中文摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-15页 |
引言 | 第15-18页 |
技术路线图 | 第18-19页 |
第一部分 研究背景 | 第19-37页 |
一、系统性红斑狼疮慨况 | 第19-20页 |
(一) 系统性红斑狼疮病名由来和诊断标准 | 第19-20页 |
(二) 中医病名和病因病机 | 第20页 |
二、SLE中西医研究近况 | 第20-28页 |
(一) SLE中医研究近况 | 第20-26页 |
(二) SLE发病和治疗西医概况 | 第26-28页 |
三、基因和蛋白质组学的发展和在SLE中的应用 | 第28-36页 |
(一) 基因和蛋白质组学的发展 | 第28-33页 |
(二) 生物信息学技术 | 第33页 |
(三) 基因和蛋白组学在SLE的应用 | 第33-36页 |
小结 | 第36-37页 |
第二部分 前期系列实验 | 第37-45页 |
实验一:含药血清制备 | 第37-38页 |
一、实验目的 | 第37页 |
二、实验步骤 | 第37-38页 |
实验二: SLE外周血单一核细胞(PBMC)分离与孵化 | 第38-40页 |
一、实验目的 | 第38页 |
二、实验步骤 | 第38-40页 |
实验三: SLE患者PBMC抗ds-DNA抗体检测 | 第40页 |
一、实验目的 | 第40页 |
二、实验步骤 | 第40页 |
实验四、含药血清对SLE患者PBMC的抗ds-DNA抗体影响的实验 | 第40-42页 |
一、实验目的 | 第40-41页 |
二、实验步骤 | 第41页 |
三、实验结果 | 第41-42页 |
实验五: 总RNA提取 | 第42-43页 |
一、实验目的 | 第42页 |
二、实验步骤 | 第42-43页 |
实验六:总蛋白提取 | 第43-45页 |
一、实验目的 | 第43页 |
二、实验步骤 | 第43-45页 |
第三部分 含药血清对SLE患者PBMC的基因表达谱影响 | 第45-82页 |
一、材料仪器 | 第45页 |
(一) 试剂 | 第45页 |
(二) 仪器 | 第45页 |
(三) 应用软件 | 第45页 |
二、基因表达谱研究的具体实验方法 | 第45-49页 |
(一)、RNA微量扩增 | 第45-47页 |
(二)、探针标记 | 第47-48页 |
(三)、人类基因表达谱芯片的设计和生产 | 第48页 |
(四)、芯片杂交 | 第48-49页 |
(五)、扫描和数据处理 | 第49页 |
三、基因表达谱研究具体实验步骤 | 第49-59页 |
(一) 样品质检及总RNA提取 | 第49-50页 |
(二) 探针标记和芯片杂交结果 | 第50-51页 |
(三) 芯片表达谱结果及生物信息学分析 | 第51-59页 |
四、结合专业的数据分析和结果 | 第59-71页 |
(一) 不含药血清、地塞米松和含药血清对PBMC基因表达的影响 | 第59-62页 |
(二) 含药血清、地塞米松和不含药血清对PBMC基因组学影响的两两比较 | 第62-71页 |
(三) 含药血清、地塞米松和不含药血清三者比较中一些有意义的基因 | 第71页 |
五、讨论 | 第71-80页 |
(一) 含药血清、地塞米松和不含药血清对对SLE病人PBMC基因表达谱的影响 | 第73-75页 |
(二) 含药血清、地塞米松和不含药血清对SLE患者PBMC基因表达谱影响的两两比较 | 第75-77页 |
(三) 基因表达谱中筛选出一些基因的功能和意义分析 | 第77-80页 |
小结 | 第80-82页 |
第四部分 含药血清对SLE患者PBMC的蛋白表达谱影响 | 第82-96页 |
一、材料仪器 | 第82-84页 |
(一) 主要仪器设备 | 第82-83页 |
(二) 主要试剂和耗材 | 第83页 |
(三) 实验常用试剂的配制 | 第83-84页 |
二、实验方法 | 第84-86页 |
(一) 淋巴细胞总蛋白质提取 | 第84页 |
(二) 淋巴细胞蛋白质表达谱的获得 | 第84-86页 |
(三) 数据处理与统计分析 | 第86页 |
三、结果 | 第86-90页 |
(一) 不含药血清组和空白对照组SELDI-TOF-MS蛋白表达的比较 | 第86页 |
(二) 地塞米松组和空白对照组SELDI-TOF-MS蛋白表达的比较 | 第86-87页 |
(三) 含药血清组和空白对照组SELDI-TOF-MS蛋白表达的比较 | 第87页 |
(四) 含药血清组和不含药血清组SELDI-TOF-MS蛋白表达的比较 | 第87-90页 |
四、讨论 | 第90-96页 |
(一) SELDI-TOF-MS技术背景 | 第90-92页 |
(二) 结果分析 | 第92-96页 |
结语 | 第96-98页 |
一、本研究的特色与创新 | 第96页 |
二、存在的问题和研究展望 | 第96-97页 |
三、结论 | 第97-98页 |
参考文献 | 第98-104页 |
攻读博士学位期间发表论文和参与的科研 | 第104-105页 |
附录 | 第105-132页 |
表1 英文缩略词表 | 第105-106页 |
表2 不含药血清对PBMC基因上调表达结果 | 第106-109页 |
表3 不含药血清对PBMC基因下调表达结果 | 第109-112页 |
表4 不含药血清对PBMC基因上调表达结果 | 第112-114页 |
表5 地塞米松对PBMC基因下调表达结果 | 第114-117页 |
表6 含药血清对PBMC基因上调表达结果 | 第117-119页 |
表7 含药血清对PBMC基因下调表达结果 | 第119-121页 |
表8 含药血清和地塞米松同时下调 | 第121-122页 |
表9 含药血清和地塞米松同时无上调和下调 | 第122-125页 |
表10 含药血清下调、地塞米松无上调下调 | 第125页 |
表11 含药血清上调、地塞米松同时无上调下调 | 第125页 |
表12 含药血清同时无上调下调、地塞米松下调 | 第125-126页 |
表13 不含药血清上调,含有血清无上调和下调 | 第126-127页 |
表14 含药血清下调、不含药血清同时下调无下调 | 第127页 |
表15 地塞米松上调、不含药血清同时无上调下调 | 第127-128页 |
表16 不含药血清和空白对照比较 | 第128-129页 |
表17 不含药血清组和空白对照组模式蛋白生物信息学查对 | 第129页 |
表18 地塞米松和空白对照比较 | 第129-130页 |
表19 含药血清和空白对照比较 | 第130-131页 |
表20 含药血清组和空白对照组模式蛋白生物信息学查对 | 第131页 |
表21 含药血清和不含药血清比较 | 第131-132页 |
致谢 | 第132页 |