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番茄高可溶性固形物代谢途径中相关基因的克隆和分析

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一章 综述第10-29页
   ·课题的提出第10页
   ·番茄可溶性固形物研究进展第10-19页
     ·番茄可溶性固形物组分研究进展第10-13页
     ·番茄果实发育过程中可溶性固性物的动态变化第13-15页
     ·番茄果实可溶性固形物的遗传特性和提高途径研究进展第15-19页
   ·转录水平上的基因克隆方法第19-25页
     ·mRNA 差异显示(mRNA differential display reverse transcription polymerase chain reaction, DDRT-PCR)第20页
     ·cDNA 代表性差异分析(cDNA representational difference analysis, cDNA-RDA)第20-21页
     ·抑制性消减杂交(suppression subtractive hybridization, SSH)第21页
     ·DNA 芯片(DNA-chip)第21-22页
     ·cDNA-AFLP (cDNA-amplified fragment length polymorphism)第22-25页
   ·RACE 技术原理及其研究进展第25-27页
     ·RACE 原理第25页
     ·RACE 技术的优点和缺点第25-26页
     ·传统RACE 的改良第26-27页
     ·新型RACE第27页
   ·本研究的内容第27-28页
   ·总体设计第28-29页
第二章 番茄果实总RNA 提取方法研究第29-35页
   ·材料与方法第29-30页
     ·材料第29页
     ·方法第29-30页
   ·结果与分析第30-33页
     ·RNA 产量分析第30-31页
     ·RNA 样品的紫外扫描分析第31-32页
     ·RNA 样品的凝胶电泳分析第32页
     ·cDNA-AFLP 分析第32-33页
   ·讨论第33-35页
第三章 CDNA-AFLP 技术分离番茄可溶性固形物相关基因第35-51页
   ·材料与方法第35-42页
     ·仪器设备和试剂第35-36页
     ·实验材料第36-37页
     ·试验方法和步骤第37-42页
   ·结果与分析第42-48页
     ·RNA 的提取分析第42-43页
     ·双链cDNA 的合成、酶切连接和预扩增结果第43-44页
     ·5 个番茄材料在不同生育阶段的基因差异表达分析第44页
     ·特异TDF 的二次扩增、克隆与验证阳性克隆第44-45页
     ·特异TDF 测序结果分析第45页
     ·TDF 的序列同源性比较分析第45-48页
     ·几个TDF 的RT-PCR 分析第48页
   ·讨论第48-51页
     ·cDNA-AFLP 是获取差异表达基因的有效方法第48-49页
     ·基于cDNA-AFLP 技术结果的可靠性第49页
     ·番茄可溶性固形物相关基因第49-51页
第四章 番茄可溶性固形物相关基因(全长)CDNA 克隆及序列分析第51-65页
   ·材料与方法第51-56页
     ·植物材料第51页
     ·番茄果实总RNA 的提取第51页
     ·3’-RACE 实验步骤第51-53页
     ·5'-RACE 实验步骤第53-55页
     ·生物信息学分析第55-56页
   ·结果与分析第56-63页
     ·3’RACE 结果第56-57页
     ·TDF1 的5’RACE 结果第57页
     ·番茄SSC1 基因全长cDNA 拼接及一步PCR 验证第57-58页
     ·序列结构分析第58-60页
     ·蛋白质序列分析第60-63页
   ·讨论第63-65页
     ·番茄高可溶性固形物相关基因的获得第63页
     ·番茄 SSC1 基因的结构和功能预测第63-64页
     ·生物信息学分析方法的产生和利用第64-65页
第五章 结 论第65-66页
参考文献第66-71页
致谢第71-72页
作者简介第72页

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