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小鼠CD19胞外区基因和人组蛋白H1e C端基因的克隆及其原核表达

中文摘要1第1-4页
英文摘要1第4-6页
中文摘要2第6-7页
英文摘要2第7-10页
图表目录第10-12页
第一部分 小鼠CD19胞外区基因的克隆、鉴定与表达第12-49页
 文献综述第12-15页
 引言第15-17页
 1 材料与方法第17-29页
   ·实验动物第17页
   ·质粒和菌种第17页
   ·主要工具酶类及试剂第17页
   ·主要试剂的配置第17-19页
   ·主要实验仪器第19页
   ·小鼠CD19胞膜外区基因(MECD19)的克隆与鉴定第19-22页
   ·pGEX-4T-1-MECD19原核表达重组质粒的构建与鉴定第22-26页
   ·重组质粒pGEX-4T-1-MECD19的原核表达第26页
   ·融合蛋白的大量提取第26-29页
 2 结果与分析第29-39页
   ·小鼠脾脏组织总RNA的提取第29页
   ·RT-PCR扩增小鼠MECD19基因第29页
   ·小鼠MECD19基因RT-PCR产物的单酶切鉴定第29-30页
   ·pGEX-4T-1-MECD19重组质粒的构建与鉴定第30-34页
   ·SDS-PAGE检测诱导表达的融合蛋白第34-35页
   ·GST-MECD19融合蛋白的可溶性鉴定第35-36页
   ·GST-MECD19融合蛋白的提取与纯化第36-38页
   ·融合蛋白含量的测定第38-39页
 3 讨论第39-44页
   ·小鼠脾脏组织总RNA的提取第39-40页
   ·RT-PCR扩增小鼠MECD19基因第40页
   ·小鼠MECD19基因的测序结果第40-41页
   ·表达载体的选择第41-42页
   ·宿主菌的选择第42页
   ·信号肽序列对MECD19基因原核表达的影响第42-44页
 4 结论第44-45页
 5 参考文献第45-48页
 6 附录第48-49页
第二部分 人组蛋白Hist1 H1e基因的克隆与原核表达第49-79页
 文献综述第49-54页
 引言第54-56页
 1 材料与方法第56-67页
   ·实验动物第56页
   ·工程菌和质粒第56页
   ·酶类与主要试剂(盒)第56页
   ·主要培养基与溶液的配制第56-58页
   ·主要仪器第58页
   ·人组蛋白Hist1 H1e基因的克隆第58-61页
   ·原核重组表达质粒pET-32a-H1e C的构建第61-63页
   ·重组质粒pET-32a-H1e C的原核表达第63-65页
   ·融合蛋白的大量提取第65-67页
 2 结果与分析第67-71页
   ·H1e C基因的PCR扩增第67页
   ·H1e C基因的克隆与鉴定第67页
   ·H1e C基因的序列测定第67-68页
   ·重组质粒表达蛋白的鉴定第68-70页
   ·融合蛋白含量的测定第70-71页
 3 讨论第71-73页
   ·模板对实验的影响第71页
   ·融合蛋白可溶性的影响因素第71-73页
 4 结论第73-74页
 5 参考文献第74-77页
 6 附录第77-78页
 7 致谢第78-79页
 8 作者简介第79页

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