 | 第32-38页 |
·水稻受稻纵卷叶螟取食后叶片总RNA提取 | 第33页 |
·RNA反转录为cDNA | 第33页 |
·PCR预扩增 | 第33-34页 |
·聚丙烯酰胺凝胶差异TDFs的选取 | 第34-36页 |
·TDF序列的查询分析 | 第36-37页 |
·测序结果数据库比对分析 | 第37页 |
·代谢途径的KEGG分析 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-46页 |
第三章 水稻叶片抑制消减文库的构建 | 第46-64页 |
1 材料与方法 | 第46-54页 |
·试验材料 | 第46页 |
·试验方法 | 第46-54页 |
2 结果与分析 | 第54-63页 |
·mRNA质量检测 | 第54页 |
·RSa I酶切检测 | 第54页 |
·差减杂交及抑制PCR | 第54-55页 |
·抑制消减cDNA文库的构建 | 第55页 |
·插入cDNA片段的PCR鉴定 | 第55-56页 |
·cDNA片段的序列测定及同源性比对 | 第56-58页 |
·Gene ontology分析测序结果 | 第58-61页 |
·KEGG数据库分析差异基因的代谢途径 | 第61-62页 |
·差减文库与cDNA-AFLP结果比较 | 第62-63页 |
3 讨论 | 第63-64页 |
第四章 部分候选基因荧光定量PCR检测 | 第64-72页 |
1 材料与方法 | 第64-66页 |
·试验材料 | 第64页 |
·试验方法 | 第64-66页 |
2 结果与分析 | 第66-69页 |
·UBQ5基因与各候选基因荧光定量PCR条件优化 | 第66页 |
·标准曲线的建立 | 第66-67页 |
·各候选基因相对表达量分析 | 第67-69页 |
3. 讨论 | 第69-72页 |
第五章 候选基因的载体构建 | 第72-85页 |
1 材料与方法 | 第72-80页 |
·试验材料 | 第72-73页 |
·试验方法 | 第73-80页 |
2 结果与分析 | 第80-83页 |
·两步法PCR扩增目的基因 | 第80页 |
·pDONR207-518的PCR检测 | 第80-81页 |
·pMDC32-518的PCR检测 | 第81-82页 |
·pMDC32-X-518基因测序 | 第82-83页 |
3 讨论 | 第83-85页 |
总结 | 第85-87页 |
1 获得水稻应答稻纵卷叶螟取食和MeJA处理的转录谱 | 第85页 |
2 构建了水稻响应稻纵卷叶螟取食的抑制消减文库 | 第85-86页 |
3 应用荧光定量技术对4个候选基因进行检测 | 第86页 |
4 构建候选基因的Gateway入门克隆和表达载体 | 第86页 |
5 展望 | 第86-87页 |
参考文献 | 第87-99页 |
附录 | 第99-142页 |
附录1 缩略词及英汉对照 | 第99-100页 |
附录2 cDNA-AFLP分析中差异TDFs特征变化 | 第100-116页 |
附录3 cDNA-AFLP分析中差异TDFs的基因分子功能注释 | 第116-133页 |
附录4 cDNA-AFLP接头和引物 | 第133-135页 |
附录5 荧光定量表达分析实验图谱 | 第135-138页 |
附录6 主要仪器及试剂 | 第138-142页 |
主要仪器 | 第138-139页 |
主要试剂 | 第139页 |
主要试剂及缓冲液配制 | 第139-142页 |
博士就读期间发表论文情况 | 第142-143页 |
致谢 | 第143-144页 |