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蓝舌病病毒VP7蛋白的原核表达及单克隆抗体的制备

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
缩略词(ABBREVIATION)第10-11页
第1章 文献综述第11-23页
   ·蓝舌病第11-18页
     ·蓝舌病历史第11-12页
     ·蓝舌病病毒形态与基因组结构第12-13页
     ·蓝舌病病原特性第13-14页
     ·群特异性抗原VP7蛋白结构与功能第14-15页
     ·蓝舌病病毒的复制第15-16页
     ·蓝舌病流行病学特征第16-17页
     ·蓝舌病临床症状与病理变化第17-18页
     ·蓝舌病病毒疫苗的研究第18页
   ·蓝舌病病毒检测方法的研究第18-21页
     ·血清学检测方法第19-20页
     ·分子生物学检测方法第20-21页
   ·研究的目的与意义第21-23页
第2章 蓝舌病病毒VP7蛋白的原核表达及表达产物反应原性鉴定第23-46页
   ·材料第23-26页
     ·毒株、菌种和载体第23页
     ·工具酶和主要试剂第23页
     ·血清和酶标抗体第23-24页
     ·主要试剂及溶液配置第24-26页
   ·方法第26-34页
     ·引物设计第26-27页
     ·BTV总RNA的制备第27页
     ·BTV VP7基因的克隆构建第27-29页
     ·重组表达质粒的构建第29-32页
     ·重组菌的诱导表达第32页
     ·SDS-PAGE电泳第32页
     ·Western blotting第32-33页
     ·重组蛋白的纯化第33-34页
     ·间接ELISA法鉴定重组VP7蛋白群特异性第34页
   ·结果第34-42页
     ·BTV VP7基因的克隆构建及序列分析第34-37页
     ·重组表达质粒的构建第37页
     ·重组菌的诱导表达结果第37-39页
     ·重组VP7蛋白的纯化第39-41页
     ·Western blotting检测第41-42页
     ·重组VP7蛋白群特异性的鉴定第42页
   ·讨论第42-46页
     ·蓝舌病病毒VP7基因的克隆及序列分析第43-44页
     ·蓝舌病病毒VP7蛋白的原核表达第44页
     ·可溶性目的蛋白的提取第44-45页
     ·目的蛋白反应原性检测第45-46页
第3章 蓝舌病病毒VP7蛋白单克隆抗体的制备及鉴定第46-62页
   ·材料第46-48页
     ·生物材料第46页
     ·主要试剂第46页
     ·主要试剂配制第46-48页
   ·方法第48-53页
     ·抗原制备第48页
     ·小鼠免疫第48页
     ·间接ELISA检测方法的建立第48-49页
     ·细胞融合第49-50页
     ·阳性杂交瘤细胞筛选与克隆化第50页
     ·杂交瘤细胞冻存和复苏第50-51页
     ·单克隆抗体的腹水制备及纯化第51-52页
     ·单克隆抗体的鉴定第52-53页
     ·单克隆抗体稳定性鉴定第53页
   ·结果第53-59页
     ·BTV在BHK-21细胞中的病变第53-54页
     ·重组VP7蛋白最佳包被ELISA工作条件的建立第54页
     ·动物免疫及抗体水平检测第54-55页
     ·细胞的融合与筛选第55页
     ·杂交瘤细胞及单克隆抗体的特性鉴定第55-56页
     ·BTV VP7蛋白单克隆抗体的特异性鉴定第56-59页
     ·重组VP7蛋白单克隆抗体的稳定性分析第59页
   ·讨论第59-62页
结论第62-63页
参考文献第63-70页
致谢第70-71页
附录第71-73页

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