摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略词(ABBREVIATION) | 第10-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-23页 |
·蓝舌病 | 第11-18页 |
·蓝舌病历史 | 第11-12页 |
·蓝舌病病毒形态与基因组结构 | 第12-13页 |
·蓝舌病病原特性 | 第13-14页 |
·群特异性抗原VP7蛋白结构与功能 | 第14-15页 |
·蓝舌病病毒的复制 | 第15-16页 |
·蓝舌病流行病学特征 | 第16-17页 |
·蓝舌病临床症状与病理变化 | 第17-18页 |
·蓝舌病病毒疫苗的研究 | 第18页 |
·蓝舌病病毒检测方法的研究 | 第18-21页 |
·血清学检测方法 | 第19-20页 |
·分子生物学检测方法 | 第20-21页 |
·研究的目的与意义 | 第21-23页 |
第2章 蓝舌病病毒VP7蛋白的原核表达及表达产物反应原性鉴定 | 第23-46页 |
·材料 | 第23-26页 |
·毒株、菌种和载体 | 第23页 |
·工具酶和主要试剂 | 第23页 |
·血清和酶标抗体 | 第23-24页 |
·主要试剂及溶液配置 | 第24-26页 |
·方法 | 第26-34页 |
·引物设计 | 第26-27页 |
·BTV总RNA的制备 | 第27页 |
·BTV VP7基因的克隆构建 | 第27-29页 |
·重组表达质粒的构建 | 第29-32页 |
·重组菌的诱导表达 | 第32页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第32页 |
·Western blotting | 第32-33页 |
·重组蛋白的纯化 | 第33-34页 |
·间接ELISA法鉴定重组VP7蛋白群特异性 | 第34页 |
·结果 | 第34-42页 |
·BTV VP7基因的克隆构建及序列分析 | 第34-37页 |
·重组表达质粒的构建 | 第37页 |
·重组菌的诱导表达结果 | 第37-39页 |
·重组VP7蛋白的纯化 | 第39-41页 |
·Western blotting检测 | 第41-42页 |
·重组VP7蛋白群特异性的鉴定 | 第42页 |
·讨论 | 第42-46页 |
·蓝舌病病毒VP7基因的克隆及序列分析 | 第43-44页 |
·蓝舌病病毒VP7蛋白的原核表达 | 第44页 |
·可溶性目的蛋白的提取 | 第44-45页 |
·目的蛋白反应原性检测 | 第45-46页 |
第3章 蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第46-62页 |
·材料 | 第46-48页 |
·生物材料 | 第46页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要试剂配制 | 第46-48页 |
·方法 | 第48-53页 |
·抗原制备 | 第48页 |
·小鼠免疫 | 第48页 |
·间接ELISA检测方法的建立 | 第48-49页 |
·细胞融合 | 第49-50页 |
·阳性杂交瘤细胞筛选与克隆化 | 第50页 |
·杂交瘤细胞冻存和复苏 | 第50-51页 |
·单克隆抗体的腹水制备及纯化 | 第51-52页 |
·单克隆抗体的鉴定 | 第52-53页 |
·单克隆抗体稳定性鉴定 | 第53页 |
·结果 | 第53-59页 |
·BTV在BHK-21细胞中的病变 | 第53-54页 |
·重组VP7蛋白最佳包被ELISA工作条件的建立 | 第54页 |
·动物免疫及抗体水平检测 | 第54-55页 |
·细胞的融合与筛选 | 第55页 |
·杂交瘤细胞及单克隆抗体的特性鉴定 | 第55-56页 |
·BTV VP7蛋白单克隆抗体的特异性鉴定 | 第56-59页 |
·重组VP7蛋白单克隆抗体的稳定性分析 | 第59页 |
·讨论 | 第59-62页 |
结论 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
附录 | 第71-73页 |