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HMGA1基因转染诱导NIH3T3细胞恶性转化研究

提要第1-9页
引言第9-10页
第一章 文献回顾第10-16页
 一、高迁移率族蛋白概述第10-11页
 二、HMGA 基因与分子结构第11-12页
 三、HMGA 生物学功能第12-16页
第二章 实验研究第16-45页
 第一节 稳定表达外源HMGA1 基因NIH3T3 细胞系的建立第16-35页
  一、实验材料第16-19页
  二、实验方法第19-27页
   1. HMGA1 基因的获得第19-22页
   2. 真核表达载体pcDNA3.0-HMGA1 的构建第22-23页
   3. 重组基因pcDNA3.0-HMGA1 稳定转染 NIH3T3 细胞第23-27页
  三、实验结果第27-35页
   1. 真核表达载体pcDNA3.0-HMGA1 的构建第27-31页
   2. 基因转染及细胞克隆的筛选第31-32页
   3. 稳定转染细胞株的鉴定第32-35页
 第二节 HMGA1 基因对 NIH3T3 细胞免疫生物学特性的影响第35-45页
  一、实验材料第35-37页
  二、实验方法第37-40页
   1. 细胞形态学观察第37页
   2. MTT 比色法检测稳定转染细胞株的增殖第37页
   3. 流式细胞术检测稳定转染细胞株的细胞周期第37-38页
   4. 软琼脂集落形成试验检测稳定转染细胞株的非锚定依赖性生长能力第38页
   5. RT-PCR 法检测稳定转染细胞株免疫抑制因子及FasL mRNA 的表达第38-40页
  三、实验结果第40-45页
   1. 稳定转染细胞株形态学改变第40-41页
   2. 稳定转染细胞株生长加快第41页
   3. 稳定转染细胞株生长周期改变第41-42页
   4. 稳定转染细胞株获得非锚定依赖性生长能力第42-44页
   5. 稳定转染细胞株表达免疫抑制因子VEGF mRNA 和FasL m RNA第44-45页
讨论第45-50页
小结第50-51页
参考文献第51-57页
中文摘要第57-60页
Abstract第60-63页
致谢第63-64页
攻读硕士期间已(待)发表的文章第64页

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