摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一部分 临床标本中人乳头瘤病毒的基因分型 | 第13-21页 |
1 材料 | 第13-14页 |
·样本采集 | 第13页 |
·仪器和试剂 | 第13-14页 |
2 实验原理 | 第14-15页 |
3 实验方法 | 第15-16页 |
·临床样品HPV DNA获取和处理。 | 第15页 |
·HPV DNA片段的PCR扩增 | 第15页 |
·杂交和显色 | 第15-16页 |
·结果判定 | 第16页 |
·统计方法 | 第16页 |
4 结果 | 第16-18页 |
·正常组和疾病组HPV感染的比较以及HPV感染与相关疾病的关系 | 第16-17页 |
·HPV感染与年龄的关系 | 第17页 |
·首次性生活年龄以及怀孕次数与HPV感染的关系 | 第17-18页 |
5 讨论 | 第18-21页 |
·HPV感染与相关妇科疾病的关系 | 第19页 |
·HPV感染与年龄的关系 | 第19页 |
·首次性生活年龄以及怀孕次数与HPV感染的关系 | 第19-21页 |
第二部分 利用悬浮点阵技术对反向膜杂交技术进行评价 | 第21-26页 |
1 材料 | 第21页 |
2 原理 | 第21页 |
3 方法 | 第21-23页 |
·标本DNA提取 | 第21-22页 |
·PCR扩增 | 第22页 |
·探针设计 | 第22-23页 |
·杂交 | 第23页 |
4 结果与分析 | 第23-24页 |
·液相芯片检测结果 | 第23-24页 |
·反向点杂交检测结果 | 第24页 |
·两种方法检测结果的比较 | 第24页 |
5 讨论 | 第24-26页 |
第三部分 人乳头瘤病毒16亚型L1、E6和E7基因的分离克隆和序列分析 | 第26-55页 |
1 材料 | 第26-27页 |
·实验标本 | 第26页 |
·载体和菌株 | 第26页 |
·工具酶及生化试剂 | 第26-27页 |
·试剂配方 | 第27页 |
2 方法 | 第27-31页 |
·宫颈癌组织DNA的提取 | 第27-28页 |
·型别鉴定 | 第28页 |
·引物的设计与合成 | 第28-29页 |
·PCR扩增HPV16亚型E6、E7和L1基因 | 第29页 |
·扩增产物的观察与回收 | 第29页 |
·利用pMD18-T载体克隆所需基因片段 | 第29-31页 |
3 结果 | 第31-49页 |
·反向膜杂交结果 | 第31页 |
·宫颈癌组织中HPV16 E6、E7、L1 ORFs DNA片段的扩增 | 第31-32页 |
·pMD18-T/HPV16 E6、E7、L1 ORFs重组质粒的构建 | 第32-33页 |
·HPV16致癌基因E6、E7以及衣壳蛋白决定基因L1的序列变异分析 | 第33-47页 |
·系统进化分析 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |
文献综述 人乳头瘤病毒的研究进展 | 第55-94页 |
1 人乳头瘤病毒的生物学简介 | 第55-70页 |
·人乳头瘤病毒的基本结构 | 第55-56页 |
·人乳头瘤病毒的生活史 | 第56-58页 |
·人乳头瘤病毒的类型划分 | 第58-59页 |
·人乳头瘤病毒造成的疾病 | 第59-63页 |
·HPV的致病机理 | 第63-67页 |
·HPV的流行病学研究 | 第67-70页 |
2 HPV检测方法的研究进展 | 第70-76页 |
·传统的细胞学检测 | 第70-72页 |
·分子生物学方法 | 第72-76页 |
参考文献 | 第76-94页 |
在读期间发表论文及待发表的论文 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |