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稻瘟病菌几丁质结合蛋白基因的功能研究

摘要第1-10页
英文摘要第10-11页
1 引言第11-22页
   ·寄主植物与病原真菌的互作第11-15页
     ·稻瘟病与稻瘟病菌第11-12页
     ·抗病基因与无毒基因及其互作第12-13页
     ·系统获得性抗性第13-15页
   ·分泌蛋白与信号传导第15-16页
     ·分泌蛋白与信号肽第15-16页
     ·稻瘟病菌分泌蛋白第16页
     ·稻瘟病菌分泌蛋白功能预测第16页
   ·几丁质结合蛋白(CBP)第16-21页
     ·CBP的分布第17页
     ·CBP的结构及特点第17-18页
     ·CBP中几丁质酶、凝集素和溶菌酶的关系第18页
     ·CBP的诱导及功能第18-20页
     ·植物中几丁质结合蛋白第20页
     ·稻瘟病菌几丁质结合蛋白第20-21页
   ·本研究的目的、内容和意义第21-22页
2 稻瘟病菌几丁质结合蛋白家族生物信息学分析第22-31页
   ·本研究相关的生物信息学数据库及软件第22-24页
     ·稻瘟病菌全基因组数据库第22页
     ·Pfam(Protein Families Database,蛋白家族数据库)第22页
     ·美国国立生物技术中心(NCBI)第22-23页
     ·常用的几种生物信息学软件第23-24页
   ·稻瘟病菌几丁质结合蛋白基因预测第24-30页
     ·几丁质结合蛋白序列的获得第24-26页
     ·几丁质结合蛋白基因的功能域分析第26-28页
     ·稻瘟病菌中几丁质结合蛋白基因在基因组中分布、序列对比与系统演化关系分析第28-30页
   ·讨论第30-31页
3 稻瘟病菌几丁质结合蛋白基因(MGG_00227.5)的功能分析第31-51页
   ·材料与方法第31-39页
     ·供试菌株第31页
     ·供试质粒第31页
     ·供试植物第31页
     ·试剂第31-32页
     ·培养基第32-33页
     ·E.coli DH5α感受态细胞的制备第33页
     ·感受态细胞的转化第33-34页
     ·质粒DNA的提取第34页
     ·质粒酶切与连接第34-35页
     ·稻瘟病菌原生质体的制备第35页
     ·稻瘟病菌原生质体转化和转化子的验证第35-36页
     ·稻瘟病菌基因组DNA的提取第36-37页
     ·DNA琼脂糖电泳第37页
     ·PCR反应验证第37-38页
     ·稻瘟病菌总RNA的提取与分析第38页
     ·RT-PCR第38-39页
   ·敲除载体的构建第39-41页
     ·引物设计第39-40页
     ·敲除载体构建第40-41页
     ·敲除转化子验证及鉴定第41页
   ·稻瘟病菌的表型观察第41-43页
     ·生长速率测定与菌落颜色第41页
     ·产孢量测定第41页
     ·孢子萌发率的测定第41页
     ·附着胞形成率的测定及洋葱表皮侵入实验第41-42页
     ·对植物致病性的测定第42-43页
   ·结果与分析第43-49页
     ·MGG_03784.5基因敲除载体的构建第43页
     ·MGG_03784.5基因功能缺失突变体的筛选第43-44页
     ·MGG_00227.5基因敲除载体的构建第44页
     ·MGG_00227.5基因敲除转化子的筛选与鉴定第44-45页
     ·MGG_00227.5基因敲除突变体的表型分析第45-49页
   ·讨论第49-51页
参考文献第51-58页
致谢第58页

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