摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 杆状病毒诱导的细胞凋亡及 RNAi 技术(文献综述) | 第16-39页 |
·核多角体病毒 | 第16-17页 |
·杆状病毒感染与宿主的关系 | 第17页 |
·杆状病毒宿主专一性 | 第17-21页 |
·细胞凋亡概念及其形态学特征 | 第21页 |
·细胞凋亡与细胞坏死区别 | 第21-22页 |
·细胞凋亡的分子机制 | 第22-24页 |
·杆状病毒感染引起的细胞凋亡研究 | 第24-26页 |
·抗凋亡基因 | 第26-34页 |
·p35基因 | 第26-27页 |
·p49基因 | 第27-29页 |
·iap 基因 | 第29-34页 |
·RNAi 技术 | 第34-39页 |
·RNAi 的发现与发展 | 第34-35页 |
·RNAi 作用机制 | 第35页 |
·RNAi 机制中的主要成员 | 第35-36页 |
·用RNAi 方法研究特定基因功能的技术路线 | 第36-39页 |
第二章 Splt-iap4 和 Splt-p49 基因转录和翻译研究 | 第39-52页 |
·材料与方法 | 第39-47页 |
·材料 | 第39-43页 |
·方法 | 第43-47页 |
·结果与分析 | 第47-49页 |
·Splt-iap4转录时相 | 第47页 |
·Splt-p49转录时相 | 第47-48页 |
·Splt-iap4表达时相 | 第48-49页 |
·Splt-p49表达时相 | 第49页 |
·讨论 | 第49-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
第三章 应用RNAi技术研究Splt-iap4和Splt-p49基因功能 | 第52-73页 |
·材料与方法 | 第52-60页 |
·材料 | 第52-55页 |
·方法 | 第55-60页 |
·结果 | 第60-70页 |
·Splt-iap4和Splt-p49基因的PCR扩增结果 | 第60页 |
·对照cat基因的PCR扩增结果 | 第60-61页 |
·重组质粒p28i-p49和p28i-iap的酶切鉴定 | 第61-62页 |
·重组质粒p28i-cat的酶切鉴定 | 第62页 |
·Splt-P49和Splt-IAP4凋亡功能检测 | 第62-64页 |
·Splt-IAP4蛋白没有协同抗凋亡作用 | 第64-65页 |
·Splt-IAP4对细胞有聚集作用 | 第65-66页 |
·Splt-iap4 dsRNA处理对产生感染性病毒粒子的影响 | 第66-67页 |
·RNAi对SpltNPV感染SpLi-221细胞的影响 | 第67-70页 |
·讨论 | 第70-72页 |
·小结 | 第72-73页 |
第四章 Splt- iap4 和 Splt-p49 瞬时表达及抗细胞凋亡活性研究 | 第73-82页 |
·材料与方法 | 第73-76页 |
·材料 | 第73-74页 |
·方法 | 第74-76页 |
·结果与分析 | 第76-80页 |
·瞬时表达载体的构建 | 第76-78页 |
·瞬时表达蛋白检测 | 第78-79页 |
·Splt-Iap4和Splt-P49抗凋亡活性检测 | 第79-80页 |
·讨论 | 第80-81页 |
·小结 | 第81-82页 |
第五章 杆状病毒与抗凋亡基因的进化关系研究 | 第82-96页 |
·材料与方法 | 第82-83页 |
·材料 | 第82页 |
·方法 | 第82-83页 |
·结果与分析 | 第83-93页 |
·43株杆状病毒全基因组特征 | 第83-85页 |
·43株杆状病毒全基因组中的抗凋亡基因 | 第85-88页 |
·iap的序列比对和进化分析 | 第88-93页 |
·讨论 | 第93-95页 |
·小结 | 第95-96页 |
第六章 SpltNPV感染诱导Se301细胞凋亡的检测与分析 | 第96-113页 |
·材料与方法 | 第96-101页 |
·材料 | 第96-98页 |
·方法 | 第98-101页 |
·结果 | 第101-110页 |
·光学显微镜观察SpltNPV 感染Se301细胞的形态学变化 | 第101-102页 |
·电子显微镜观察SpltNPV 感染Se301细胞的形态学变化 | 第102-103页 |
·DAPI染色 | 第103-104页 |
·trypan blue染色 | 第104-105页 |
·DNA ladder | 第105页 |
·滴度测定 | 第105-106页 |
·Dot blotting | 第106-107页 |
·RT-PCR | 第107-109页 |
·SDS-PAGE和Western blotting分析 | 第109-110页 |
·讨论 | 第110-112页 |
·小结 | 第112-113页 |
总结 | 第113-114页 |
参考文献 | 第114-130页 |
在读期间发表的论文 | 第130页 |
国内外会议论文摘要 | 第130-131页 |
缩略词 | 第131-136页 |
致谢 | 第136页 |