提要 | 第1-9页 |
引言 | 第9-10页 |
第一章 文献回顾 | 第10-16页 |
一、高迁移率族蛋白概述 | 第10-11页 |
二、HMGA 基因与分子结构 | 第11-12页 |
三、HMGA 生物学功能 | 第12-16页 |
第二章 实验研究 | 第16-45页 |
第一节 稳定表达外源HMGA1 基因NIH3T3 细胞系的建立 | 第16-35页 |
一、实验材料 | 第16-19页 |
二、实验方法 | 第19-27页 |
1. HMGA1 基因的获得 | 第19-22页 |
2. 真核表达载体pcDNA3.0-HMGA1 的构建 | 第22-23页 |
3. 重组基因pcDNA3.0-HMGA1 稳定转染 NIH3T3 细胞 | 第23-27页 |
三、实验结果 | 第27-35页 |
1. 真核表达载体pcDNA3.0-HMGA1 的构建 | 第27-31页 |
2. 基因转染及细胞克隆的筛选 | 第31-32页 |
3. 稳定转染细胞株的鉴定 | 第32-35页 |
第二节 HMGA1 基因对 NIH3T3 细胞免疫生物学特性的影响 | 第35-45页 |
一、实验材料 | 第35-37页 |
二、实验方法 | 第37-40页 |
1. 细胞形态学观察 | 第37页 |
2. MTT 比色法检测稳定转染细胞株的增殖 | 第37页 |
3. 流式细胞术检测稳定转染细胞株的细胞周期 | 第37-38页 |
4. 软琼脂集落形成试验检测稳定转染细胞株的非锚定依赖性生长能力 | 第38页 |
5. RT-PCR 法检测稳定转染细胞株免疫抑制因子及FasL mRNA 的表达 | 第38-40页 |
三、实验结果 | 第40-45页 |
1. 稳定转染细胞株形态学改变 | 第40-41页 |
2. 稳定转染细胞株生长加快 | 第41页 |
3. 稳定转染细胞株生长周期改变 | 第41-42页 |
4. 稳定转染细胞株获得非锚定依赖性生长能力 | 第42-44页 |
5. 稳定转染细胞株表达免疫抑制因子VEGF mRNA 和FasL m RNA | 第44-45页 |
讨论 | 第45-50页 |
小结 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-57页 |
中文摘要 | 第57-60页 |
Abstract | 第60-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
攻读硕士期间已(待)发表的文章 | 第64页 |