摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
1 引言 | 第11-22页 |
·寄主植物与病原真菌的互作 | 第11-15页 |
·稻瘟病与稻瘟病菌 | 第11-12页 |
·抗病基因与无毒基因及其互作 | 第12-13页 |
·系统获得性抗性 | 第13-15页 |
·分泌蛋白与信号传导 | 第15-16页 |
·分泌蛋白与信号肽 | 第15-16页 |
·稻瘟病菌分泌蛋白 | 第16页 |
·稻瘟病菌分泌蛋白功能预测 | 第16页 |
·几丁质结合蛋白(CBP) | 第16-21页 |
·CBP的分布 | 第17页 |
·CBP的结构及特点 | 第17-18页 |
·CBP中几丁质酶、凝集素和溶菌酶的关系 | 第18页 |
·CBP的诱导及功能 | 第18-20页 |
·植物中几丁质结合蛋白 | 第20页 |
·稻瘟病菌几丁质结合蛋白 | 第20-21页 |
·本研究的目的、内容和意义 | 第21-22页 |
2 稻瘟病菌几丁质结合蛋白家族生物信息学分析 | 第22-31页 |
·本研究相关的生物信息学数据库及软件 | 第22-24页 |
·稻瘟病菌全基因组数据库 | 第22页 |
·Pfam(Protein Families Database,蛋白家族数据库) | 第22页 |
·美国国立生物技术中心(NCBI) | 第22-23页 |
·常用的几种生物信息学软件 | 第23-24页 |
·稻瘟病菌几丁质结合蛋白基因预测 | 第24-30页 |
·几丁质结合蛋白序列的获得 | 第24-26页 |
·几丁质结合蛋白基因的功能域分析 | 第26-28页 |
·稻瘟病菌中几丁质结合蛋白基因在基因组中分布、序列对比与系统演化关系分析 | 第28-30页 |
·讨论 | 第30-31页 |
3 稻瘟病菌几丁质结合蛋白基因(MGG_00227.5)的功能分析 | 第31-51页 |
·材料与方法 | 第31-39页 |
·供试菌株 | 第31页 |
·供试质粒 | 第31页 |
·供试植物 | 第31页 |
·试剂 | 第31-32页 |
·培养基 | 第32-33页 |
·E.coli DH5α感受态细胞的制备 | 第33页 |
·感受态细胞的转化 | 第33-34页 |
·质粒DNA的提取 | 第34页 |
·质粒酶切与连接 | 第34-35页 |
·稻瘟病菌原生质体的制备 | 第35页 |
·稻瘟病菌原生质体转化和转化子的验证 | 第35-36页 |
·稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第36-37页 |
·DNA琼脂糖电泳 | 第37页 |
·PCR反应验证 | 第37-38页 |
·稻瘟病菌总RNA的提取与分析 | 第38页 |
·RT-PCR | 第38-39页 |
·敲除载体的构建 | 第39-41页 |
·引物设计 | 第39-40页 |
·敲除载体构建 | 第40-41页 |
·敲除转化子验证及鉴定 | 第41页 |
·稻瘟病菌的表型观察 | 第41-43页 |
·生长速率测定与菌落颜色 | 第41页 |
·产孢量测定 | 第41页 |
·孢子萌发率的测定 | 第41页 |
·附着胞形成率的测定及洋葱表皮侵入实验 | 第41-42页 |
·对植物致病性的测定 | 第42-43页 |
·结果与分析 | 第43-49页 |
·MGG_03784.5基因敲除载体的构建 | 第43页 |
·MGG_03784.5基因功能缺失突变体的筛选 | 第43-44页 |
·MGG_00227.5基因敲除载体的构建 | 第44页 |
·MGG_00227.5基因敲除转化子的筛选与鉴定 | 第44-45页 |
·MGG_00227.5基因敲除突变体的表型分析 | 第45-49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
致谢 | 第58页 |