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牛传染性鼻气管炎病毒分离鉴定及其单克隆抗体制备

中文摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-22页
   ·IBRV 的分类地位第10页
   ·流行病学第10-11页
   ·IBRV 的基本生物学特征第11-12页
     ·形态、理化特性第11-12页
     ·血清型第12页
   ·发病机理第12-13页
   ·致病性第13页
   ·IBRV 的分子生物学特征第13-16页
     ·IBRV 基因组结构第13-14页
     ·IBRV 基因及其编码的主要蛋白第14-16页
   ·IBR 的诊断第16-19页
     ·包涵体检查第16页
     ·病毒分离第16页
     ·病毒鉴定与检测第16-17页
     ·特异性抗体的检测第17-18页
     ·分子生物学诊断第18-19页
   ·防治第19页
   ·本研究的目的与意义第19-22页
第二章 IBRV 分离鉴定第22-32页
   ·材料第22-23页
     ·病料采集第22页
     ·细胞第22页
     ·试剂耗材第22页
     ·病毒和血清第22页
     ·主要仪器设备第22-23页
   ·方法第23-26页
     ·病毒的分离培养第23页
     ·病毒的鉴定第23-26页
   ·结果第26-31页
     ·病毒的分离培养第26页
     ·分离毒株 TCID50 检测结果第26页
     ·分离毒株病毒中和试验结果第26-27页
     ·血凝试验结果第27页
     ·病毒 PCR 鉴定结果第27-28页
     ·DQ01 株gD 全基因的克隆与序列分析结果第28-29页
     ·理化性质鉴定结果第29-31页
   ·讨论第31-32页
     ·病毒的分离培养第31页
     ·DNA 模板制备第31页
     ·PCR 检测第31页
     ·DQ01 株gD 基因分析第31-32页
第三章 IBRV 单克隆抗体的制备及鉴定第32-46页
   ·材料第32-33页
     ·主要仪器设备及耗材第32页
     ·主要试剂第32页
     ·实验动物及细胞第32页
     ·病毒第32-33页
   ·方法第33-38页
     ·抗原纯化第33页
     ·动物免疫第33页
     ·间接ELISA 检测方法的建立第33-34页
     ·小鼠免疫效价测定第34页
     ·杂交瘤细胞株的建立第34-36页
     ·单克隆抗体的大量制备第36页
     ·单克隆抗体的纯化第36-37页
     ·单克隆抗体的鉴定第37-38页
   ·结果第38-42页
     ·纯化抗原蛋白含量测定第38页
     ·全病毒包被ELISA 方法最佳工作条件的建立第38-39页
     ·免疫小鼠效价的检测第39页
     ·全病毒单克隆抗体细胞株的建立第39-40页
     ·抗体亚类鉴定结果第40页
     ·细胞培养液上清和腹水效价测定第40-41页
     ·单抗的特异性实验结果第41页
     ·杂交瘤细胞稳定性的鉴定第41-42页
     ·单抗的Western-blot 分析第42页
   ·讨论第42-46页
     ·小鼠的免疫第42页
     ·筛选系统的建立第42-43页
     ·细胞融合第43页
     ·单克隆抗体的生产和效价测定第43-44页
     ·单抗纯化第44页
     ·单克隆抗体制备影响因素及失败原因分析第44-46页
第四章 结论第46-47页
参考文献第47-51页
致谢第51-52页
附录第52-57页
 附录1 主要试剂的配制第52-55页
 附录2 DQ01 株gD 基因碱基变异部分核酸序列比较第55-56页
 附录3 DQ01 株gD 基因编码的蛋白质氨基酸序列比较第56-57页
作者简历第57页

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