摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-7页 |
第一章 文献综述 | 第7-20页 |
·大肠杆菌中的同源重组机制及应用 | 第7-12页 |
·重组简介 | 第7页 |
·大肠杆菌中的同源重组机制及应用 | 第7-10页 |
·噬菌体重组基因介导的同源重组及应用-重组工程 | 第10-12页 |
·大肠杆菌中的诱导表达调控系统及其在重组工程中的应用 | 第12-14页 |
·大肠杆菌中的诱导表达调控系统 | 第12-13页 |
·大肠杆菌中的诱导表达调控系统在重组工程中的应用 | 第13-14页 |
·运动发酵单胞菌中的同源重组机制及应用 | 第14-16页 |
·运动发酵单胞菌中的同源重组机制 | 第15-16页 |
·运动发酵单胞菌中的同源重组机制的应用 | 第16页 |
·运动发酵单胞菌中的诱导表达调控系统 | 第16-17页 |
·大肠杆菌诱导表达调控系统在运动发酵单胞菌中的应用 | 第17页 |
·本课题的研究目的、内容和技术路线 | 第17-20页 |
·研究目的 | 第17-18页 |
·研究内容 | 第18页 |
·技术路线 | 第18-20页 |
第二章 实验材料和方法 | 第20-36页 |
·实验材料 | 第20-26页 |
·菌株与质粒 | 第20-21页 |
·主要试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器设备 | 第22-23页 |
·培养基及常用溶液的配制 | 第23-26页 |
·PCR反应引物 | 第26页 |
·实验方法 | 第26-36页 |
·菌株的培养 | 第26-27页 |
·PCR反应 | 第27-29页 |
·末端处理产生A/T端 | 第29-30页 |
·末端平滑化处理DNA片段 | 第30页 |
·酶切反应 | 第30页 |
·电泳分析 | 第30页 |
·目的条带的回收 | 第30-31页 |
·连接反应 | 第31页 |
·感受态细胞的制备 | 第31-32页 |
·感受态细胞的转化 | 第32页 |
·E.coli质粒的小量提取(SDS-碱裂解法) | 第32-33页 |
·Z.mobilis质粒的小量提取(Nester法) | 第33-34页 |
·Z.mobilis染色体的提取 | 第34页 |
·酶活测定 | 第34-36页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第36-50页 |
·依赖于Z.mobilis recA基因的重组方法研究 | 第36-42页 |
·构建质粒pBR328-ldhR-ldhL和pBR328-ldhR-cml-ldhL | 第36-40页 |
·pBR328-ldhR-cml-ldhL转化运动发酵单胞菌及重组菌株的筛选鉴定 | 第40-42页 |
·大肠杆菌阿拉伯糖调控系统在运动发酵单胞菌中的调控研究 | 第42-50页 |
·pZB21-Plac-lacZ的构建 | 第42-44页 |
·pZB21-araC-P_(BAD)-lacZ的构建 | 第44-46页 |
·pZB21-Plac-lacZ、pZB21-araC-P_(BAD)-lacZ转化CP4 | 第46页 |
·LacZ酶活测定 | 第46-47页 |
·CP4 中阿拉伯糖诱导表达LacZ基因的条件摸索 | 第47-50页 |
第四章 结论与展望 | 第50-51页 |
·结论 | 第50页 |
·展望 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
附录一 有关基因和质粒的物理图谱 | 第55-61页 |
附录二 测序结果 | 第61-63页 |
致谢 | 第63页 |