中文摘要1 | 第1-4页 |
英文摘要1 | 第4-6页 |
中文摘要2 | 第6-7页 |
英文摘要2 | 第7-10页 |
图表目录 | 第10-12页 |
第一部分 小鼠CD19胞外区基因的克隆、鉴定与表达 | 第12-49页 |
文献综述 | 第12-15页 |
引言 | 第15-17页 |
1 材料与方法 | 第17-29页 |
·实验动物 | 第17页 |
·质粒和菌种 | 第17页 |
·主要工具酶类及试剂 | 第17页 |
·主要试剂的配置 | 第17-19页 |
·主要实验仪器 | 第19页 |
·小鼠CD19胞膜外区基因(MECD19)的克隆与鉴定 | 第19-22页 |
·pGEX-4T-1-MECD19原核表达重组质粒的构建与鉴定 | 第22-26页 |
·重组质粒pGEX-4T-1-MECD19的原核表达 | 第26页 |
·融合蛋白的大量提取 | 第26-29页 |
2 结果与分析 | 第29-39页 |
·小鼠脾脏组织总RNA的提取 | 第29页 |
·RT-PCR扩增小鼠MECD19基因 | 第29页 |
·小鼠MECD19基因RT-PCR产物的单酶切鉴定 | 第29-30页 |
·pGEX-4T-1-MECD19重组质粒的构建与鉴定 | 第30-34页 |
·SDS-PAGE检测诱导表达的融合蛋白 | 第34-35页 |
·GST-MECD19融合蛋白的可溶性鉴定 | 第35-36页 |
·GST-MECD19融合蛋白的提取与纯化 | 第36-38页 |
·融合蛋白含量的测定 | 第38-39页 |
3 讨论 | 第39-44页 |
·小鼠脾脏组织总RNA的提取 | 第39-40页 |
·RT-PCR扩增小鼠MECD19基因 | 第40页 |
·小鼠MECD19基因的测序结果 | 第40-41页 |
·表达载体的选择 | 第41-42页 |
·宿主菌的选择 | 第42页 |
·信号肽序列对MECD19基因原核表达的影响 | 第42-44页 |
4 结论 | 第44-45页 |
5 参考文献 | 第45-48页 |
6 附录 | 第48-49页 |
第二部分 人组蛋白Hist1 H1e基因的克隆与原核表达 | 第49-79页 |
文献综述 | 第49-54页 |
引言 | 第54-56页 |
1 材料与方法 | 第56-67页 |
·实验动物 | 第56页 |
·工程菌和质粒 | 第56页 |
·酶类与主要试剂(盒) | 第56页 |
·主要培养基与溶液的配制 | 第56-58页 |
·主要仪器 | 第58页 |
·人组蛋白Hist1 H1e基因的克隆 | 第58-61页 |
·原核重组表达质粒pET-32a-H1e C的构建 | 第61-63页 |
·重组质粒pET-32a-H1e C的原核表达 | 第63-65页 |
·融合蛋白的大量提取 | 第65-67页 |
2 结果与分析 | 第67-71页 |
·H1e C基因的PCR扩增 | 第67页 |
·H1e C基因的克隆与鉴定 | 第67页 |
·H1e C基因的序列测定 | 第67-68页 |
·重组质粒表达蛋白的鉴定 | 第68-70页 |
·融合蛋白含量的测定 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-73页 |
·模板对实验的影响 | 第71页 |
·融合蛋白可溶性的影响因素 | 第71-73页 |
4 结论 | 第73-74页 |
5 参考文献 | 第74-77页 |
6 附录 | 第77-78页 |
7 致谢 | 第78-79页 |
8 作者简介 | 第79页 |