一种新型海洋纤溶酶的研究
| 摘 要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-16页 |
| 第一章 文献综述和立论依据 | 第16-65页 |
| 第一节 文献综述 | 第16-61页 |
| 1 溶栓剂的国内外研究现状及发展趋势 | 第16-44页 |
| ·血栓性疾病及其危害 | 第16-17页 |
| ·凝血与抗凝的基本原理 | 第17-24页 |
| ·凝血系统 | 第17-18页 |
| ·抗凝系统 | 第18-21页 |
| ·纤溶系统 | 第21-24页 |
| ·血栓性疾病的治疗 | 第24-29页 |
| ·血栓性疾病的治疗策略 | 第24-27页 |
| ·不同治疗策略的评价与联用 | 第27-29页 |
| ·溶栓剂分类与作用途径 | 第29-35页 |
| ·传统分类 | 第29-34页 |
| ·现有分类系统的缺陷 | 第34页 |
| ·现有溶栓剂的作用途径 | 第34-35页 |
| ·新型天然溶栓剂与具有临床应用前景的纤溶酶 | 第35-42页 |
| ·动物来源 | 第35-39页 |
| ·微生物来源 | 第39-42页 |
| ·植物来源 | 第42页 |
| ·新型溶栓剂的开发及发展趋势 | 第42-44页 |
| ·现有溶栓剂的主要缺陷 | 第42-43页 |
| ·新型溶栓剂的来源及开发途径 | 第43-44页 |
| ·溶栓剂的发展趋势 | 第44页 |
| 2 海洋心脑血管药物及活性物质研究概况 | 第44-54页 |
| ·研究现状 | 第44-52页 |
| ·糖类及其衍生物 | 第45-48页 |
| ·脂类 | 第48页 |
| ·蛋白及糖蛋白类 | 第48-50页 |
| ·氨基酸及多肽 | 第50页 |
| ·甾醇、皂甙、核苷、萜类及生物碱 | 第50-51页 |
| ·含氮混合物 | 第51-52页 |
| ·三丙酮胺及喹啉酮 | 第52页 |
| ·其他 | 第52页 |
| ·开发策略与前景展望 | 第52-54页 |
| ·海洋心脑血管药物研究的难点 | 第52-53页 |
| ·海洋心脑血管药物的开发策略 | 第53-54页 |
| ·前景展望 | 第54页 |
| 3 海洋无脊椎动物单环刺螠研究进展 | 第54-61页 |
| ·生物学特性 | 第55-57页 |
| ·形态解剖 | 第55页 |
| ·区系分布 | 第55页 |
| ·分类 | 第55页 |
| ·生态习性 | 第55-56页 |
| ·耐受力 | 第56-57页 |
| ·生活史 | 第57页 |
| ·人工培养与繁殖 | 第57页 |
| ·细胞、生化及分子生物学研究 | 第57-60页 |
| ·生物活性物质 | 第58页 |
| ·分类地位 | 第58页 |
| ·消化与营养 | 第58-59页 |
| ·硫化物耐受机制 | 第59页 |
| ·发育 | 第59-60页 |
| ·应用情况及潜在开发价值 | 第60-61页 |
| ·海洋功能保健品 | 第60页 |
| ·海洋药物 | 第60-61页 |
| ·海洋环境保护 | 第61页 |
| ·未来展望 | 第61页 |
| 第二节 立论依据 | 第61-65页 |
| 1 选题依据与背景情况 | 第61-63页 |
| 2 课题研究的目的与意义 | 第63-65页 |
| ·课题研究的目的 | 第63页 |
| ·课题研究的意义 | 第63-65页 |
| 第二章 单环刺螠纤溶酶的寻找与分离纯化 | 第65-81页 |
| 前言 | 第65-66页 |
| 1 材料与方法 | 第66-69页 |
| ·单环刺螠 | 第66页 |
| ·Wistar 大鼠 | 第66页 |
| ·试剂与仪器 | 第66-67页 |
| ·不同组织粗提物的制备 | 第67页 |
| ·具有溶栓作用效果的纤溶酶的筛选 | 第67页 |
| ·酶活力测定 | 第67-68页 |
| ·蛋白浓度测定 | 第68页 |
| ·纤溶酶的分离纯化步骤 | 第68-69页 |
| ·酶的抽提 | 第68页 |
| ·粗品制备 | 第68页 |
| ·酶的精制 | 第68-69页 |
| ·SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-76页 |
| ·不同组织粗提物的溶栓作用效果 | 第69-71页 |
| ·酶的分离制备工艺 | 第71-76页 |
| ·层析纯化 | 第71-74页 |
| ·纯度鉴定与分子量测定 | 第74-75页 |
| ·制备工艺路线 | 第75-76页 |
| ·分离纯化总结 | 第76页 |
| 3 讨论 | 第76-79页 |
| ·纤溶酶在单环刺螠体内的分布 | 第76-77页 |
| ·单环刺螠体内纤溶酶含量丰富 | 第77-78页 |
| ·单环刺螠纤溶酶可能包含一组同工酶 | 第78页 |
| ·单环刺螠纤溶酶制备工艺的优化 | 第78-79页 |
| ·小分子量纤溶酶作为溶栓药物具有潜在的优越性 | 第79页 |
| 4. 小结 | 第79-81页 |
| 第三章 单环刺螠纤溶酶的物理化学性质研究 | 第81-95页 |
| 前言 | 第81页 |
| 1 材料与方法 | 第81-84页 |
| ·试剂与仪器 | 第81-82页 |
| ·糖含量测定 | 第82页 |
| ·酶活力测定 | 第82页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第82页 |
| ·pH 对酶稳定性的影响 | 第82-83页 |
| ·金属离子对酶稳定性的影响 | 第83页 |
| ·温度对酶活力的影响 | 第83页 |
| ·pH 对酶活力的影响 | 第83-84页 |
| ·金属离子对酶活力的影响 | 第84页 |
| 2 结果 | 第84-92页 |
| ·酶蛋白的糖含量 | 第84页 |
| ·酶的热稳定性 | 第84-87页 |
| ·酶的pH 稳定性 | 第87页 |
| ·酶的金属离子稳定性 | 第87-90页 |
| ·最适温度 | 第90页 |
| ·最适pH | 第90-91页 |
| ·酶的激活剂与抑制剂 | 第91-92页 |
| 3 讨论 | 第92-94页 |
| ·铁离子对酶活性的调控作用 | 第93页 |
| ·酶的稳定性及最适反应条件的意义 | 第93-94页 |
| 4 小结 | 第94-95页 |
| 第四章 单环刺螠纤溶酶的激酶活性与动力学研究 | 第95-105页 |
| 前言 | 第95页 |
| 1材料与方法 | 第95-97页 |
| ·试剂与仪器 | 第95页 |
| ·酶活力测定 | 第95-96页 |
| ·平板制作 | 第95-96页 |
| ·溶液配制 | 第96页 |
| ·测定 | 第96页 |
| ·激酶活性测定 | 第96页 |
| ·底物浓度对酶反应速度的影响 | 第96-97页 |
| ·测定酶的动力学参数 | 第97页 |
| 2 结果 | 第97-102页 |
| ·酶的活力测定 | 第97页 |
| ·激酶活性测定 | 第97-99页 |
| ·底物浓度与酶反应速度的关系 | 第99-100页 |
| ·酶的动力学常数 | 第100-102页 |
| 3 讨论 | 第102-104页 |
| ·单环刺螠纤溶酶作为溶栓剂的作用机制 | 第102页 |
| ·底物浓度对酶反应速度的影响 | 第102-104页 |
| 4 小结 | 第104-105页 |
| 第五章 单环刺螠纤溶酶的体外抗凝与溶栓研究 | 第105-124页 |
| 前言 | 第105-106页 |
| 1 材料与方法 | 第106-108页 |
| ·材料与仪器 | 第106页 |
| ·蚓激酶提取 | 第106页 |
| ·酶的抗凝活性检测 | 第106页 |
| ·酶的溶栓活性检测 | 第106-107页 |
| ·酶的血栓溶解率计算 | 第107页 |
| ·单环刺螠纤溶酶与蚓激酶组分比较 | 第107-108页 |
| 2 结果 | 第108-119页 |
| ·单环刺螠纤溶酶的抗凝效果 | 第108-113页 |
| ·酶的抗凝效果观察 | 第108-110页 |
| ·不同浓度的酶的抗凝效果 | 第110-111页 |
| ·酶对细胞损伤的显微镜观察 | 第111-113页 |
| ·单环刺螠纤溶酶的溶栓效果 | 第113-117页 |
| ·酶的溶栓效果观察 | 第113-114页 |
| ·不同浓度酶的溶栓效果 | 第114-115页 |
| ·酶对细胞损伤的显微镜观察 | 第115-117页 |
| ·酶对 Wistar 大鼠血栓的溶解作用 | 第117页 |
| ·酶的血栓溶解率 | 第117-119页 |
| ·单环刺螠纤溶酶与蚓激酶所含的组分 | 第119页 |
| 3 讨论 | 第119-122页 |
| ·酶活性对溶栓及抗凝作用效果的影响 | 第119-120页 |
| ·酶的毒性与副作用 | 第120-121页 |
| ·临床应用前景 | 第121-122页 |
| 4 小结 | 第122-124页 |
| 论文总结 | 第124-126页 |
| 参考文献 | 第126-155页 |
| 英文缩写 | 第155-157页 |
| 致谢 | 第157页 |