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Z. mobilis中同源重组方法及诱导表达体系的研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-7页
第一章 文献综述第7-20页
   ·大肠杆菌中的同源重组机制及应用第7-12页
     ·重组简介第7页
     ·大肠杆菌中的同源重组机制及应用第7-10页
     ·噬菌体重组基因介导的同源重组及应用-重组工程第10-12页
   ·大肠杆菌中的诱导表达调控系统及其在重组工程中的应用第12-14页
     ·大肠杆菌中的诱导表达调控系统第12-13页
     ·大肠杆菌中的诱导表达调控系统在重组工程中的应用第13-14页
   ·运动发酵单胞菌中的同源重组机制及应用第14-16页
     ·运动发酵单胞菌中的同源重组机制第15-16页
     ·运动发酵单胞菌中的同源重组机制的应用第16页
   ·运动发酵单胞菌中的诱导表达调控系统第16-17页
   ·大肠杆菌诱导表达调控系统在运动发酵单胞菌中的应用第17页
   ·本课题的研究目的、内容和技术路线第17-20页
     ·研究目的第17-18页
     ·研究内容第18页
     ·技术路线第18-20页
第二章 实验材料和方法第20-36页
   ·实验材料第20-26页
     ·菌株与质粒第20-21页
     ·主要试剂第21-22页
     ·主要仪器设备第22-23页
     ·培养基及常用溶液的配制第23-26页
     ·PCR反应引物第26页
   ·实验方法第26-36页
     ·菌株的培养第26-27页
     ·PCR反应第27-29页
     ·末端处理产生A/T端第29-30页
     ·末端平滑化处理DNA片段第30页
     ·酶切反应第30页
     ·电泳分析第30页
     ·目的条带的回收第30-31页
     ·连接反应第31页
     ·感受态细胞的制备第31-32页
     ·感受态细胞的转化第32页
     ·E.coli质粒的小量提取(SDS-碱裂解法)第32-33页
     ·Z.mobilis质粒的小量提取(Nester法)第33-34页
     ·Z.mobilis染色体的提取第34页
     ·酶活测定第34-36页
第三章 实验结果与讨论第36-50页
   ·依赖于Z.mobilis recA基因的重组方法研究第36-42页
     ·构建质粒pBR328-ldhR-ldhL和pBR328-ldhR-cml-ldhL第36-40页
     ·pBR328-ldhR-cml-ldhL转化运动发酵单胞菌及重组菌株的筛选鉴定第40-42页
   ·大肠杆菌阿拉伯糖调控系统在运动发酵单胞菌中的调控研究第42-50页
     ·pZB21-Plac-lacZ的构建第42-44页
     ·pZB21-araC-P_(BAD)-lacZ的构建第44-46页
     ·pZB21-Plac-lacZ、pZB21-araC-P_(BAD)-lacZ转化CP4第46页
     ·LacZ酶活测定第46-47页
     ·CP4 中阿拉伯糖诱导表达LacZ基因的条件摸索第47-50页
第四章 结论与展望第50-51页
   ·结论第50页
   ·展望第50-51页
参考文献第51-55页
附录一 有关基因和质粒的物理图谱第55-61页
附录二 测序结果第61-63页
致谢第63页

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