| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-35页 |
| ·丙烯酰胺概述 | 第12-17页 |
| ·丙烯酰胺的性质 | 第12-13页 |
| ·丙烯酰胺的用途 | 第13-15页 |
| ·丙烯酰胺的市场预期 | 第15-17页 |
| ·酶法生产丙烯酰胺 | 第17-20页 |
| ·丙烯酰胺生产菌株 | 第17-18页 |
| ·酶法生产丙烯酰胺的工艺特点 | 第18-19页 |
| ·微生物法生产丙烯酰胺工业应用状况 | 第19-20页 |
| ·丙烯酸概况 | 第20-25页 |
| ·丙烯酸基本理化性质 | 第20页 |
| ·丙烯酸的应用 | 第20-22页 |
| ·丙烯酸工业生产状况 | 第22-23页 |
| ·微生物法生产丙烯酸 | 第23-24页 |
| ·国内丙烯酸生产状况及市场预期 | 第24-25页 |
| ·腈代谢酶系的研究进展 | 第25-32页 |
| ·腈水合酶的的研究进展 | 第27页 |
| ·腈水解酶研究进展 | 第27-28页 |
| ·酰胺酶研究进展 | 第28-32页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第32-35页 |
| ·微生物法生产丙烯酰胺中存在的问题及解决的途径 | 第32-34页 |
| ·丙烯酸工业生产的发展方向 | 第34-35页 |
| 第二章 诺卡氏菌酰胺酶基因克隆与生物信息学分析 | 第35-53页 |
| ·引言 | 第35页 |
| ·材料与方法 | 第35-40页 |
| ·实验菌种 | 第35-36页 |
| ·质粒与菌株 | 第36页 |
| ·工具酶与试剂 | 第36页 |
| ·各种培养基配方 | 第36-37页 |
| ·聚合酶链式反应引物 | 第37-38页 |
| ·野生诺卡氏菌培养条件 | 第38页 |
| ·野生诺卡氏菌基因组提取方式 | 第38-39页 |
| ·PCR反应条件 | 第39页 |
| ·连接、转化、筛选方法 | 第39-40页 |
| ·酰胺酶基因的克隆与鉴定 | 第40-45页 |
| ·野生诺卡氏菌基因组DNA提取结果 | 第40页 |
| ·诺卡氏菌酰胺酶基因克隆思路 | 第40-44页 |
| ·DNA序列测定结果 | 第44-45页 |
| ·酰胺酶基因序列生物信息学分析 | 第45-51页 |
| ·Ncordia sp YS-2002酰胺酶基因序列结构分析 | 第45-46页 |
| ·Ncordia sp YS-2002酰胺酶氨基酸序列同源性分析 | 第46-48页 |
| ·氨基酸序列组成及其稳定性分析 | 第48-49页 |
| ·酰胺酶基因稀有密码子分析 | 第49页 |
| ·酰胺酶疏水性分析 | 第49-50页 |
| ·Ncordia sp YS-2002酰胺酶胞内位置分析 | 第50页 |
| ·Ncordia sp YS-2002酰胺酶二级结构预测 | 第50-51页 |
| ·用生物信息学的研究指导实验 | 第51-53页 |
| 第三章 诺卡氏菌酰胺酶基因在大肠杆菌中的克隆表达 | 第53-72页 |
| ·引言 | 第53页 |
| ·材料与方法 | 第53-64页 |
| ·质粒与菌株 | 第54页 |
| ·工具酶与试剂 | 第54页 |
| ·PCR引物设计 | 第54-55页 |
| ·实验方法 | 第55-64页 |
| ·酰胺酶基因在重组大肠杆菌菌中的克隆表达 | 第64-67页 |
| ·酰胺酶基因在大肠杆菌中的融合表达 | 第67-72页 |
| 第四章 结论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 附录 | 第78-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 研究成果及发表的学术文 | 第84-85页 |
| 作者简介 | 第85页 |
